이 문서의 목적은 의약품의 인체 임상시험과 품목허가를 뒷받침하는 데 필요한 비임상 발생 및 생식독성(DART) 시험의 평가에 관한 국제 기준을 권고하고 그 조화를 촉진하는 것이다. 이 가이드라인은 위험을 확인·평가·전달하기 위하여 기존 자료를 보완하는 데 쓸 수 있는 전략과 시험 설계를 기술한다. 시험 자료를 해석할 때 고려하여야 하는 일반 개념과 권고사항도 제시한다.

The purpose of this document is to recommend international standards for, and promote harmonization of, the assessment of nonclinical developmental and reproductive toxicity (DART) testing required to support human clinical trials and marketing authorization for pharmaceuticals. The guideline describes potential strategies and study designs to supplement available data to identify, assess, and convey risk. General concepts and recommendations are also provided that should be considered when interpreting study data.

이 문서는 1993년에 처음 발행된 ICH 가이드라인 "S5 의약품의 생식독성 검출"의 개정판이다. 이번 개정으로 가이드라인을 다른 ICH 가이드라인과 일치시키고, 용량 단계 선정에서 노출 안전역의 사용을 상세히 설명하며, 위해성 평가에 관한 항을 추가하고, 적용 범위를 백신과 바이오의약품까지 넓혔다. 또한 대체시험법의 적격성 평가와 가능한 사용 시나리오를 기술하고, 발생독성 시험을 유예하는 선택지를 제시한다.

This is a revision of the ICH guideline “S5 Detection of Toxicity to Reproduction for Medicinal Products” that was originally published in 1993. This revision brings the guideline into alignment with other ICH guidelines, elaborates on the use of exposure margins in dose level selection, incorporates a section on risk assessment, and expands the scope to include vaccines and biopharmaceuticals. It also describes qualification of alternative assays, potential scenarios of use, and provides options for deferral of developmental toxicity studies.

인체용 의약품이 생식과 발생에 미치는 영향을 평가하려면, 일반적으로 의약품과 적절한 경우 그 대사체(ICH M3 (1), ICH S6 (2))에 대한 노출이 생식과 발생의 모든 단계에 미칠 수 있는 영향을 다루는 정보가 확보되어 있어야 한다. 어떤 가이드라인도 가능한 모든 경우를 다룰 만큼 충분한 정보를 제공할 수는 없으므로 시험 전략에 유연성이 필요하다.

To assess a human pharmaceutical’s effect on reproduction and development, there should generally be information available that addresses the potential impact of exposure to a pharmaceutical and, when appropriate, its metabolites (ICH M3 (1), ICH S6 (2)) on all stages of reproduction and development. No guideline can provide sufficient information to cover all possible cases, and flexibility in testing strategy is warranted.

DART 시험의 목적은 의약품이 포유류 생식에 미치는 영향 가운데 인체 위해성 평가와 관련된 영향을 모두 밝히는 것이다. 수행하는 시험군은 적절한 범위에서 하나의 완전한 생활사(즉, 한 세대의 수태부터 다음 세대의 수태까지)에 걸친 관찰을 포함하여야 하며, 즉각적인 이상 영향과 잠복성 이상 영향을 모두 검출할 수 있어야 한다. 일반적으로 평가하는 생식 단계는 다음과 같다.

The aim of DART studies is to reveal any effect of the pharmaceutical on mammalian reproduction relevant for human risk assessment. As appropriate, the set of studies conducted should encompass observations through one complete life cycle (i.e., from conception in one generation through conception in the following generation), and permit detection of immediate and latent adverse effects. The following stages of reproduction are generally assessed:

해당 단계가 대상 집단과 관련이 없는 경우가 아니면 모든 단계에 대한 위험을 평가하여야 한다. 개별 시험에서 다룰 단계는 의뢰자의 재량에 맡기지만, 의약품 개발 과정에서 시험을 수행하는 시기는 시험 대상 집단과 의약품 개발 단계에 따라 달라진다(ICH M3, ICH S6 및 ICH S9 (3) 참조).

The risks to all stages should be assessed, unless the stage is not relevant to the intended population. The stages covered in individual studies are left to the discretion of the Sponsor, although the timing of studies within the pharmaceutical development process is dependent on study populations and phase of pharmaceutical development (see ICH M3, ICH S6 and ICH S9 (3)).

이 가이드라인은 바이오의약품, 감염병 백신(및 그 신규 구성 성분), 최종 의약품의 일부인 신규 첨가제를 포함한 모든 의약품에 적용한다. 이 가이드라인에서 "의약품"이라는 용어는 이러한 치료 수단을 모두 포괄하는 뜻으로 쓴다. 이 가이드라인은 세포치료제, 유전자치료제 및 조직공학제제에는 적용하지 않는다. 이 가이드라인에 제시된 방법론적 원칙(예: 시험 설계, 용량 선정, 동물종 선정 등)은 생식독성 및/또는 발생독성 시험을 수행하는 것이 적절한 모든 화합물에 적용한다. 비임상 DART 시험이 필요한지와 언제 필요한지에 관해서는 이 가이드라인을 ICH M3, ICH S6 및 ICH S9와 함께 읽어야 한다.

This guideline applies to all pharmaceuticals, including biopharmaceuticals, vaccines (and their novel constitutive ingredients) for infectious diseases, and novel excipients that are part of the final pharmaceutical product. For the purposes of this guideline, the term “pharmaceutical” is used to encompass all of these treatment modalities. This guideline does not apply to cellular therapies, gene therapies and tissue-engineered products. The methodological principles (e.g., study design, dose selection and species selection, etc.) outlined in this guideline apply to all compounds for which the conduct of reproductive and/or developmental toxicity studies is appropriate. This guideline should be read in conjunction with ICH M3, ICH S6, and ICH S9 regarding whether and when nonclinical DART studies are warranted.

개발 중인 의약품 대부분은 위에서 제시한 생식 주기의 모든 단계에 대해 평가하여야 하지만, 아래에 제시한 바와 같이 타당한 근거가 있어야 하는 일부 예외가 있을 수 있다. 임상 개발을 뒷받침하기 위하여 이들 단계는 대개 세 가지 생체내 시험 유형으로 평가해 왔다: 1) 수태능 및 초기 배 발생 시험(FEED - 단계 A와 B), 2) 두 동물종에서의 배·태자 발생 시험(EFD - 단계 C와 D), 3) 출생 전후 발생 시험(PPND – 단계 C부터 F까지). 화합물마다 평가할 단계를 정하고 수행하기에 가장 적절한 시험을 파악하여야 한다. 생식과 발생에 대한 영향을 평가하기 위한 전체 통합 시험 전략을 수립할 때 고려할 핵심 요소는 다음과 같다.

The majority of pharmaceuticals being developed should be assessed for all stages of the reproductive cycle identified above, although there can be some exceptions which should be justified, as indicated below. To support clinical development, these stages have typically been evaluated using three in vivo study types: 1) a fertility and early embryonic development study (FEED - stages A and B), 2) embryo-fetal development studies in two species (EFD - stages C and D), and 3) a pre- and a postnatal development study (PPND – stages C through F). For each compound, the stages that are to be evaluated should be determined and the most appropriate studies to conduct should be identified. Key factors to consider when developing an overall integrated testing strategy to evaluate effects on reproduction and development include:

이러한 개념은 가이드라인 전반에 걸쳐 더 자세히 다룬다.

These concepts are discussed in more detail throughout the guideline.

전체 위해성 평가를 약화시키지 않는 범위에서 실험 전략은 동물 사용을 최소화하여야 한다. 이를 위한 접근방법으로는 전형적인 시험 유형을 결합한 시험의 수행(7항 참조)과 위해성 평가를 위해 적절히 적격성 평가된 대체시험법(부록 2 참조)을 들 수 있다. 많은 임상 개발 프로그램이 3상 이전에 종료되므로, ICH M3에 따라 진행 중인 임상 개발을 뒷받침하도록 시험 시기를 적절히 정하여(예: 가임 여성의 등록을 뒷받침하기 위한 배·태자 발생독성 자료) 동물 사용을 줄일 수도 있다.

To the extent that it does not diminish the overall risk assessment, the experimental strategy should minimize the use of animals. Approaches towards this goal can include the conduct of studies that combine typical study types (see Section 7), as well as appropriately qualified alternative assays for risk assessment (see Annex 2). Since many clinical development programs are terminated prior to Phase 3, animal use can also be reduced by appropriately timing studies to support ongoing clinical development (e.g., embryo-fetal developmental toxicity data to support enrollment of women of childbearing potential) as per ICH M3.

DART 시험은 위해성 평가에 기여하게 되므로 일반적으로 비임상시험관리기준(GLP) 규정에 따라 수행하여야 한다. 그러나 비GLP 시험에서 관련 DART 위험이 확인된 경우, 그 소견을 GLP 조건에서 확인하기 위해 시험을 반복할 필요가 반드시 있는 것은 아니다. 관련 위험이란 의도한 임상 노출 수준 또는 그 근처에서 나타나고, 그 성질상 사람에게 외삽될 가능성이 상당히 높은 위험을 말한다(9항 참조). 특수한 시험계나 방법을 사용하는 일부 시험 유형 또는 일부 시험의 일부 측면에는 GLP 준수가 기대되지 않음을 인정한다. 그러나 높은 수준의 과학적 기준을 적용하여야 하며, 자료 수집 기록을 쉽게 열람할 수 있어야 한다.

DART studies should, in general, be conducted according to Good Laboratory Practice (GLP) regulations, as they will contribute to the risk assessment. However, if a relevant DART risk is identified in a non-GLP study, repetition of the study to confirm the finding(s) under GLP conditions is not necessarily warranted. A relevant risk is one that occurs at or near intended clinical exposures and is of a nature that is reasonably likely to translate to humans (see Section 9). It is recognized that GLP compliance is not expected for some study types, or aspects of some studies, employing specialized test systems or methods. However, high quality scientific standards should be applied with data collection records readily available.

미준수 부분은 시험 보고서에 밝혀야 하며, 그것이 시험 결과/자료 해석에 미치는 영향을 전체 안전성 평가와 관련지어 고려하여야 한다.

Areas of non-compliance should be identified within the study report and their impact on study results/data interpretation should be considered relative to the overall safety assessment.

의도한 환자 집단 또는 치료 적응증은 DART 시험의 범위에 영향을 줄 수 있다. 질환의 특성상 대상 집단에서 DART가 의약품의 위험에 미치는 영향이 최소일 것으로 보이면 생식과 발생의 모든 단계를 평가하는 시험은 필요하지 않다. 예를 들어, 폐경 후 여성 환자만으로 이루어진 집단, 소아 또는 사춘기 이전 청소년 집단에서의 사용, 임신을 배제할 수 있는 입원 환경의 환자 집단에는 모든 단계를 다루는 시험이 반드시 적절한 것은 아니다.

The intended patient population or therapeutic indication can influence the extent of DART testing. Studies evaluating all stages of reproduction and development are not warranted if the disease indicates that DART will have minimal impact on the risk of the pharmaceutical in the target population. For example, studies covering all stages are not necessarily appropriate for an exclusively post-menopausal female patient population, for use in the pediatric or juvenile pre-pubescent population, or for patient populations in hospitalized settings where pregnancy can be excluded.

시험 전략을 설계하기 전에, 의약품의 의도된 약리 작용이 수태능, 정상적인 EFD 또는 특정 평가변수의 평가(예: 전신마취제와 교배 행동 평가)와 양립할 수 없는 것으로 알려져 있는지를 확인하여야 한다. 이 판단은 약리 작용이 유사한 다른 의약품의 자료, 표적 결합에 따른 알려진 영향, 또는 관련 유전 질환을 가진 사람에서 나타나는 영향에 관한 지식을 근거로 할 수 있다. 예를 들어, 조기 진통을 예방하기 위해 개발된 의약품에 대해서는 PPND 시험의 설계를 변경하는 것이 적절할 것이다. 의도된 약리 작용이 시험 평가변수와 양립할 수 없으면, 타당한 근거를 제시하여 특정 생식 평가변수에 대한 시험을 생략할 수 있다.

Before designing a testing strategy, it should be determined if the intended pharmacologic effects of a pharmaceutical are known to be incompatible with fertility, normal EFD, or assessment of particular endpoints (e.g., a general anesthetic and assessment of mating behavior). This assessment can be based on data with other pharmaceuticals with similar pharmacology, known effects of target engagement, or on knowledge of effects in humans with related genetic diseases. For example, it would be appropriate to modify the design of a PPND study for a pharmaceutical developed to prevent pre-term labor. If the intended pharmacologic effects are incompatible with the study endpoints, testing for a particular reproductive endpoint is not warranted, with justification.

성적으로 성숙한 동물을 사용한 반복투여독성시험은 생식기관에 대한 독성에 관한 중요한 정보를 제공할 수 있으며, 이는 DART 시험의 설계에 영향을 줄 수 있다. 해당 화합물의 기존 독성 자료는 용량 단계, 독성동태 프로파일, 투여 기간을 감안하여 항상 고려하여야 한다. 예를 들어, 정소 조직에 영향을 주는 화합물의 경우 표준 수태능 시험 설계를 변경하여 투여 기간이나 동거 개시 시점을 바꿀 수 있다.

Repeated–dose toxicity studies with sexually mature animals can provide important information on toxicity to reproductive organs that can affect the design of a DART study. The existing toxicology data for the compound should always be considered, taking into account the dose levels, toxicokinetic profile, and dosing duration. For example, the standard fertility study design can be modified to alter the duration of dosing, or the start of cohabitation, for a compound that affects testicular tissue.

생식 및 발생 평가변수를 평가하는 시험의 수행 시기에 관한 일반 지침은 ICH M3, ICH S6 및 ICH S9에 기술되어 있다. 특정 DART 평가를 수행할 시기는 임상시험 또는 의도한 환자 집단에서 의약품의 안전한 사용을 뒷받침하기 위해 이 자료가 필요한지를 고려하여 정하여야 한다. 따라서 특정 생식 단계의 평가 시기를 바꾸는 것을 고려하는 것이 적절할 수 있다. 추가 선택지는 4.2.2항과 4.2.3항에서 다룬다.

General guidance on the timing for conduct of studies assessing reproductive and developmental endpoints is described in ICH M3, ICH S6, and ICH S9. The timing for when to conduct specific DART assessments should take into consideration the need for these data to support the safe use of the pharmaceutical in clinical trials or the intended patient population. Consequently, it can be appropriate to consider altering the timing of the assessment of specific reproductive stages. Additional options are discussed in Section 4.2.2 and 4.2.3.

