이 가이드라인은 1999년 3월 10일 ICH 운영위원회 회의에서 ICH 절차의 Step 4에 도달하였으며, ICH의 3개 규제 당사자에게 