노출 자료는 생식독성시험(용량범위 설정(DRF) 시험 또는 본시험)이나 반복투여독성시험에서 얻을 수 있다. 그러나 임신으로 인해 TK 변수가 의미 있게 변할 가능성이 있으므로, 임신이 노출을 변화시키는지 확인하는 것이 권장된다. 노출비를 근거로 용량을 선정하는 경우(6.1.3항 참조), 임신 동물에서 GLP를 준수한 TK 자료가 요구된다. 채혈일은 타당한 근거를 제시하여야 한다.

Exposure data can be generated in either reproductive (dose range finding (DRF) or pivotal) or repeated-dose toxicity studies. However, given the potential for meaningful changes in TK parameters induced by pregnancy, it is recommended to determine if pregnancy alters exposure. If dose selection is based on exposure ratio (see section 6.1.3), GLP-compliant TK data in pregnant animals is expected. Sampling day(s) should be justified.

필요한 경우 배아 또는 태자에서의 의약품 농도를 측정하면 발생 위해에 관한 상반되거나 모호한 증거를 해석하는 데 도움이 될 수 있다. 실제 노출을 확인하기 위해 이 정보를 별도 시험에서 수집할 수 있다. 그러나 사람 수태산물에서의 잠재적 농도와 직접 비교하는 것은 적절하지 않다.

When warranted, determination of the pharmaceutical’s concentration in the embryo or fetus can facilitate interpretation of discordant or equivocal evidence of developmental hazard. This information can be collected in a separate study to determine the actual exposure. However, a direct comparison to the potential levels in the human conceptus is not appropriate.

필요한 경우 유즙을 채취하거나 이유 전 기간 동안 출생자에서 노출을 입증하여 유즙 이행의 증거를 얻을 수 있다.

Evidence of lactational excretion can be obtained, when warranted, by sampling milk or by demonstrating exposure in offspring during the pre-weaning period.

TK 자료 수집에 관한 일반 개념은 ICH S3A (4)에서 다룬다.

General concepts regarding TK data collection are discussed in ICH S3A (4).

의약품의 잠재적 생식·발생 위험을 평가하는 전략에는 일반적으로 하나 이상의 생체내 시험이 포함된다. 핵심은 일부 동물종(예: 비인간 영장류(NHP))에서는 모든 단계를 평가할 수 없지만, 이들 시험 전체로 단계 사이에 공백이 없어야 하고 생식 과정의 모든 단계를 평가할 수 있어야 한다는 것이다. 대부분의 의약품에는 대개 3시험 설계가 적절하지만, 특정 제품의 요구를 다루고 동물 사용을 줄이기 위해 이들 시험 설계를 다양하게 조합하여 수행할 수 있다. FEED, EFD, PPND 시험과 이들을 조합한 시험의 세부 사항은 부록 1에 있다. 개별 시험에서 다룰 단계는 의뢰자의 재량에 맡긴다. 어떤 시험 설계를 사용할지 정할 때에는 해당 의약품에 대해 확보된 약리, 독성동태 및 독성 자료를 모두 고려하여야 한다.

The strategy to evaluate the potential reproductive and developmental risk of a pharmaceutical generally includes one or more in vivo studies. The key factor is that, in total, they leave no gaps between stages and allow for evaluation of all stages of the reproductive process, although in some species (e.g., the non-human primate (NHP)) it is not possible to evaluate all stages. For most pharmaceuticals, the 3-study design will usually be appropriate, although various combinations of these study designs can be conducted to address specific product needs and to reduce animal use. Study details for the FEED, EFD, and PPND studies, and combinations thereof, can be found in Annex 1. The stages covered in individual studies are left to the discretion of the sponsor. All available pharmacological, toxicokinetic, and toxicological data for the pharmaceutical should be considered in determining which study design(s) should be used.

FEED 시험의 목적은 수컷 및/또는 암컷의 교배 전에 시작하여 교배와 착상까지 계속한 투여로 인한 이상 영향을 시험하는 것이다. 이는 생식 과정 중 단계 A와 B의 평가에 해당한다. 기간이 2주 이상인 반복투여독성시험 결과를 이용하면 별도의 용량범위 시험 없이 수태능 시험을 설계할 수 있는 경우가 많지만, 이처럼 짧은 기간의 시험으로는 모든 이상 영향을 밝히기에 불충분할 수 있다.

The aim of the FEED study is to test for adverse effects resulting from treatment initiated prior to mating of males and/or females and continued through mating and implantation. This comprises evaluation of Stages A and B of the reproductive process. Results from repeated-dose toxicity studies of at least two weeks duration can often be used to design the fertility study without conducting further dose ranging studies, although studies of such short duration can be insufficient to reveal all adverse effects.

대상 집단의 노출을 뒷받침하기 위해 FEED 시험이 필요한 경우, 대부분 교배 단계가 요구된다. 이러한 시험은 대개 설치류에서 수행한다. 수태능에 대한 이상 영향이 예상되지 않으면, 같은 시험에서 암수 모두에 투여하고 함께 동거시킬 수 있다. 시험에서 수태능에 대한 영향이 확인되면, 그 다음에 영향을 받은 성별을 확인하여야 한다. 반면, 작용 방식이나 반복투여시험 결과를 근거로 이상 영향이 예상되면, 투여한 각 성별을 투여하지 않은 이성 동물과 동거시킬 수 있다. 이는 한 시험 안에 별도의 투여군을 두거나 두 개의 FEED 시험을 따로 수행하여 달성할 수 있다. 수태능 및 초기 배 발생에 대한 이상 영향의 회복성은 위해성 평가에 중요한 영향을 줄 수 있다.

A mating phase is expected in most cases when a FEED study is warranted to support exposure of the target population. Such studies are typically performed in rodents. If no adverse effects on fertility are anticipated, both sexes can be treated and cohabited together in the same study. If effects on fertility are identified in the study, the affected sex should then be determined. In contrast, if adverse effects are anticipated based on mode of action or on the results of repeated-dose studies, each treated sex can be cohabited with untreated animals of the opposite sex. This can be achieved using separate treatment arms within a single study or by the conduct of two separate FEED studies. Reversibility of adverse effects on fertility and early embryonic development can have an important impact on risk assessment.

암컷 설치류의 FEED 시험 설계(부록 1 참조)로 발정 주기, 난관 수송, 착상, 착상 전 단계 배아의 발생에 대한 영향을 검출할 수 있다. 발정/월경 주기를 평가하는 경우, 투여 관련 영향과 동물 간/동물 내 변동을 구별하기 위해 기저 주기 자료(최소 2~3주기)를 얻는 것이 중요하다. 발정 주기 관찰은 교배 확인 시점까지 계속하여야 한다.

The FEED study design in female rodents (see Annex 1) allows for the detection of effects on the estrous cycle, tubal transport, implantation, and development of preimplantation stages of the embryo. When estrous/menstrual cycles are evaluated, it is important to obtain baseline cycle data (over 2 or 3 cycles minimum) to distinguish between treatment-related effects and inter/intra animal variability. The monitoring of estrous cyclicity should continue through the time of confirmation of mating.

동거 전 2~4주 투여를 포함하는 수컷 설치류의 FEED 시험 설계로 정자형성과 부정소 수송에 대한 영향을 검출할 수 있다. 반복투여시험 자료가 정소에 대한 독성을 시사하면 동거 전 투여 기간을 10주로 연장하는 것이 적절할 수 있으며, 이렇게 하면 전체 정자형성 주기와 부정소 수송에 대한 영향을 평가할 수 있다. FEED 시험으로는 수컷 생식기관의 조직학적 검사로 검출할 수 없는 기능적 영향(예: 성욕, 부정소 정자 성숙, 사정에 대한 영향)도 검출할 수 있다.

The FEED study design for male rodents that includes 2 to 4 weeks of treatment prior to cohabitation allows for the detection of effects on spermatogenesis and epididymal transport. When data from repeated-dose studies suggest toxicity to the testis, it can be appropriate to extend the duration of pre-cohabitation treatment to 10 weeks; this permits assessment of effects on the full spermatogenic cycle as well as epididymal transport. The FEED study additionally permits detection of functional effects (e.g., on libido, epididymal sperm maturation, ejaculation) that cannot be detected by histological examinations of the male reproductive organs.

작용 방식이나 이전 시험 자료로 보아 우려할 이유가 있으면, 수태능에 대한 잠재적 영향을 더 특성분석하기 위해 반복투여독성시험 및/또는 수태능 시험에 추가 검사(예: 정자 수 및 형태/운동성 평가를 위한 정자 채취, 호르몬 농도 측정, 발정/월경 주기 관찰)를 포함할 수 있다.

When there is cause for concern based on mode of action or data from previous studies, additional examinations can be included in repeated-dose toxicity and/or fertility studies (e.g., sperm collection for counts and morphology/motility assessments, measuring hormone levels, or monitoring of the estrous/menstrual cycle) to further characterize potential effects on fertility.

바이오의약품이 설치류 또는 토끼에서 약리학적 활성을 나타내면, 이들 동물종 중 하나에서 FEED 시험을 수행하는 것이 권장된다. 개나 NHP 같은 비설치류에서는 일반적으로 교배 평가를 할 수 없다. 예를 들어, NHP가 유일하게 약리학적으로 관련된 동물종인 경우(많은 단일클론항체가 그러하다. ICH S6 참조), 기간이 3개월 이상인 반복투여독성시험에서 얻은 생식 조직의 병리조직학적 검사로 수태능 평가를 대신할 수 있다. 이러한 접근방법에는 수컷과 암컷 동물 모두의 생식기관에 대한 포괄적인 병리조직학적 검사가 포함되어야 한다(주 1). 바이오의약품이 진행성 암 치료용이어서 FEED 시험이 필요하지 않은 경우를 제외하고는, 생식 조직을 적절히 평가할 수 있도록 시험 개시 시점에 동물이 성적으로 성숙해 있어야 한다.

If the biopharmaceutical is pharmacologically active in rodents or rabbits, a FEED study in one of these species is recommended. Mating evaluations are not generally feasible in non-rodents such as dogs and NHPs. For example, if NHPs are the only pharmacologically relevant species (as for many monoclonal antibodies, see ICH S6), histopathological examinations of the reproductive tissues from the repeated-dose toxicity studies of at least three months duration can serve as a substitute for the fertility assessments. Such an approach should include a comprehensive histopathological examination of the reproductive organs from both male and female animals (Note 1). Unless the biopharmaceutical is intended to treat advanced cancer, in which case FEED studies are not warranted, animals should be sexually mature at study initiation in order for an adequate evaluation of the reproductive tissues to be made.

이 자료는 수태능의 기능적 평가를 할 수 없고 병리조직학적 평가 결과만으로 수태능 및 초기 배 발생에 대한 영향을 예측할 수 있는 것은 아니므로, 생식 조직의 구조에 관한 정보만 제공할 것이다.

These data would only provide information on the structure of the reproductive tissues, as no functional assessment of fertility can be made and predicting effects on fertility and early embryonic development is not always possible based solely on the results of histopathology assessments.

EFD 시험의 목적은 기관형성기 동안 임신 암컷에 투여(단계 C)한 후 임신 암컷과 배아 및 태자의 발생에 나타나는 이상 영향을 검출하는 것이다. EFD 시험에는 태자의 발생과 생존에 대한 평가(단계 C부터 D까지)가 포함된다.

The aim of the EFD studies is to detect adverse effects on the pregnant female and development of the embryo and fetus following treatment (Stage C) of the pregnant female during organogenesis. EFD studies include evaluation of fetal development and survival (Stages C through D).

대부분의 저분자 의약품은 대개 두 동물종(즉, 설치류와 비설치류(대개 토끼))에서 EFD에 대한 영향을 평가한다. 시험 동물종 중 적어도 하나는 목적하는 약력학적 반응을 나타내야 한다. 의약품이 통상 사용하는 어떤 동물종(5.1항)에서도 약력학적 활성을 나타내지 않으면, 약리학적 관련성을 보장할 만큼 모델이 충분히 특성분석되어 있다는 전제에서 비통상 동물종(5.2항), 유전자변형 동물 또는 종 특이적 대체 분자(5.3항)(예: 올리고뉴클레오타이드의 경우)의 사용을 고려할 수 있다. 유전자변형 동물과 대체 분자는 일반적으로 위해 확인에 가장 유용하지만, 위해성 평가에 사용할 때는 한계가 있다.

For most small molecules, effects on EFD are typically evaluated in two species (i.e., rodent and non-rodent (typically rabbit)). At least one of the test species should exhibit the desired pharmacodynamic response. If the pharmaceutical is not pharmacodynamically active in any routinely used species (Section 5.1) then non-routine species (Section 5.2), genetically modified animals, or use of a species-specific surrogate molecule (Section 5.3) (e.g., in the case of oligonucleotides) can be considered, provided there is sufficient characterization of the model to ensure pharmacologic relevance. Genetically modified animals and surrogate molecules are generally most useful for hazard identification, but have limitations when used for risk assessment.

관련 모델이 없는 경우(예: 약리학적 표적이 정상 상태에서든 질병 상태에서든 사람에게만 존재하는 경우)에도, 표적 외 영향이나 이차 약리 작용의 이상성을 검출하기 위해 두 동물종에서 EFD 시험을 수행하여야 한다.

Even when there are no relevant models (e.g., the pharmacological target only exists in humans, either normally or in the diseased state), EFD studies should be conducted in two species to detect the adversity of off-target effects or secondary pharmacology.

최대 권장 인체 용량(MRHD)에서 예상되는 임상 노출과 유사한 노출에서 단일 동물종에 기형 또는 배·태자 치사(MEFL)를 유발한다는 명백한 양성 결과는 위해성 평가에 충분할 수 있다. 제한된 상황에서는 확정 EFD 시험 대신 다른 접근방법을 사용할 수 있다(부록 2 참조). 또는 EFD 시험을 수행하지 않고도 위험을 전달하기에 적절한 정보가 있을 수 있다. 의도된 약리 기전이 EFD에 이상 영향을 준다는 것을 시사하는 증거(예: 작용기전, 유전자변형 동물의 표현형 자료)는 위험을 전달하기에 충분할 수 있다.

Clearly positive results for the induction of malformations or embryo-fetal lethality (MEFL), in a single species, at exposures similar to that at the projected clinical exposure at the maximum recommended human dose (MRHD) can be sufficient for risk assessment. Under limited circumstances, other approaches can be used in place of definitive EFD studies (see Annex 2). Alternatively, there can be adequate information to communicate risk without conducting EFD studies. Evidence suggesting an adverse effect of the intended pharmacological mechanism on EFD (e.g., mechanism of action, phenotypic data from genetically modified animals) can be sufficient to communicate risk.

바이오의약품이 EFD에 미치는 영향은 두 동물종(설치류 하나와 비설치류 하나)이 모두 약리학적으로 관련된 경우 대개 두 동물종에서 평가하여야 한다. 그러나 설치류는 약리학적으로 관련되지 않은 경우가 많으며, 이 경우 약리학적으로 관련된 비설치류 한 동물종에서 EFD 평가를 수행할 수 있다. NHP가 유일한 관련 동물종인 경우, EFD 시험 대신 강화 출생 전후 발생(ePPND) 시험을 수행할 수 있다. 진행성 암 치료용 바이오의약품은 대개 약리학적으로 관련된 한 동물종에서만 평가하면 된다(ICH S9).

The effect of biopharmaceuticals on EFD should typically be assessed in two species (one rodent and one non-rodent) if both are pharmacologically relevant. However, the rodent is often not pharmacologically relevant, in which case EFD assessment in a single pharmacologically relevant non-rodent species can be conducted. In cases where the NHP is the only relevant species, an enhanced pre- and postnatal development (ePPND) study can be conducted instead of an EFD study. Biopharmaceuticals intended for the treatment of advanced cancer typically need only be assessed in a single pharmacologically relevant species (ICH S9).

바이오의약품이 생식독성시험과 관련된 어떤 동물종에서도 오솔로그 표적과 상호작용하지 않아 관련 동물종을 확인할 수 없는 경우, ICH S6에 기술된 바와 같이 대체 분자 또는 형질전환 모델의 사용을 고려할 수 있다. 대체 분자를 사용하여 사람 노출 대비 안전역을 계산하는 것은 적절하지 않다. 사용할 수 있는 관련 동물종, 유전자변형 동물 또는 대체 분자가 없으면 생체내 생식독성시험은 의미가 없다. 이 경우 위해성 평가에 사용한 접근방법 또는 시험을 수행하지 않는 근거를 타당하게 제시하여야 한다.

When no relevant species can be identified because the biopharmaceutical does not interact with the orthologous target in any species relevant to reproductive toxicity testing, use of surrogate molecules or transgenic models can be considered, as described in ICH S6. Calculating safety margins relative to human exposures with surrogate molecules is not appropriate. If there are no relevant species, genetically modified animals or surrogates available, in vivo reproductive toxicity testing is not meaningful. In this case, the approach used for risk assessment, or rationale for not conducting studies, should be justified.

배·태자 발생에 대한 잠재적 위해를 검출하기 위해 여러 시험관내, 생체외, 비포유류 생체내 시험(대체시험법)이 개발되어 있다. 이들 시험법은 EFD에 대한 이상 영향을 찾는 신약 탐색 선별시험으로 사용되어 왔고, 독성 기전을 이해하는 데 도움을 주어 왔으며, 이는 비임상 자료를 인체 위험으로 외삽하는 데(특히 사람 특이적 표적의 경우) 유용할 수 있다. 이러한 목적으로 대체시험법을 계속 사용하는 것을 장려한다.

A number of alternative in vitro, ex vivo, and non-mammalian in vivo assays (alternative assays) have been developed to detect potential hazards to embryo-fetal development. They have been used as drug discovery screens for adverse effects on EFD and have assisted in the understanding of the mechanism of toxicity, which can be useful for translating nonclinical data to human risk (especially for human-specific targets). The continued use of alternative assays for these purposes is encouraged.

대체시험법은 적절히 적격성 평가되면 기존 생체내 시험을 유예하거나 (특정 상황에서) 대체할 수 있는 잠재력이 있다. 이는 동물 사용을 줄일 수 있다는 부가적 이점이 있다. 이러한 시험법의 적격성 평가 시 고려할 개념과 이러한 시험법의 사용이 적절할 수 있는 사례는 부록 2에 있다. 대체시험법을 포함하는 접근방법은 위에서 기술한 현행 시험 체계가 제공하는 것과 적어도 동등한 수준의 인체 안전성 보증 신뢰도를 제공하여야 한다. 이 문서 작성 시점의 과학 발전 방향에 비추어 볼 때, 규제 목적으로는 여러 대체시험법을 단계적 접근방법이나 시험 조합 방식 안에서 사용하게 될 것으로 예상된다. 이러한 시험 전략은 특정 사용 맥락 안에서 적격성 평가되며, 사용 맥락은 시험법의 화학적 적용 영역과 시험법이 다루는 생물학적 기전의 특성분석으로 정의된다.

If properly qualified, alternative assays have the potential to defer or replace (in certain circumstances) conventional in vivo studies. This has the added benefit of potentially reducing animal use. Concepts to consider when qualifying these assays, and examples when the use of such assays could be appropriate, appear in Annex 2. Approaches that incorporate alternative assays should provide a level of confidence for human safety assurance at least equivalent to that provided by the current testing paradigms described above. Based on the direction of scientific development as of the writing of this document, it is expected that for regulatory purposes multiple alternative assays will be used within a tiered or battery approach. These testing strategies will be qualified within a certain context of use, which is defined by the chemical applicability domain of the assay, and by characterization of the biological mechanisms covered by the assay.

적절한 시험 전략의 설계는 누적 증거 가중(weight-of-evidence) 접근방법에 기초한다. ICH M3는 확정 EFD 시험을 수행하기 전에 두 동물종의 예비 배·태자 발생(pEFD) 독성 자료로 가임 여성(WOCBP)의 제한적 포함(최대 150명의 WOCBP, 최대 3개월)을 뒷받침하는 것을 허용한다. 이러한 고려사항에 근거하여, 이 가이드라인은 ICH M3를 확장하여 3상 임상시험 이전에 WOCBP의 포함을 뒷받침하는 두 가지 추가 선택지를 허용한다.

The design of an appropriate testing strategy relies on a cumulative weight-of-evidence approach. ICH M3 allows preliminary embryo-fetal developmental (pEFD) toxicity data from two species to support the limited inclusion of women of childbearing potential (WOCBP) (up to 150 WOCBP for up to 3 months) before conducting definitive EFD studies. Based on these considerations, this guideline expands on ICH M3 by allowing two additional options to support inclusion of WOCBP prior to Phase 3 clinical trials:

PPND 시험의 목적은 착상부터 이유까지 모체 동물에 노출시킨 후의 유해영향을 검출하여 임신 또는 수유 중인 암컷과 새끼의 발생에 대한 영향을 평가하는 것이다. 이 기간에 유발된 영향은 늦게 나타날 수 있으므로, 새끼의 발생은 성성숙 시기까지(즉, 단계 C~F) 관찰한다. PPND 평가에는 통상 설치류를 사용하나, 적절한 경우 다른 동물종을 사용할 수 있다(부록 1 참조).

The aim of the PPND study is to detect adverse effects following exposure of the maternal animal from implantation through weaning to evaluate effects on the pregnant or lactating female and development of the offspring. Since manifestations of effects induced during this period can be delayed, development of the offspring is monitored through sexual maturity (i.e., Stages C to F). The rodent is usually used to assess PPND; however, other species can be used as appropriate (See Annex 1).

대부분의 경우 적절한 정보는 일반적으로 이전 시험에서 얻을 수 있으므로 예비(용량설정) PPND 시험은 필요하지 않다. 다만, 이유 전 또는 이유 시점에 새끼를 종료하는 예비 PPND 시험을 용량 수준 선정이나 시험 설계 결정, 그리고/또는 새끼 노출 자료 확보에 활용할 수 있다.

In most cases, a preliminary (dose range finding) PPND study is not warranted, because the appropriate information is generally available from prior studies. However, a preliminary PPND study with termination of the pups before or at weaning can be used to select dose levels or inform study design and/or to provide pup exposure data.

소아 개발을 뒷받침하기 위해 변형 PPND/ePPND 시험 설계를 고려하는 경우 ICH S11(5)을 참조한다.

If a modified PPND/ePPND study design is being considered to support pediatric development, see ICH S11 (5).

비인간 영장류(NHP)에서만 시험할 수 있는 의약품의 경우 ePPND 시험으로 출생 후 영향을 제한적으로 평가할 수 있으나, 일반적으로 새끼를 성숙기까지 추적하는 것은 실행 가능하지 않다(부록 1 및 ICH S6 참조).

For pharmaceuticals that can only be tested in the NHP, the ePPND study can provide a limited assessment of postnatal effects, but it is not generally feasible to follow the offspring through maturity (See Annex 1 and ICH S6).

DART를 검출하기 위해서는 포유류를 사용하여야 한다. 이미 완료된 독성시험에서와 같은 동물종과 계통을 사용하면 약동학과 대사를 특성분석하거나 용량을 설정하기 위하여 추가 동물을 사용하거나 추가 시험을 수행할 필요가 없어질 수 있다. 사용하는 동물종은 잘 특성분석되어 있어야 하며 해당 시험의 평가변수에 대한 영향을 검출하는 데 적절하여야 한다(예: 건강, 수태능, 번식력, 기형 및 배·태자 사망의 배경 발생률 등의 측면에서).

Mammalian species should be used to detect DART. The use of the same species and strain as in already completed toxicity studies can eliminate the need to use additional animals or conduct additional studies to characterize pharmacokinetics and metabolism, and/or for dose range finding. The species used should be well-characterized and relevant for detecting effects on the endpoints in a particular study (e.g., with respect to health, fertility, fecundity, background rates of malformation and embryo-fetal death, etc.).

랫드는 실용성, 이 동물종에 대한 약리학적 일반 지식, 비임상 관찰 결과 해석에 통상 이용 가능한 광범위한 독성 자료, 그리고 많은 양의 배경 대조 자료 때문에 일반적으로 DART 시험에 적절하며 가장 흔히 사용되는 설치류 동물종이다. 마우스도 상당 부분 같은 이유로 설치류 동물종으로 흔히 사용된다.

The rat is generally appropriate for DART testing and is the most often used rodent species for reasons of practicality, general knowledge of pharmacology in this species, the extensive toxicology data usually available for interpretation of nonclinical observations and the large amount of historical background data. The mouse is also often used as the rodent species for many of the same reasons.

EFD만 평가하는 경우에는 통상 두 번째 포유류 비설치류 동물종을 평가하나, 예외도 있다(예: 백신 및 생물의약품, 각각 5.1.2항 및 5.2항 참조). 토끼는 설치류에서 검출되지 않은 인체 기형유발물질을 찾아내는 데 유용한 것으로 입증되었으며, 광범위한 배경 대조 자료, 동물 수급 가능성 및 실용성에 근거하여 비설치류 동물종으로 일상적으로 사용된다.

For assessment of EFD only, a second mammalian non-rodent species is typically evaluated, although there are exceptions (e.g., vaccines and biopharmaceuticals, see Sections 5.1.2 and 5.2, respectively). The rabbit has proven to be useful in identifying human teratogens that have not been detected in rodents and is routinely used as the non-rodent species based on the extensive historical background data, availability of animals, and practicality.

백신(애주번트 포함 여부와 무관) 시험을 위해 선정한 동물종은 해당 백신에 대한 면역반응을 나타내야 한다. 수행하는 발생독성시험의 유형과 동물 모델의 선택은 관찰된 면역반응과 적절한 용량을 투여할 수 있는지에 근거하여 타당성을 입증하여야 한다. 백신의 발생독성시험에는 통상 토끼, 랫드 또는 마우스를 사용한다. 동물종 간에 반응(예: 체액성 및 세포성 평가변수)의 양적·질적 차이가 있을 수 있으나, 대개 단일 동물종에서 발생독성시험을 수행하는 것으로 충분하다. 모체 항체의 태반 통과 정도와 시간 경과는 동물종마다 다르지만, 토끼, 랫드 또는 마우스에서의 발생독성시험은 여전히 백신 성분/제제의 잠재적 배·태자 독성과 임신 중 제품의 안전성에 관한 중요한 정보를 제공할 수 있다.

The animal species selected for testing of vaccines (with or without adjuvants) should demonstrate an immune response to the vaccine. The type of developmental toxicity study conducted, and the choice of the animal model, should be justified based on the immune response observed and the ability to administer an appropriate dose. Typically, rabbits, rats, or mice are used in developmental toxicity studies for vaccines. Even though quantitative and qualitative differences can exist in the responses (e.g., in humoral and cellular endpoints) between species, it is usually sufficient to conduct developmental toxicity studies in a single species. Although the degree and time course of transfer of maternal antibodies across the placenta varies between species, a developmental toxicity study in rabbits, rats, or mice can still provide important information regarding potential embryo-fetal toxicity of the vaccine components/formulation and safety of the product during pregnancy.

NHP는 다른 관련 동물종이 면역반응을 나타내지 않는 경우에만 사용하여야 한다.

NHP should be used only if no other relevant animal species demonstrates an immune response.

적절한 동물 모델(NHP 포함)이 없는 경우에도 토끼, 랫드 또는 마우스에서의 EFD 독성시험은 백신 성분/제제의 잠재적 배·태자 독성과 임신 중 제품의 안전성에 관한 중요한 정보를 제공할 수 있다.

When there is a lack of an appropriate animal model (including NHP), an EFD toxicity study in rabbits, rats, or mice can still provide important information regarding potential embryo-fetal toxicity of the vaccine components/formulation and safety of the product during pregnancy.

랫드, 마우스 또는 토끼 이외의 동물종을 사용하여 여러 생식 단계에 대한 의약품의 영향을 평가할 수 있다. 다른 동물종의 사용을 검토할 때에는 그 장단점(부록 1의 표 1에 요약)을 시험 대상 의약품, 시험 설계와 선정된 평가변수, 그리고 결과를 사람의 상황에 외삽할 수 있는지와 관련지어 고려하여야 한다.

Species other than the rat, mouse or rabbit can be used to evaluate the effects of pharmaceuticals on various reproductive stages. When considering the use of other species, their advantages and disadvantages (summarized in Table 1 of Annex 1) should be considered in relation to the pharmaceutical being tested, the study design and selected endpoints, and the ability to extrapolate results to the human situation.

NHP는 비일상 시험 동물종으로 간주하여야 한다. NHP는 ICH S6에 기술된 바와 같이 영장류에서만 약리학적으로 활성인 생물의약품의 배·태자 발생 및 초기 출생 후 발생에 대한 영향을 평가하는 데 가장 흔히 사용된다. 그러나 DART 위해성 평가를 위한 일부 평가변수를 평가하는 데 NHP 시험의 유용성을 제한하는 추가 고려사항이 있다(부록 1 및 ICH S6 참조).

NHPs should be considered a non-routine test species. They are most typically used for evaluating effects on embryo-fetal development and early postnatal development for biopharmaceuticals that are only pharmacologically active in primates, as described in ICH S6. However, there are additional considerations that limit the utility of studies in NHPs for assessing some endpoints for DART risk assessment (see Annex 1 and ICH S6).

질환 동물 모델, 유전자변형 모델 및 대체 분자는 의도한 약리작용이 발생과 생식에 미치는 영향을 조사하는 데 유용할 수 있다. 건강한 동물에서 얻은 자료가 오해를 일으키거나 임상 환경의 질환 상태에 달리 적용되지 않을 수 있는 경우 질환 모델 시험이 가치가 있을 수 있다. 모델은 약리학적으로 관련성이 있어야 하며 평가하는 발생 및 생식 평가변수에 적절하여야 한다. 모델에서 질환 경과의 병태생리를 특성분석하여야 한다. 사람의 병태생리와 일부 차이가 있더라도 자료 해석을 교란할 가능성이 낮다면 해당 모델의 사용이 배제되지 않는다. 개체 간 변동성을 특성분석하여야 하며, 이는 해당 시험의 맥락에서 적절하여야 한다. 배경 대조 정보가 제한적인 경우 자료 해석을 돕기 위하여 시험 평가변수에 대한 참조 자료가 확보되어 있거나 시험 중에 생성되어야 한다.

Animal models of disease, genetically modified models, and surrogate molecules can be valuable for investigating the effect of the intended pharmacology on development and reproduction. Studies in disease models can be of value in cases where the data obtained from healthy animals could be misleading or otherwise not apply to the disease conditions in the clinical setting. The model should be pharmacologically relevant and appropriate for the development and reproductive endpoints being assessed. The pathophysiology of the disease course in the model should be characterized. Some differences from the human pathophysiology would not preclude its use if these are unlikely to confound data interpretation. Animal-to-animal variability should be characterized and appropriate within the context of the study. If historical control information is limited, reference data for the study endpoints should be available or should be generated during the study to aid data interpretation.

유전자변형 모델은 표적 활성의 영구적 또는 조건부 변화를 통해 의약품이 DART 변수에 미치는 표적 내(on-target) 영향에 관한 정보를 제공하는 데 사용할 수 있다. 이러한 모델은 표적의 생물학이 일상 시험 동물종에서의 생식 및 발생에 대한 유해영향과 밀접하게 연관되어 있는지에 관한 정보를 줄 수 있다.

Genetically modified models can be used to provide information about on-target effects of a pharmaceutical on DART parameters through permanent or conditional alterations in target activity. Such models can inform on whether the biology of the target is closely linked to adverse effects on reproduction and development in routine test species.

의약품이 일상 시험 동물종의 표적에 대해 적절한 활성을 갖지 않는 경우 대체 분자를 사용하여 생식 및 발생에 대한 잠재적 유해영향을 평가할 수 있다.

When the pharmaceutical does not have adequate activity against the target in the routine test species, surrogate molecules can be used to assess potential adverse effects on reproduction and development.

용량 수준, 투여 일정 및 투여 경로의 선택은 중요한 시험 설계 고려사항이며, 이용 가능한 모든 정보(예: 약리, 반복투여독성, 약동학 및 용량설정시험)에 근거하여야 한다. 저분자 의약품과 생물의약품의 용량 선정 원칙에 관한 지침은 각각 ICH M3와 ICH S6에 제시되어 있다. 시험계에서의 내약성에 관한 정보가 충분하지 않은 경우 용량설정시험을 수행하는 것이 바람직하다.

The choice of dose levels, schedule and route of administration are important study design considerations and should be based on all available information (e.g., pharmacology, repeated-dose toxicity, pharmacokinetics, and dose range finding studies). Guidance on the principles of dose selection for small molecules and biopharmaceuticals is given in ICH M3 and ICH S6, respectively. When sufficient information on tolerability in the test system is not available, dose range finding studies are advisable.

DART 시험에 사용할 수 있는 용량 선정 기준(endpoint)은 여러 가지가 있다. 이 항에서 다루는 모든 기준은 시험 설계 측면에서 동등하게 적절한 것으로 간주한다. 본시험의 고용량은 아래 6.1.1~6.1.5항에 제시된 개념 중 하나 이상에 부합할 것으로 예측되는 용량이어야 한다. 선정된 용량은 이전 시험(예: 반복투여, TK, DRF 등)에서의 관찰 결과를 고려하여야 한다. 위해성 평가에 필요한 정보를 얻는 데 세 개 미만의 용량 수준으로 충분한 경우도 있을 수 있다.

There are a number of dose selection endpoints that can be used for DART studies. All endpoints discussed in this section are considered equally appropriate in terms of study design. The high dose in the definitive studies should be one that is predicted to comply with one or more of the concepts set forth in sections 6.1.1 to 6.1.5 below. The selected doses should take into account observations made in previous studies (e.g., repeated-dose, TK, DRF, etc.). There can be instances where fewer than three dose levels are sufficient to provide the necessary information for risk assessment.

아래에서 다루는 기준 이외의 기준을 사용한 고용량 선정의 타당성은 사례별로 입증할 수 있다.

Justification for high dose selection using endpoints other than those discussed below can be made on a case-by-case basis.

이 기준은 고용량에서 부모 동물에 최소 수준의 독성을 유발하는 것에 근거한다. 이전에 수행한 시험에서 확인된, 고용량을 제한하는 요인에는 다음이 포함될 수 있으나 이에 국한되지 않는다.

This endpoint is based on inducing a minimal level of toxicity in the parental animals at the high dose. Factors limiting the high dose determined from previously conducted studies could include, but are not limited to:

의약품 관련 물질의 전신 가용성으로 측정한 전신 노출의 포화에 근거하여 고용량을 선정하는 것이 적절할 수 있다. 투여 용량을 늘려도 모화합물 또는 대사체의 혈장 농도가 증가하지 않는다면 용량을 늘리는 것은 의미가 거의 없다.

High dose selection based on saturation of systemic exposure measured by systemic availability of pharmaceutical-related substances can be appropriate. There is little value in increasing the administered dose if it does not result in increased plasma concentration of parent or metabolites.

최대 권장 인체 용량(MRHD)에서의 노출 대비 예측 노출 배수에 근거하여 용량을 선정하는 것이 적절할 수 있다. 저분자 의약품의 경우 MRHD에서의 사람 AUC 또는 Cmax의 큰 배수에 해당하는 전신 노출이 고용량 선정의 적절한 기준이 될 수 있다. 임신 동물에서 MRHD 노출의 > 25배 노출을 주는 용량은 일반적으로 DART 시험의 최대 용량으로 적절한 것으로 간주한다(주 2). 25배 노출 배수는 GLP를 준수한 용량설정/pEFD 시험 또는 본시험에서 확립하여야 한다. 통상 이 배수는 모약물 농도에 근거하여 결정하여야 하나, 사람의 주요 대사체에 대해서도 적절한 노출 배수를 확보하는 것을 고려하여야 한다(ICH M3 및 ICH M3 Q&A 참조).

It can be appropriate to select doses based on predicted exposure margins relative to the exposure at the MRHD. For small molecules, a systemic exposure representing a large multiple of the human AUC or Cmax at the MRHD can be an appropriate endpoint for high dose selection. Doses providing an exposure in pregnant animals > 25-fold the exposure at the MRHD are generally considered appropriate as the maximum dose for DART studies (Note 2). The 25-fold exposure margin should be established in a GLP-compliant dose range finding/pEFD or definitive study. Usually this multiple should be determined based on parent drug levels; however, consideration should also be given to ensuring an adequate exposure margin to major human metabolites (see ICH M3 and ICH M3 Q&A).

전구약물의 경우, 특히 시험 동물종에서 전구약물 대비 활성 대사체 비율이 사람보다 낮다면 활성 대사체를 기준으로 노출 배수를 확립하는 것이 더 적절할 수 있다. 비교에 사용하는 성분(모약물 또는 대사체)의 근거는 타당성을 입증하여야 한다.

In the case of prodrugs, it can be more appropriate to establish the exposure multiple on the basis of the active metabolite, particularly if the test species has a lower ratio of active metabolite to prodrug, compared to humans. The basis for the moiety used for comparison (parent drug or metabolite) should be justified.

MRHD에서 예상되는 노출의 > 25배 노출에서만 시험 동물종에서 약력학적 활성이 입증된 의약품의 경우, 과장된 약리작용의 유해영향을 평가하기 위하여 더 높은 용량이 필요할 수 있다. 그러나 관련성 없는 표적 외(off-target) 영향이 관찰될 가능성이 더 높다.

For pharmaceuticals that have demonstrated pharmacodynamic activity in the test species only at exposures > 25-fold that projected at the MRHD, higher doses can be warranted to assess adverse effects of exaggerated pharmacology. However, irrelevant off-target effects are more likely to be observed.

EFD 시험의 용량 수준 선정 근거로 노출 기반 기준을 사용하는 경우, GLP 준수 시험에서 얻은 임신 동물의 TK 자료가 요구된다. 총 의약품 노출과 비결합 분율 의약품 노출 중 어느 것을 사용할지에 대한 선택은 타당성을 입증하여야 하며, ICH S3A에 기술된 전체 비임상 개발 프로그램과 일관되어야 한다.

When exposure-based endpoints are used as the basis for selection of the dose levels for EFD studies, TK data from pregnant animals in a GLP-compliant study is expected. The choice for the use of total vs. fraction unbound pharmaceutical exposures should be justified and consistent with the entire nonclinical development program as outlined in ICH S3A.

ICH S6에 따라 생물의약품의 용량 선정에 노출 기반 배수를 사용하는 것이 적절할 수 있다. 일반적으로 용량은 전임상 동물종에서 의도한 최대 약리효과를 나타내거나, 임상에서 도달할 최대 노출 대비 약 10배의 노출 배수를 제공하는 것 중 더 높은 쪽이어야 한다. 표적 결합 친화도의 차이 및 기타 관련 요인에 따른 용량 조정에 관해서는 ICH S6을 참고하여야 한다.

Exposure-based margins can be appropriate to select doses for biopharmaceuticals as per ICH S6. Generally, the dose should provide the maximum intended pharmacological effect in the preclinical species or provide an approximately 10-fold exposure multiple over the maximum exposure to be achieved in the clinic, whichever is higher. ICH S6 should be consulted with regard to dose adjustment for differences in target binding affinity and other relevant factors.

투여 경로/빈도와 관련된 의약품(또는 제제)의 물리화학적 특성과 시험 동물종의 해부학적/생리학적 특성으로 인해 투여할 수 있는 의약품의 양이 제한되는 경우 MFD를 고용량 선정에 사용할 수 있다. ICH M3 Q&A(1)에 따라 MFD의 사용은 투여 용량을 최대화하기보다 시험 동물종에서의 노출을 최대화하여야 한다. 총 1일 투여 가능 노출을 늘리기 위해 투여 빈도의 변경을 고려할 수 있음에 유의한다(6.3항 참조).

The MFD can be used for high dose selection when the physico-chemical properties of the pharmaceutical (or formulation) associated with the route/frequency of administration and the anatomical/physiological attributes of the test species limit the amount of the pharmaceutical that can be administered. Use of the MFD should maximize exposure in the test species, rather than maximize the administered dose, as per ICH M3 Q&A (1). Note that changes to the frequency of dose administration can be considered to increase the total feasible daily exposure (see Section 6.3).

더 낮은 용량 수준에서 다른 용량 선정 요인에 도달하지 못한 경우 일반적으로 1 g/kg/day의 한계용량을 적용할 수 있다(기타 고려사항은 ICH M3도 참조).

A limit dose of 1 g/kg/day can generally be applied when other dose selection factors have not been attained with lower dose levels (see also ICH M3 for other considerations).

일반적으로 DART에 대한 무독성량(NOAEL)을 확립하는 것이 바람직하다. 저용량 수준의 선정에는 노출, 약리 및 독성을 고려하여, 적절한 경우 관찰 결과의 용량-반응을 확립할 수 있도록 하여야 한다. 저용량은 일반적으로 MRHD에서의 사람 노출의 낮은 배수(예: 1~5배)를 제공하여야 한다. 사람에서 치료 용량 미만의 노출을 나타내는 용량 수준은 타당성을 입증하여야 한다.

It is generally desirable to establish a no observed adverse effect level (NOAEL) for DART. The selection of lower dose levels should take into account exposure, pharmacology, and toxicity, such that the dose-response of findings can be established when appropriate. The low dose should generally provide a low multiple (e.g., 1 to 5-fold) of the human exposure at the MRHD. Dose levels that yield exposures that are sub-therapeutic in humans should be justified.

일반적으로 투여 경로는 임상 경로여야 한다. 그러나 임상 경로로 충분한 노출을 달성할 수 없거나 임상 경로가 실행 불가능한 경우에는 다른 경로를 고려하여야 한다. 사람에서 여러 투여 경로를 평가하는 경우, 모든 임상 경로 대비 충분한 전신 노출이 달성되고 대사체가 적절히 포괄된다면 시험 동물종에서는 단일 경로로 충분할 수 있다.

In general, the route of administration should be the clinical route. If, however, sufficient exposure cannot be achieved using the clinical route or the clinical route is not feasible, a different route should be considered. When multiple routes of administration are being evaluated in humans, a single route in the test species can be adequate provided that sufficient systemic exposure is achieved compared to that of all clinical routes and that there is adequate coverage for the metabolites.

독성시험에 사용하는 투여 일정은 노출 프로파일을 결정하며, 이는 위해성 평가에서 중요할 수 있다. 임상 투여 일정을 모사하는 것으로 충분한 경우가 많지만, 더 잦거나 덜 잦은 일정이 적절할 수도 있다. 예를 들어, 시험 동물종에서 빠르게 대사되는 화합물은 1일 2회 투여가 필요할 수 있으나, 더 잦은 일정을 검토할 때에는 현실적인 요인(예: 시험 운영, 동물에 대한 스트레스)을 고려하여야 한다. 해당 시험에서 평가하는 생식 및/또는 발생의 모든 중요 단계에서 적절한 노출이 얻어지도록 투여 일정을 변경하는 것도 중요할 수 있다.

Dosing schedules used in the toxicity studies determine the exposure profile, which can be important in the risk assessment. Although mimicking the clinical schedule is often sufficient, a more or a less frequent schedule can be appropriate. For example, twice daily dosing can be warranted with compounds that are quickly metabolized in the test species, although pragmatic factors (e.g., study logistics, stress on animals) should be considered when a more frequent schedule is contemplated. It can also be important to alter the dosing schedule to ensure that adequate exposure is obtained at all critical stages of reproduction and/or development being evaluated in a given study.

이 가이드라인은 감염성 질환에 대한 예방 및 치료 적응증 모두에 사용하는 백신(애주번트 포함 여부와 무관)을 다룬다. 이 가이드라인의 적용 범위에는 포함되지 않으나, 제시된 원칙은 다른 적응증(예: 암)의 백신에 대한 비임상시험에도 적용될 수 있다.

This guideline covers vaccines (adjuvanted or not) used in both preventative and therapeutic indications against infectious diseases. While not within the scope of this guideline, the principles outlined can be applicable to the nonclinical testing of vaccines for other indications as well (e.g., cancer).

예방 및 치료 백신에 사용하는 생식 및/또는 발생독성시험의 유형은 백신의 대상 집단과 관련 생식 위해에 따라 달라진다. 일반적으로 신생아, 사춘기 이전 소아 또는 고령자 집단을 대상으로 개발하는 백신에는 DART 시험이 필요하지 않다.

The types of reproductive and/or developmental toxicity studies used for preventative and therapeutic vaccines depend on the target population for the vaccine and the relevant reproductive risk. Generally, DART studies are not warranted for vaccines being developed for neonates, pre-pubertal children, or geriatric populations.

백신의 생식독성시험에서는 임상 투여 경로를 사용하여 동물 모델에서 면역반응을 유도할 수 있는 단일 용량 수준(5.1.2항)을 평가하는 것으로 통상 충분하다. 이 단일 용량 수준은 체중 보정 없이 사람 최대 용량이어야 한다(즉, 사람 1회 용량 = 동물 1회 용량). 투여할 수 있는 총 부피의 제한 또는 국소적이든 전신적이든 용량제한 독성 때문에 동물에 사람 최대 용량을 투여하는 것이 실행 불가능한 경우, mg/kg 기준으로 사람 용량을 초과하는 용량을 사용할 수 있다. 감량된 용량을 사용하려면 동물 모델에 사람 전체 용량을 사용할 수 없는 이유에 대한 타당성을 제시하여야 한다.

For reproductive toxicity studies of vaccines, it is typically sufficient to assess a single dose level capable of eliciting an immune response in the animal model (Section 5.1.2), using the clinical route of administration. This single dose level should be the maximum human dose without correcting for body weight (i.e., 1 human dose = 1 animal dose). If it is not feasible to administer the maximum human dose to the animal because of a limitation in total volume that can be administered, or because of dose-limiting toxicity, whether local or systemic, a dose that exceeds the human dose on a mg/kg basis can be used. To use a reduced dose, justification as to why a full human dose cannot be used in an animal model should be provided.

백신 투여 요법은 배아기, 태자기 및 초기 출생 후 기간 전반에 걸쳐 모체 항체가와/또는 면역반응을 최대화하여야 한다. 투여 시기와 횟수는 해당 백신의 면역반응 개시 시점과 지속 기간에 따라 달라진다. 임신 중 투여할 백신을 개발하는 경우에는 의도한 용도(예: 임신 중 모체 보호 또는 출생 초기 아이 보호)에 근거하여 특정 시험 설계의 타당성을 제시하여야 한다.

The vaccination regimen should maximize maternal antibody titers and/or immune response throughout the embryonic, fetal, and early postnatal periods. Timing and number of doses will depend on the onset and duration of the immune response of the particular vaccine. When developing vaccines to be given during pregnancy, a justification should be provided for the specific study design, based upon its intended use (e.g., protecting the mother during pregnancy or protecting the child early postnatally).

매일 투여 요법은 백신 구성성분에 대한 과다 노출을 초래할 수 있다. 임신 동물에는 매일 투여보다 간헐 투여가 권장된다. 또한 간헐 투여는 대부분의 예방 및 치료 백신에서 제안된 임상 접종 일정에 더 가깝다. 일상 동물종의 짧은 임신 기간을 고려하여, 임신의 중요한 시기(즉, 기관형성기)에 최고 면역반응을 유도하기 위해 교배 며칠 또는 몇 주 전에 동물에 기초 접종(priming dose)을 하는 것이 일반적으로 권장된다. 투여 요법은 사람에서 의도한 접종 일정에 따라 변경할 수 있다.

Daily dosing regimens can lead to overexposure to the vaccine constituents. Episodic dosing of pregnant animals rather than daily dosing is recommended. Also, episodic dosing better approximates the proposed clinical immunization schedule for most preventive and therapeutic vaccines. Considering the short gestational period of routine animal species, it is generally recommended to administer a priming dose(s) to the animals several days or weeks prior to mating in order to elicit peak immune response during the critical phases of pregnancy (i.e., the period of organogenesis). The dosing regimen can be modified according to the intended vaccination schedule in humans.

백신 제제 구성성분의 잠재적인 직접적 배아독성 영향을 평가하고 나머지 임신 기간 동안 높은 항체 반응을 유지하기 위하여 기관형성 초기에 최소 1회 투여하여야 한다. 배·태자 독성이 관찰되면 특정 시점에 투여한 동물 하위군을 사용하여 추가로 평가할 수 있다.

At least one dose should be administered during early organogenesis to evaluate potential direct embryotoxic effects of the components of the vaccine formulation and to maintain a high antibody response throughout the remainder of gestation. If embryo-fetal toxicity is observed, this can be further assessed using subgroups of animals that are dosed at certain time points.

백신에 새로운 활성 구성성분(새로운 애주번트 포함)이 들어 있는 경우 비백신 제품에 대한 것과 유사한 추가 시험 전략을 고려하는 것이 적절할 수 있다.

In cases where a vaccine includes a novel active constitutive ingredient (including novel adjuvants), consideration of additional testing strategies similar to those for non-vaccine products can be appropriate.

대부분의 의약품 개발에는 세 가지 개별 시험 설계, 즉 FEED(단계 A 및 B), EFD(단계 C~D) 및 PPND(단계 C~F)가 사용되어 왔으나, 동물 사용을 줄이기 위하여 이들 시험 설계를 다양하게 병합하여 수행할 수 있다. 병합 설계의 주된 장점은 생식 과정의 모든 관련 단계를 더 적은 동물로 평가할 수 있다는 것이다. 병합 시험은 특히 반감기가 긴 약물의 경우 임상에서의 노출 기간을 더 잘 모사할 수도 있다. 흔한 병합 시험 설계는 수태능 및 EFD 병합 시험(단계 A~D)과 별도의 PPND 시험(단계 C~F)이다.

Although three separate study designs, i.e., FEED (stages A and B), EFD (stages C through D) and PPND (stages C through F) have been employed to develop the majority of pharmaceuticals, various combinations of these study designs can be conducted to reduce animal use. The main advantage of combination designs is that all relevant stages of the reproductive process can be assessed using fewer animals. Combination studies can also better mimic the exposure duration in the clinic, especially for drugs with long half-lives. A common combination study design is a combined Fertility and EFD study (stages A through D) with a separate PPND study (stages C through F).

FEED, EFD 및 PPND 시험과 그 병합 시험의 설계 및 세부사항은 부록 1에 있다.

Designs and study details for FEED, EFD, and PPND studies, and combinations thereof, can be found in Annex 1.

수컷 또는 암컷 수태능에 대한 영향이 예상되지 않는 경우, 또는 반복투여독성시험에서 생식기관 독성이 관찰되어 투여 기간을 연장하는 것이 적절한 경우에는 반복투여시험과 수태능시험의 병합 설계를 고려할 수 있다. 반복투여독성시험 내에서 정해진 투여 기간이 지난 후, 수컷을 성적으로 성숙한 암컷(무처치이거나 교배 전 최소 2주간 투여한 암컷)과 짝지을 수 있다. 이 병합 시험은 사용 동물 수를 줄일 수 있으나, 군당 교배 쌍의 수는 16쌍 이상이어야 한다. 또한 암컷을 투여하는 경우, 기관형성기 종료 시까지 암컷 투여를 연장하여 EFD 평가변수를 평가할 수 있다(부록 1).

In cases where no effects on male or female fertility are anticipated, or where extending the dosing period is appropriate due to observation of reproductive organ toxicity in a repeated-dose toxicity study, a combination design of repeated-dose and fertility studies can be considered. After a defined dosing period within the repeated-dose toxicity study, males can be paired with sexually mature females (whether untreated, or dosed for at least two weeks prior to mating). This combination study can reduce the number of animals used, but the number of mating pairs per group should be at least 16. Further, if treated, dosing of females can be extended until the end of organogenesis, thereby allowing evaluation of EFD endpoints (Annex 1).

개체별 값은 시험의 모든 동물을 설명할 수 있도록 명확하고 간결하게 표로 정리하여야 한다. 자료 표는 시험 개시부터 종료까지 개별 동물과 그 수태산물(conceptus)을 쉽게 추적할 수 있도록 하여야 한다.

Individual values should be tabulated in a clear concise manner to account for all animals in the study. The data tables should allow ready tracking of individual animals and their conceptuses, from study initiation through study conclusion.

태자의 형태 이상은 업계에서 조화된 용어를 사용하여 기술하여야 한다. 각 한배새끼의 모든 관찰 결과는 수태산물별로 명확하게 나열하여야 한다. 요약 목록은 이상 유형별로 작성하여야 한다. 요약표에 비임신 동물의 자료를 포함했는지 제외했는지를 명확히 표시하여야 한다.

Fetal morphologic abnormalities should be described using industry-harmonized terminology. All findings for each litter should be clearly listed by conceptus. Summary listings should be prepared by type of abnormality. The inclusion or exclusion of data from non-pregnant animals in summary tables should be clearly indicated.

시험 자료의 해석은 주로 동시 대조군과의 비교에 의존한다. 배경 대조/참조 자료를 자료 해석 보조에 사용할 수 있다. 시험 수행 기관의 최근 배경 대조 자료가 바람직하다. 통상 5년 기간의 최신 자료가 바람직하며, 이를 통해 유전적 부동(genetic drift)을 확인할 수 있다.

Interpretation of study data relies primarily on comparison with the concurrent control group. Historical control/reference data can be used to assist data interpretation. Recent historical control data from the performing laboratory is preferable. Contemporary data typically from a five-year period is desirable and permits identification of genetic drift.

본시험에서는 투여군과 대조군 간 차이의 유의성을 평가하기 위한 통계적 검정이 요구된다. DART 시험의 많은 자료는 정규분포를 따르지 않으므로 비모수 통계 방법을 사용할 필요가 있다. 제왕절개, 태자 및 출생 후 자료의 요약 통계는 한배새끼를 분석 단위로 하여 산출하여야 한다. 통계적 유의성이 반드시 양성 신호를 뜻하는 것은 아니며, 통계적 유의성이 없다고 해서 영향이 없다고 볼 수도 없다. 이용 가능한 모든 약리·독성 자료에 근거하여 생물학적 개연성을 판단하는 것이 유용한 경우가 많다.

Statistical testing to assess the significance of differences between the treated and control groups is expected in definitive studies. Many of the datasets from DART studies do not follow a normal distribution, necessitating the use of non-parametric statistical methods. Cesarean, fetal and postnatal data summary statistics should be calculated using the litter as the unit of analysis. Statistical significance need not convey a positive signal, nor lack of statistical significance impute absence of effect. Determination of biological plausibility, based on all available pharmacologic and toxicologic data, is often useful.

이 가이드라인의 앞 항에서 기술한 바와 같이, 임상시험 중과 품목허가 후 모두에서 사용 조건하의 사람에 대한 잠재적 생식 위해를 다루기 위하여 해당 의약품, 관련 화합물, 인체 유전학, 그리고 사람 생식에서 표적 생물학의 역할에 관한 지식으로부터 얻은 이용 가능한 모든 자료를 사용하여야 한다. 이용 가능한 비임상 DART 자료 패키지의 모든 한계(예: 시험계 관련성, 달성된 노출), 불확실성 및 자료 공백을 다루고 그 영향을 평가하여야 한다. 일반적으로 적절한 노출을 갖는 적절한 동물종에서 수행한 생체내 본시험의 결과가 대체시험법이나 예비시험의 결과보다 더 큰 비중을 갖는다. 위해성 평가는 더 많은 정보가 확보됨에 따라 제품 개발 전반에 걸쳐 계속되는 과정이다.

As described in the preceding sections of this guideline, all available data garnered from the pharmaceutical, related compounds, human genetics, and knowledge of the role of target biology in human reproduction should be used to address potential reproductive risks in humans under the conditions of use, both during clinical trials and after marketing authorization. Any limitations (e.g., test system relevance, achieved exposure), uncertainties and data gaps in the available nonclinical DART data package should be addressed and their impact assessed. Generally, the results from definitive in vivo studies in an appropriate species with adequate exposures carry more weight than those from alternative assays or preliminary studies. Risk assessment is a continuous process through product development as more information becomes available.

DART 시험에서 보고된 모든 관찰 결과가 유해한 것은 아니다. 관찰 결과가 유해한 것으로 판단되면 위해성 평가를 위한 증거 가중(weight-of-evidence) 평가에서 여러 요인을 고려하여야 한다. 이러한 요인에는 노출 배수, 생물학적 개연성, 용량-반응 관계의 증거, 가역성 가능성, 부모 독성에 의한 교란 가능성, 그리고 동물종 간 일치의 증거가 포함될 수 있다. 드문 기형의 경우 용량에 따른 빈도 증가가 없다고 해서 항상 우려가 해소되는 것은 아니다.

Not all findings reported in DART studies are adverse. When a finding is deemed adverse, several factors should be considered in a weight-of-evidence evaluation for risk assessment. These can include exposure margins, biological plausibility, evidence of a dose-response relationship, potential for reversibility, the potential for confounding parental toxicity, and evidence for cross-species concordance. For rare malformations, the absence of increased frequency with dose does not always alleviate concern.

시험 동물종의 NOAEL에서의 의약품 노출을 MRHD에서의 노출과 비교하는 것은 위해성 평가의 중요한 구성요소이다. 이 비교는 가장 관련성 있는 지표(예: AUC, Cmax, Cmin, 체표면적 보정 용량)에 근거하여야 한다. 일반적으로 NOAEL이 MRHD에서의 사람 노출의 10배 미만 노출에서 나타나면 우려가 커지고, 이 역치를 넘으면 우려가 줄어든다. MRHD에서의 사람 노출의 25배를 초과하는 경우에만 나타나는 영향은 대개 해당 의약품의 임상 사용에 있어 우려가 적다. 달리 적절히 타당성이 입증되지 않는 한, 가장 관련성 있는 배수는 일반적으로 가장 민감한 동물종에서의 노출 지표이다. 생물학적 개연성은 약리학적 작용기전을 생식 또는 발생에서 알려진 표적의 역할과 비교하여 평가한다.

Comparison of pharmaceutical exposure at the NOAEL in the test species to the exposure at the MRHD is an important component of the risk assessment. This comparison should be based on the most relevant metric (e.g., AUC, Cmax, Cmin, body surface area-adjusted dose). In general, there is increased concern when the NOAEL occurs at exposures less than 10-fold the human exposure at the MRHD; above this threshold, concern is reduced. Effects that are limited to occurrence at more than 25-fold the human exposure at the MRHD are usually of minor concern for the clinical use of the pharmaceutical. The most relevant margin is generally the exposure metric in the most sensitive species, unless appropriately justified otherwise. Biological plausibility is assessed by comparison of pharmacologic mechanism of action with the known role of the target in reproduction or development.

약리작용의 결과로 해석될 수 있는 관찰 결과는 사람에게 우려가 될 것임을 시사한다. 이 관계는 해당 관찰 결과가 발생률 증가로 특성화되든 중증도 증가로 특성화되든 용량 관련성이 있다는 증거에 의해 더욱 강화된다. 생물학적 개연성이 없다고 해서 표적 외 독성이 배제되는 것은 아니며, 특히 그 독성이 용량-반응 관계로 특성화되는 경우 그러하다.

A finding that can be interpreted as a consequence of pharmacology suggests that it will be of concern for humans. This relationship is further strengthened by evidence that the finding is dose-related, whether characterized as increasing incidence or severity. Absence of biological plausibility does not preclude off-target toxicity, particularly if this is characterized by a dose-response relationship.

가역성 가능성에 대한 이해는 위해성 평가를 달라지게 한다. 투여 중단 후 가역적인 수컷 및 암컷 수태능에 대한 영향은 우려가 덜하다. 반대로, 사망이나 기형과 같은 중대한 비가역적 발생 평가변수는 우려가 크다. 다른 형태의 발생독성(예: 성장 지연, 기능 결손)은 가역적일 수도 있고 아닐 수도 있다. 일반적으로 일시적인 관찰 결과(예: 설치류의 파상 늑골과 같은 골격 변이)는 단독으로 나타날 때 우려가 덜하다. 마찬가지로, 태자 체중 감소가 있을 때 성장 지연을 나타내는 변이는 우려가 덜하다. 그러나 기형의 증가가 불확실한 상황에서 변이(질적으로 유사하든 아니든)의 전반적인 발생률 증가는 형태형성 이상(dysmorphogenesis)에 대한 우려 증가를 시사할 수 있다.

Understanding the potential for reversibility will alter the risk assessment. Effects on male and female fertility that are reversible after cessation of treatment are of less concern. Conversely, critical irreversible developmental endpoints, such as death or malformation, are of increased concern. Other forms of developmental toxicity (e.g., growth retardation, functional deficits), may or may not be reversible. Generally, transient findings (e.g., skeletal variations, such as wavy ribs in rodents) are of less concern when they occur in isolation. Similarly, variations that are indicative of growth retardation in the presence of reduced fetal weight are of less concern. However, an overall increase in the incidence of variations (qualitatively similar or not) can suggest increased concern for dysmorphogenesis in the presence of an equivocal increase in malformations.

관찰 결과의 관련성을 판단할 때에는 부모 독성의 역할을 고려하여야 한다. 모체 독성이 있는 상태에서 관찰된 배·태자 독성은 그 관찰 결과가 사람과 관련될 가능성을 판단하기 위하여 신중히 검토하여야 한다. 구체적으로, 개별 한배새끼의 관찰 결과와 해당 어미의 모체 독성 중증도 간의 일치를 평가하는 것이 이 평가에 도움이 될 수 있다. 그러한 관계가 새로이 입증되거나 관련 문헌을 인용할 수 있는 경우가 아니라면 발생독성이 모체 독성에 따른 이차적 결과라고 가정해서는 안 된다.

The role of parental toxicity should be considered in determination of the relevance of findings. Embryo-fetal toxicity observed in the presence of maternal toxicity should be considered carefully to determine the likelihood that the finding is relevant for humans. Specifically, evaluation of the concordance between individual litter findings and the severity of maternal toxicity in the dam could be helpful in this assessment. It should not be assumed that developmental toxicity is secondary to maternal toxicity, unless such a relationship is demonstrated de novo, or relevant published literature can be cited.

또한 시험 간 또는 동물종 간에 보고된 관찰 결과의 일관성은 유해영향에 대한 우려를 강화할 수 있다. 설치류 EFD 시험에서 나타난 태자 치사 증가가 PPND 시험에서의 생존 한배새끼 수 감소와 일치하는 것은 시험 간 일치의 예이다. 랫드와 토끼에서 착상 후 손실 증가가 관찰되는 것은 동물종 간 일치의 예이다. 나아가 동물시험에서 확인된 생식 또는 발생 영향의 기전에 대한 지식은 동물종 간 반응 차이를 설명하고 그 영향의 사람 관련성에 관한 정보를 제공하는 데 도움이 될 수 있다(예: 마우스에서 코르티코스테로이드로 유발된 구개열).

Also, consistency of findings reported among studies, or between species can strengthen the concern for an adverse effect. Increased fetal lethality seen in a rodent EFD study that is consistent with decreased live litter sizes in the PPND study is an example of cross-study concordance. Observations of increased post implantation loss in rats and rabbits is an example of cross-species concordance. Further knowledge of the mechanism of reproductive or developmental effects identified in animal studies can help to explain differences in responses between species and provide information on the human relevance of the effect (e.g., corticosteroid-induced cleft palate in mice).

수유에 대해 수행하는 특정 위해성 평가는 생체내 분만 시험(PPND 또는 ePPND)에서 확인된 위험요소에 근거한다. 이러한 위험요소에는 의약품의 유즙 배설에 기인한 새끼의 성장 및 발생에 대한 유해영향이 포함될 수 있다. 분만 시험에서 얻은 새끼의 전신 노출 자료가 있으면 사람 영아에서 예상되는 수유 노출과 비교할 수도 있다. 종간 유즙 조성의 차이로 인해 동물 유즙 중 의약품 농도를 사람 모유 중 농도와 직접 정량적으로 연관 지을 수는 없으나, 동물 유즙에 의약품이 존재하면 일반적으로 사람 모유에도 의약품이 존재함을 나타낸다.

A specific risk assessment conducted for breastfeeding would be predicated on hazards identified by the in vivo littering study (PPND or ePPND). These hazards can include adverse effects on offspring growth and development that are attributed to excretion of the pharmaceutical in the milk. Systemic exposure data in the pups from the littering study, if available, can also be compared with projected lactational exposures in the human infant. While interspecies differences in milk composition preclude a direct quantitative correlation of animal milk levels to human milk levels of a pharmaceutical, the presence of pharmaceutical in animal milk generally indicates the presence of pharmaceutical in human milk.

마지막으로, 이용 가능한 사람 자료는 사람 생식 위해의 전반적 평가에 영향을 줄 수 있다.

Lastly, available human data can influence the overall assessment of human reproductive risk.

주 1: 특히 정소와 부정소는 세정관 상피의 조직 구조를 보존하는 방법으로 채취하고 처리하여야 한다. 정자형성 주기를 염두에 둔 상세한 정성적 현미경 평가는 정자형성에 대한 영향을 검출하는 민감한 수단이다. 일반적으로 필요하지는 않으나, 확인된 영향을 추가로 특성분석하기 위해 추가 실험 평가변수(예: 면역조직화학, 균질화 저항성 정자세포 수, 유세포분석, 단계의 정량 분석)를 시험 설계에 포함할 수 있다. 암컷에서는 생식 주기와 원시난포 및 일차난포의 존재를 염두에 두고 난소(난포, 황체, 기질, 간질 및 혈관 포함), 자궁 및 질에 대한 상세한 정성적 현미경 검사를 수행하여야 한다.

Note 1: In particular, the testes and epididymides should be sampled and processed using methods which preserve the tissue architecture of the seminiferous epithelium. A detailed qualitative microscopic evaluation with awareness of the spermatogenic cycle is a sensitive means to detect effects on spermatogenesis. While generally not warranted, additional experimental endpoints (e.g., immunohistochemistry, homogenization resistant spermatid counts, flow cytometry, quantitative analysis of staging) can be incorporated into the study design to further characterize any identified effects. In females, a detailed qualitative microscopic examination of the ovary (including follicles, corpora lutea, stroma, interstitium, and vasculature), uterus and vagina should be conducted with awareness of the reproductive cycle and the presence of primordial and primary follicles.

주 2: 알려진 인체 기형유발물질 또는 인체 기형유발 추정 물질 22종을 분석한 결과, 기형 또는 배·태자 치사(MEFL)가 관찰된 경우 최소 한 동물종에서 최소독성량(LOAEL)에서의 노출은 MRHD 노출의 < 6배였다(Andrews et al. (6)). 이는 EFD 독성시험에서 고용량 선정에 > 25배 노출 비율을 사용했다면 이들 의약품 모두의 기형유발 위험요소를 검출하는 데 충분했을 것임을 나타낸다. 이 분석은 또한 동물종에서 검출된 인체 기형유발물질의 경우 최소 한 동물종에서 NOAEL에서의 노출이 MRHD 노출의 < 4배였음을 보여주었다.

Note 2: An analysis of 22 known human or presumed human teratogens showed that if MEFL was observed, exposure at the lowest observed adverse effect level (LOAEL) in at least one species was < 6-fold the exposure at the MRHD (Andrews et al. (6)). This indicates that using a > 25-fold exposure ratio for high-dose selection in the EFD toxicity studies would have been sufficient to detect the teratogenic hazard for all these pharmaceuticals. The analysis also showed that for human teratogens that were detected in animal species, the exposure at the NOAEL in at least one species was < 4-fold the exposure at the MRHD.

아울러 IQ DruSafe Leadership Group이 EFD 독성시험에 대한 조사를 수행하였다(Andrews et al. (7)). 이 조사에서는 교란(즉, 용량제한) 모체 독성 없이 동물 대 사람 모약물 노출 비율 ≥ 15배(의도한 치료 용량에서의 사람 노출 사용)를 달성한 랫드 및 토끼 EFD 본시험을 각각 153건과 128건 확인하였다. 이 자료는 (달리 고용량을 제한할) 모체 독성이 없을 때 사람 노출의 ≥ 25배 노출을 달성하도록 동물에 투여하는 경우 MEFL이 검출되는 일은 드물다는 것을 보여준다. 이 모든 사례에서 MEFL 소견은 노출이 50배를 초과할 때까지 관찰되지 않았으며, 그처럼 높은 노출에서의 소견은 사람 위해성 평가와 관련이 없는 것으로 판단된다.

In addition, a survey was conducted on EFD toxicity studies by the IQ DruSafe Leadership Group (Andrews et al. (7)). This survey identified 153 and 128 definitive rat and rabbit EFD studies, respectively, that achieved ≥ 15-fold animal to human parent drug exposure ratios (using human exposure at the intended therapeutic dose) in the absence of confounding (i.e., dose-limiting) maternal toxicity. These data show that dosing animals to achieve exposures ≥ 25-fold human exposures when there is no maternal toxicity (that would otherwise limit the high dose), only infrequently detects MEFL. In all these cases, MEFL findings were not observed until exposures exceeded 50-fold and findings at such high exposures are not believed to be relevant to human risk assessment.

따라서 교란 모체 독성이 없는 경우, 의도한 최대 치료 용량에서 총 모화합물의 사람 혈장 노출 대비 > 25배 노출 비율에 해당하는 고용량을 EFD 및 PPND 시험에 선정하는 것은 실용적이며 사람 위해성 평가와 관련된 결과를 검출하기에 합리적으로 충분한 것으로 간주한다.

In the absence of confounding maternal toxicity, the selection of a high dose for EFD and PPND studies that represents a > 25-fold exposure ratio to human plasma exposure of total parent compound at the intended maximal therapeutic dose is therefore considered pragmatic and reasonably sufficient for detecting outcomes relevant for human risk assessment.

면책: 이 용어집의 정의는 이 가이드라인 안에서의 사용에 한정된다.

Disclaimer: The definitions in this glossary are specific for their use within this guideline.

아래에 발생 및 생식독성(DART) 시험에 사용되는 여러 동물종을 사용할 때의 장점과 단점을 정리하였다.

Outlined below are advantages and disadvantages to the use of various species utilized in DART studies.

여기에 열거하지 않은 다른 포유류 동물종도 DART 평가변수에 대한 의약품의 영향을 평가하는 데 사용할 수 있다.

Other mammalian species not listed here can also be used to evaluate the effects of pharmaceuticals on DART endpoints.

일반적으로 생식독성시험 내에서 그리고 시험 간에 동물은 시험 개시 시점의 연령, 체중 및 출산 경력이 비슷하여야 한다. 이러한 요소를 충족하는 가장 쉬운 방법은 투여 개시 시점에 성적으로 성숙한 어린 성체 동물을 사용하는 것이다. 개별 시험에 규정된 군당 동물 수는 이러한 시험 설계에 대한 오랜 경험에서 비롯된 과학적 판단과 동물의 적절한 사용에 관한 윤리적 고려 사이의 균형에 따른 것이다. 의약품의 임상적으로 관련된 노출에서 예상되는 생식 또는 발생에 대한 유해 영향을 입증하는 데에는 더 작은 군 크기로도 충분할 수 있다.

Generally, within and between reproductive studies animals should be of comparable age, weight and parity at the start. The easiest way to fulfil these factors is to use animals that are young, sexually mature adults at the time of the start of dosing. The number of animals per group specified in individual studies is a balance based on scientific judgment from many years of experience with these study designs, and ethical considerations on the appropriate use of animals. Smaller group sizes can be sufficient to demonstrate anticipated adverse effects on reproduction or development at clinically relevant exposures of the pharmaceutical.

설치류와 토끼에서 16~20 한배새끼를 평가하면 시험 간에 어느 정도 일관성이 확보된다. 16 한배새끼 미만에서는 시험 간 결과가 일관되지 않게 되며, 군당 20~24 한배새끼를 넘으면 일관성과 정밀성이 크게 향상되지 않는다. 이 숫자는 평가에 쓸 수 있는 한배새끼 수를 말한다. 서로 다른 평가를 위해 군을 세분하는 경우에는 시험 개시 동물 수를 그에 맞게 조정하여야 한다.

Evaluation of 16 to 20 litters for rodents and rabbits provides a degree of consistency among studies. Below 16 litters inter-study results become inconsistent, and above 20 to 24 litters per group, consistency and precision is not greatly enhanced. These numbers refer to litters available for evaluation. If groups are subdivided for different evaluations the number of animals starting the study should be adjusted accordingly.

아래에 제시한 시험 설계는 특히 변수, 시기 및 평가 항목과 관련하여 수정하더라도 시험 목적을 충족할 수 있다. 이러한 기본 설계를 개별 시험기관과 목적에 맞게 조정할 때에는 전문가 판단을 활용하여야 한다.

The suggested study designs below can be modified, particularly with respect to parameters, timings, and assessments and still meet the study objectives. Expert judgment should be used for adapting these framework designs for individual laboratories and purposes.

FEED 시험은 생식세포의 성숙, 교미 행동, 수태능, 배의 착상 전 발생 및 착상을 평가하도록 설계된다. 암컷의 경우 발정주기와 난관 수송에 대한 영향이 포함된다. 수컷의 경우 수컷 생식기관의 조직학적 검사로는 검출할 수 없는 기능적 영향(예: 부고환 정자 성숙)의 검출이 포함된다.

The FEED study is designed to assess the maturation of gametes, mating behavior, fertility, preimplantation development of the embryo, and implantation. For females, this includes effects on the estrous cycle and tubal transport. For males, it includes detection of functional effects (e.g., epididymal sperm maturation) that cannot be detected by histological examinations of the male reproductive organs.

암수 모두에 시험물질을 투여하는 암수 병합 FEED 시험이 흔히 사용된다(표 2 참조). 그러나 시험 설계에서 적절한 수의 비투여 암컷 또는 수컷으로 대체하여 수컷 단독 또는 암컷 단독 시험을 별도로 수행할 수도 있다.

A combined male/female FEED study, in which both sexes are administered test article, is commonly used (See Table 2). However separate male only or female only studies can be conducted by substituting the appropriate number of untreated females or males in the study designs.

EFD 독성시험은 비임신 암컷과 비교한 모체 독성을 평가하고, 배·태자 생존, 자궁내 성장 및 형태 발생에 대한 잠재적 영향을 평가하도록 설계된다.

The EFD toxicity study is designed to assess maternal toxicity relative to that in non-pregnant females, and to evaluate potential effects on embryo-fetal survival, intrauterine growth, and morphological development.

설치류, 토끼 및 게잡이원숭이에 대해 제시하는 시험 설계는 아래와 같다.

Suggested study designs for rodents, rabbits and cynomolgus monkeys are described below.

교미한 암컷을 사용하는 용량범위 설정시험은 설치류와 토끼의 본 EFD 시험에 적절한 용량 단계 또는 투여 일정을 선정하는 데 가장 흔히 사용된다. 그러나 기존 반복투여독성시험의 내약성 및 TK 데이터로도 이 목적에 충분할 수 있다.

Dose range finding studies in mated females are most often used to select appropriate dose levels, or dose schedules, for the definitive rodent and rabbit EFD studies. Tolerability and TK data from existing repeated-dose toxicity studies can, however, be sufficient for this purpose.

pEFD 독성시험(표 3)은 설계가 본 EFD 독성시험과 유사하다. 일반적인 pEFD 독성시험 설계는 기관형성기 동안의 투여를 포함하고, 적절한 용량 단계를 갖추며, 군당 최소 6마리의 임신 암컷을 평가하고, 태자 생존, 태자 체중, 태자 외형 이상 및 연조직 이상에 대한 평가를 포함한다(ICH M3 참조).

The pEFD toxicity study (Table 3) is similar in design to the definitive EFD toxicity study. A typical pEFD toxicity study design includes dosing over the period of organogenesis, has adequate dose levels, evaluates a minimum of 6 pregnant females per group, and includes assessments of fetal survival, fetal weight, external fetal abnormalities and soft tissue abnormalities (see ICH M3).

암컷은 분만 예정일 무렵 제왕절개한다. 태자 생존, 태자 체중, 태자 외형 이상, 연조직 이상 평가 및 골격 검사를 실시한다(표 3). 표 3의 시기는 설치류, 토끼 및 게잡이원숭이에 대한 것이며, 다른 동물종에는 적절한 시기를 적용하여야 한다.

The females are submitted to cesarean section near term. Assessments of fetal survival, fetal weight, external fetal abnormalities, soft tissue abnormalities and skeletal examinations are performed (Table 3). The timing given in Table 3 is for rodent, rabbit and cynomolgus monkeys; for other species appropriate timing should be used.

PPND 독성시험은 비임신 암컷과 비교한 독성 증강, 출생 전후 자손의 생존능력, 성장 및 발달의 변화, 그리고 성성숙, 성숙 후 생식능력, 감각기능, 운동활성, 학습 및 기억을 포함한 자손의 기능 결손을 평가하도록 설계된다.

The PPND toxicity study is designed to assess enhanced toxicity relative to that in non-pregnant females, pre- and postnatal viability of offspring, altered growth and development, and functional deficits in offspring, including sexual maturation, reproductive capacity at maturity, sensory functions, motor activity, and learning and memory.

암컷이 분만하여 이유 시까지 새끼를 양육하게 하고, 이유 시점에 한배새끼당 최소 수컷 1마리와 암컷 1마리를 선발하여 성체까지 사육한 뒤 교배하여 생식능력을 평가한다(표 4 참조).

The females are permitted to deliver and rear their offspring to weaning at which time at least one male and one female offspring per litter are selected for rearing to adulthood and mating to assess reproductive competence (see Table 4).

ePPND 독성시험(표 5)은 EFD 시험과 PPND 시험의 평가변수를 결합한 NHP 시험이다. 이 시험에서는 투여를 임신기간 전체에 걸쳐 분만 시까지(예: GD20부터 분만까지) 연장한다. 시기 및 추가 평가 변수에 관한 정보는 ICH S6을 참조한다.

The ePPND toxicity study (Table 5) is a study in NHP that combines the endpoints from both the EFD and PPND studies. In this study dosing is extended throughout the gestation period to parturition (e.g., GD20 to parturition). See ICH S6 for information on timing and additional parameters to be evaluated.

개발 프로그램의 목표를 충족하기 위해 시험 유형을 병합할 수도 있다. 이는 위에 요약한 개별 시험에서 측정하는 적절한 평가변수를 하나의 시험에 통합하여 이루어진다. 여러 병합 시험의 개념은 아래와 같다.

The possibility also exists to combine study types to meet the goals of the development program. This is accomplished by incorporating appropriate endpoints measured in the separate studies summarized above into a single study. Concepts for various combination studies are provided below.

FEED/EFD 병합 시험의 목적은 교배 전(수컷/암컷)부터 교배, 착상을 거쳐 기관형성기 종료 시까지의 투여로 인한 독성 영향을 시험하는 것이다. 이는 생식 과정의 A단계부터 D단계까지에 대한 평가로 구성된다(1.1항 참조). 이 시험 설계는 비설치류에도 사용할 수 있으나 설치류에 가장 흔히 사용된다.

The aim of the combined FEED/EFD study is to test for toxic effects resulting from treatment from before mating (males/females) through mating, implantation and until the end of organogenesis. This comprises evaluation of stages A through D of the reproductive process (see Section 1.1). This study design is most often used with rodents, although it could be used with non-rodents.

암수 병합 FEED/EFD 시험을 사용할 수 있으나, 수컷 수태능을 적절한 기간의 반복투여시험 같은 별도 시험에서 평가하는 경우에는 암컷 단독으로 별도 수행하는 방안도 가능하다. 이 경우 시험에서는 비투여 수컷을 교배 목적으로만 사용한다. 구체적인 시험 설계와 관찰 변수는 이 부록의 1.1.1항 및 1.1.2항을 참조한다.

A combined male/female FEED/EFD can be used, but a separate female only option is possible where male fertility is assessed in a separate study such as a repeated dose study of suitable duration. The study would then use untreated males for mating purposes only. For specific study design and observational parameters see Sections 1.1.1. and 1.1.2 of this Annex.

설치류 반복투여독성시험 중에 수컷 수태능을 평가하는 것도 가능하다. 이 병합 시험에서는 정해진 주 수 동안 투여한 수컷을 비투여 암컷과 짝짓는다. 동거 후 수컷은 반복투여독성시험의 예정 종료 시까지 계속 투여한다. 비투여 암컷은 교미 증거 확인 후 약 2주에 제왕절개한다. 수집하는 시험 평가변수는 이 부록의 1.1.1항에 기술한 것과 같다. 영향을 적절히 평가하기 위해 군당 최소 16마리의 수컷을 시험에 포함하여야 한다. 암컷 수태능과 기타 FEED 평가변수는 별도 시험에서 평가하여야 할 것이다.

It is also possible to evaluate male fertility during a rodent repeated-dose toxicity study. In this combination study, males that have been dosed for a defined number of weeks are paired with untreated females. Following cohabitation, the males continue to be dosed until the scheduled termination of the repeated-dose toxicity study. The untreated females are subjected to cesarean section approximately two weeks after evidence of mating. The study endpoints collected are identical to those outlined in Section 1.1.1 of this Annex. To adequately assess effects, at least 16 males per group should be included in the study. Female fertility and other FEED endpoints will need to be evaluated in a separate study.

적격성 평가를 거친 대체시험법(용어 정의 참조)을 단독으로 또는 하나 이상의 생체내 시험과 함께 수행하여 얻은 데이터는 제한된 상황에서 위해성 확인과 위해성 평가를 뒷받침하는 데 활용할 수 있다.

Data generated from qualified alternative assays (see glossary) conducted alone or in conjunction with one or more in vivo studies can be utilized to support hazard identification and risk assessment under limited circumstances.

활용 가능한 경우는 다음과 같다.

Potential uses can include:

• EFD에 대한 유해 영향을 시사하는 증거가 있는 상황(예: 발생생물학의 기본 경로에 영향을 미치는 작용기전, 유전자변형 동물의 표현형 데이터, 계열 효과)(이 부록의 1.2.2항 및 그림 1 참조)
• 동물종에서의 독성 때문에 사용 조건에서의 사람 노출과 관련된 전신 노출에 도달할 수 없는 경우
• 동물시험에서 결과가 모호한 경우 증거 가중(weight of evidence) 평가를 뒷받침하는 자료로서
• 최대 150명의 가임 여성(WOCBP)을 최대 3개월 동안 포함하는 임상시험에 대한 부분적 뒷받침 자료로서(가이드라인 4.2.3항 참조)
• 특정 중증 쇠약성 질환이나 생명을 위협하는 질환 또는 노년기 발병 질환을 대상으로 개발 중인 의약품(이 부록의 1.2.3항, 1.2.4항 및 그림 2 참조)

• circumstances where there is evidence suggesting an adverse effect on EFD (e.g., a mechanism of action affecting fundamental pathways in developmental biology, phenotypic data from genetically modified animals, class effects) (see Section 1.2.2 and Figure 1 of this Annex)
• toxicity in animal species precludes attaining systemic exposures relevant to the human exposures under conditions of use
• as support for a weight of evidence assessment when there are equivocal findings in animal studies
• as partial support for clinical trials including up to 150 WOCBP for up to 3 months duration (see Section 4.2.3 of Guidance)
• pharmaceuticals being developed for certain severely debilitating or life-threatening diseases or late-life onset diseases (see Sections 1.2.3, 1.2.4 and Figure 2 of this Annex).

위해성 평가를 뒷받침하기 위해 대체시험법을 사용하는 경우에는 이러한 시험법을 통합 시험 전략에 포함하는 것의 타당성을 입증하여야 한다. 위해성 평가에 사용하는 시험법은 GLP에 따라 수행하고 사용 맥락(즉, 적용 영역 및 시험 결과를 신뢰할 수 있는 규제상 조건)에 대해 적격성 평가를 거쳐야 한다. 대체시험법을 포함하는 전략에서는 필요한 경우 약물 대사체의 영향도 평가하여야 한다(ICH M3). 이 부록은 특정 시험법을 권고하지 않으며, 대신 규제 목적용 시험법의 적격성 평가를 돕기 위한 기본적인 과학적 원칙을 제시한다. 작용기전을 탐색하는 데 사용하거나, 그 밖에 생체내에서 얻는 EFD 평가변수를 대체할 의도가 없는 대체시험법은 이처럼 엄격한 방식으로 적격성 평가를 거칠 필요가 없다.

When alternative assays are used to support risk assessment, incorporation of these assays into an integrated testing strategy should be justified. Assay(s) used for risk assessment should be conducted in accordance with GLP and qualified for context of use (i.e. applicability domain and regulatory conditions under which assay results are reliable). Strategies incorporating alternative assays should also assess the effects of drug metabolites when warranted (ICH M3). This annex does not recommend specific assays; instead, basic scientific principles are included to assist in assay qualification for regulatory use. Alternative assays used to explore mechanism of action, or otherwise not intended to substitute for in vivo-derived EFD endpoints, are not expected to be qualified in this rigorous manner.

시험 결과가 가치를 가지려면 시험방법이 적절하여야 한다. 따라서 측정하는 평가변수는 시험법의 목적 및 예측과 관련하여 과학적으로 타당성이 입증되어야 한다. 시험법의 예측, 평가하는 평가변수 및 적용 영역 사이의 관계는 경험적으로 뒷받침되어야 한다. 규제 목적의 위해성 평가에 사용하기 위해 대체시험법 또는 시험법 조합의 적격성을 평가¹하려면, 다음을 포함하여 방법론과 결과를 종합적으로 기술하여 제출하여야 한다.

Test methods must be appropriate in order for test results to be of value. Accordingly, the endpoints measured should be scientifically justified with respect to assay objectives and predictions. The relationships among the assay’s predictions, endpoint(s) assessed, and the applicability domain, should be supported empirically. To qualify¹ an alternative assay or a combination of assays for use in risk assessment for regulatory purposes, a comprehensive description of the methodology and findings should be provided, including the following:

의뢰자는 시험법 적격성 평가 자료를 이전에 제출한 보건당국이 있다면 어느 보건당국인지 밝혀야 한다. 한 규제당국이 시험법을 수용하였다고 해서 다른 보건당국이 그 시험법을 수용하도록 구속되는 것은 아님에 유의한다. 끝으로, 일부 대체시험법은 생체내 시험으로 검출할 수 없는 MEFL을 예측할 수 있으므로, 랫드 및/또는 토끼 생체내 시험에서 검출되지 않은 사람 최기형성 물질을 평가하는 것이 권장된다.

The sponsor should state to which health authorities (if any) the assay qualification has been previously been submitted. Note that acceptance of an assay by one regulatory authority does not bind other health authorities to accept the assay. Last, evaluation of human teratogens not detected in vivo by rat and/or rabbit is encouraged since some alternative assay(s) might predict MEFL that are not detectable by in vivo studies.

이 항은 EFD에 대한 이상영향을 시험하기 위하여 대체시험법을 포함시킨 통합 시험 전략의 예시를 제시한다.

This section provides illustrative examples of integrated testing strategies into which alternative assays are incorporated to test for adverse effects on EFD.

본 가이드라인 4.2.3항을 참조한다.

See Section 4.2.3 of the Guidance.

작용기전, 약리학적 계열 또는 표적 생물학에 근거하여 배·태자 발생에 이상영향을 미칠 것으로 예상되는 의약품은 적격성이 평가된 대체시험법에서 이 작용을 확인하는 것이 적절할 수 있다(이 부록의 그림 1 참조).

For pharmaceuticals that are expected to adversely affect embryo-fetal development based on mechanism of action, pharmacologic class or target biology, it can be appropriate to confirm this activity in a qualified alternative assay(s) (see Figure 1 of this Annex).

적격성이 평가된 대체시험법이 임상적으로 관련 있는 외삽 노출에서 MEFL을 명확히 예측하면, 이것으로 해당 화합물을 EFD 위험이 있는 것으로 판정하기에 충분할 수 있으며, 일반적으로 추가 시험은 필요하지 않다. 대체시험법이 MEFL을 예측하지 않으면, 이를 2종에서 수행하는 확정적 생체내 EFD 시험으로 확인하여야 한다. 부록 2 그림 1에 제시한 바와 같이 시험을 순차적으로 수행하면, 첫 번째 생체내 시험이 양성일 경우 두 번째 시험은 필요하지 않으므로 동물 사용을 줄일 수 있다. 이 시나리오에서는 해당 의약품이 배·태자 발생에 이상영향을 미칠 것으로 예상되므로, 대체시험법의 양성 반응을 부정하려는 목적으로 생체내 EFD 시험을 수행하는 것은 의미가 없다.

When a qualified alternative assay clearly predicts MEFL at clinically relevant extrapolated exposures, this can be sufficient to identify the compound as an EFD risk, and further testing would generally not be warranted. If the alternative assay does not predict MEFL, this should be confirmed in definitive in vivo EFD studies in two species. Conducting the studies in series, as shown in Annex 2 Figure 1, can allow for reduction in animal use, as the second in vivo assay would not be warranted if the first one is positive. Under this scenario, since the pharmaceutical is expected to adversely affect embryo-fetal development, there is no merit in using in vivo EFD studies to attempt to negate a positive alternative assay response.

임신 가능성이 낮은 중증 쇠약성 또는 생명을 위협하는 상태(덜 중증인 만성 질환과 비교하여)의 치료용 의약품에 대한 위험/유익성을 고려할 때, 적격성이 평가된 대체시험법의 사용은 EFD 위해성 평가의 적절한 구성요소로 간주될 수 있다(부록 2 그림 2 참조).

Considering the risk/benefit for pharmaceuticals intended to treat severely debilitating or life-threatening conditions (compared to less severe chronic diseases) where the likelihood of pregnancy is low, the use of qualified alternative assay(s) can be considered an appropriate component of the EFD risk assessment (see Annex 2 Figure 2).

적격성이 평가된 대체시험법이 임상적으로 관련 있는 외삽 노출에서 첫 번째 종(예: 랫드)의 MEFL을 명확히 예측하면, 사례별로 이것으로 EFD 위험을 충분히 특성분석한 것으로 간주할 수 있다. 그러나 결과가 모호하거나 위양성으로 판단되면, 사람 위해성 평가에 도움이 되도록 1종 또는 2종에서 확정적 생체내 시험을 수행하여야 한다. 적절한 노출 배수에서 수행한 2건의 확정적 생체내 시험에서 EFD 신호가 관찰되지 않으면, 대체시험법 결과는 사람 위험 측면에서 우려가 최소한인 것으로 간주할 수 있다. 그러나 사람 MEFL을 예측하도록 적격성이 평가된 대체시험법(즉, 동물 MEFL만 예측하는 것이 아닌 시험법)의 경우, 대체시험법 결과가 위양성 소견이라는 결론을 뒷받침하는 추가 데이터(예: 기전 또는 유전 데이터)를 제공하여야 한다.

When a qualified alternative assay clearly predicts MEFL in the first species (e.g., rat) at clinically relevant extrapolated exposures, this can be considered, on a case-by-case basis, to sufficiently characterize the EFD risk. However, if the results are equivocal or thought to represent a false positive, definitive in vivo studies in one or two species should be conducted to assist human risk assessment. If no EFD signal is observed in the two definitive in vivo studies at appropriate exposure margins the results of the alternative assay could be considered of minimal concern for human risk. However, for alternative assays that have been qualified to predict human MEFL (i.e., not predicting only animal MEFL), additional data (e.g., mechanistic or genetic) should be provided to support a conclusion that the alternative assay results represent a false positive finding.

생체내 시험 중 하나 또는 둘 다 EFD 독성 양성이면, 해당 화합물은 EFD 위험 양성으로 간주한다. 부록 2 그림 2에 제시한 바와 같이 시험을 순차적으로 수행하면, 첫 번째 생체내 시험이 양성일 경우 두 번째 시험은 필요하지 않으므로 동물 사용을 줄일 수 있다.

If one or both of the in vivo studies are positive for EFD toxicity, the compound is considered to be positive for EFD risk. Conducting the studies in series, as shown in Annex 2 Figure 2, can allow for reduction in animal use, as the second in vivo assay would not be warranted if the first one is positive.

첫 번째 종에 대한 대체시험법이 음성 결과(즉, MEFL 없음)를 예측하면, 평가를 확인하기 위하여 두 번째 종에서 확정적 생체내 EFD 시험을 수행하여야 한다. 양성이면 해당 화합물은 EFD 위험 양성으로 간주한다. 음성이면 해당 화합물은 EFD 위험 음성으로 간주하며, 추가 시험이 위해성 평가를 크게 바꿀 것으로 판단되지 않는 한 일반적으로 추가 시험은 필요하지 않다.

If the alternative assay for the first species predicts a negative outcome (i.e., no MEFL), a definitive in vivo EFD study in the second species should be conducted to confirm the assessment. If positive, the compound is considered positive for EFD risk. If negative, the compound is considered negative for EFD risk, and no further testing is generally warranted, unless it is judged that additional studies would significantly alter the risk assessment.

일부 질환은 일반적으로 고령에 이르러서야 진단되지만, 그럼에도 생식 가능한 여성에서 낮은 빈도로 진단될 수 있다(예: 일반적으로 60세 이후에 진단되는 수포성 유사천포창). 이러한 고령기 발병 질환을 가진 여성 집단의 수태능은 일반적으로 낮으므로, 이 집단에서만 사용하는 의약품이 선천성 결함 발생률을 증가시킬 가능성은 낮다. 이 시나리오에서 EFD 평가가 필요한지는 사례별로 결정하여야 한다. 이 시나리오는 치료 대상 집단이 불임으로 추정되는 상황(예: 폐경 후 골다공증)을 위한 것이 아니며, 그러한 상황에서는 일반적으로 EFD 평가가 필요하지 않다.

Some diseases are typically only diagnosed at a later age, but may nonetheless be diagnosed in reproductively capable women at a low incidence (e.g., bullous pemphigoid, which is typically diagnosed after age 60). Given the generally low rate of fertility in the female population with such late-life onset diseases, there is a diminished likelihood that a pharmaceutical used exclusively in this population will lead to an increase in the incidence of birth defects. Whether an EFD assessment is warranted under this scenario should be determined on a case-by-case basis. This scenario is not intended for situations where the treatment population is presumptively infertile (e.g., post-menopausal osteoporosis), for which no EFD assessment would typically be warranted.

이 시나리오의 시험 전략은 중증 쇠약성 또는 생명을 위협하는 질환에 대해 제시한 전략과 유사하나, 두 번째 종에서의 첫 생체내 평가를 pEFD 시험으로 수행할 수 있다는 점이 다르다.

The testing strategy under this scenario is similar to that depicted for severely debilitating or life-threatening diseases, with the exception that the first in vivo assessment in the second species can be conducted as a pEFD study.

참조 화합물 목록에는 비임상시험(명백한 모체 독성이 없는 상태) 및/또는 사람에서 MEFL을 유발하는 것으로 확인된 29개 화합물이 수록되어 있다(이 부록의 표 1).

The Reference Compound List contains 29 compounds that have been shown to induce MEFL in nonclinical studies (in the absence of overt maternal toxicity) and/or humans (Table 1 of this Annex).

NOAEL 및 LOAEL 결정에는 MEFL 소견만 인정하였다. 가역적이거나 경미한 발생독성 발현(예: 태자 체중 변화, 성장 억제, 골격 변이)의 유발과 관련된 용량은 이 평가에 사용하지 않았다. (본 가이드라인 9항 참조). 어느 NOAEL 및 LOAEL 값을 사용할지 결정할 때 시험의 전반적인 완건성(예: GLP 규정 준수, 시험 동물 수, 용량 단계 수)을 고려하였다. 여러 출처가 있는 경우, ICH S5(R2) 가이드라인에서 권장하는 설계에 부합하게 설계된 시험의 데이터를 확정 데이터로 채택하였다.

Only findings of MEFL were recognized for NOAEL and LOAEL determinations. Doses associated with the induction of reversible or minor manifestations of developmental toxicity (e.g., changes in fetal weight, growth suppression, and skeletal variations) were not used for this assessment. (see Section 9, of the Guidance). The general robustness of the studies (e.g., compliance with GLP regulations, the number of animals in the study, number of dose levels) was considered when determining which NOAEL and LOAEL values to use. When multiple sources were available, the data from a study designed in a manner consistent with the design recommended in the ICH S5(R2) guideline was accepted as the definitive data.

서로 잘 일치하지 않는 신뢰할 만한 데이터 출처가 여럿 있는 경우, 데이터가 서로 다른 시험에서 나온 것이더라도 일반적으로 가장 높은 NOAEL(낮은 노출 배수를 주장하는 쪽으로 치우치는 것을 피하기 위하여)과 가장 낮은 LOAEL(규제 평가에서 통상 그렇게 하듯이)을 사용하였다. 이 목록의 화합물 및 그 밖의 화합물은 대체시험법 또는 시험법 조합의 적격성 평가를 뒷받침하는 데 사용할 수 있다. 시험법 특이도를 평가하기 위하여 MEFL을 유발하지 않는 화합물(음성 화합물)도 사용하여야 한다. 이러한 화합물은 태자 체중 변화, 구조적 변이 또는 골화 지연/감소와 같은 배자/태자에 대한 부가적 영향과 관계없이 MEFL이 없는 화합물이다.

When there were multiple robust sources of data that did not closely align, the highest NOAEL (to avoid bias towards claiming a low margin) and lowest LOAEL (as is routinely done in regulatory assessments) were generally used, even if the data were from different studies. The compounds in this list as well as others can be used to support qualification of an alternative assay or battery of assays. Compounds not causing MEFL (negative compounds) should also be used to assess assay specificity. Such compounds would lack MEFL regardless of additional effects on embryo/fetus such as fetal body weight changes, structural variations or delayed/reduced ossification.

이러한 화합물은 시험한 모든 생체내 용량에서 음성일 수도 있고, 대체시험법이 그 사용 맥락 안에서 음성에서 양성으로의 전환을 예측한다면 더 높은 용량/노출에서 양성(MEFL 관찰)일 수도 있다. 즉, 대체시험법은 생체내 시험이 음성 결과(MEFL 없음)를 보인 조건에서 어느 외삽 수준에서는 음성 결과를 예측하여야 한다. 참조 화합물 목록에는 음성 대조물질의 예로 세 화합물(세티리진(Cetirizine), 삭사글립틴(Saxagliptin), 빌다글립틴(Vildagliptin))을 제시한다. 이 화합물들은 MRHD 대비 노출 배수(AUC 및 Cmax) 25배 초과에서 랫드와 토끼에 MEFL을 유발하지 않았다.

These compounds can be negative at all in vivo doses tested, or can be positive (MEFL observed) at higher doses/exposures provided the alternative assay within its context of use predicts the transition from negative to positive. That is, the alternative assay should predict a negative result at some extrapolated level under the conditions for which the in vivo study yielded a negative result (no MEFL). In the Reference Compound List, three compounds are provided as an example for negative controls (Cetirizine, Saxagliptin, Vildagliptin). These compounds did not induce MEFL in rat and rabbit at an exposure multiple (AUC and Cmax) of >25 fold at the MRHD.

CAS 번호: 55079-83-9

CAS No.: 55079-83-9

CAS 번호: 50-78-2

CAS No.: 50-78-2

CAS 번호: 302-79-4

CAS No.: 302-79-4

CAS 번호: 147536-97-8

CAS No.: 147536-97-8

CAS 번호: 55-98-1

CAS No.: 55-98-1

CAS 번호: 298-46-4

CAS No.: 298-46-4

CAS 번호: 15663-27-1

CAS No.: 15663-27-1

주: 사용할 최적의 PK 자료로 명확하게 선택할 만한 것이 없었다. Chen은 15배 외삽이 필요하였고, Darwish는 자료가 총 Pt인지 비결합형 약물인지 불분명하였으며, Tamura는 EFD 독성시험에 사용된 계통(Wistar)과 다른 랫드 계통(Donryu)을 사용하였다. 정맥내 경로와 복강내 경로 사이에 PK 차이가 상당하므로(Sekiya, et al., 1985), 정맥내 자료는 사용하지 않았다.

Note: There was no obvious choice for the best PK data to use. Chen required a 15-fold extrapolation, Darwish was unclear whether the data were total Pt or unbound drug, and Tamura used a different strain of rat (Donryu) than used for the EFD toxicity study (Wistar). There are substantial differences in PK between the intravenous and intraperitoneal routes (Sekiya, et al., 1985), so intravenous data were not used.

CAS 번호: 50-18-0

CAS No.: 50-18-0

CAS 번호: 147-94-4

CAS No.: 147-94-4

CAS 번호: 1195765-45-7

CAS No.: 1195765-45-7

CAS 번호: 302962-49-8

CAS No.: 302962-49-8

CAS 번호: 86386-73-4

CAS No.: 86386-73-4

CAS No.: 51-21-8

CAS No.: 51-21-8

CAS No.: 127-07-1

CAS No.: 127-07-1

CAS No.: 936563-96-1

CAS No.: 936563-96-1

CAS No.: 15687-27-1

CAS No.: 15687-27-1

CAS No.: 152459-95-5 (메실산염으로서 220127-57-1)

CAS No.: 152459-95-5 (220127-57-1 as mesilate)

CAS No.: 4759-48-2

CAS No.: 4759-48-2

CAS No.: 59-05-2

CAS No.: 59-05-2

CAS 번호: 444731-52-6

CAS No.: 444731-52-6

CAS 번호: 57-41-0

CAS No.: 57-41-0

CAS 번호: 19171-19-8

CAS No.: 19171-19-8

CAS 번호: 36791-04-5

CAS No.: 36791-04-5

CAS 번호: 104987-11-3

CAS No.: 104987-11-3

CAS 번호: 50-35-1

CAS No.: 50-35-1

CAS 번호: 97240-79-4

CAS No.: 97240-79-4

CAS 번호: 127-48-0

CAS No.: 127-48-0

CAS 번호: 99-66-1 (발프로산나트륨: 1069-66-5)

CAS No.: 99-66-1 (sodium valproate: 1069-66-5)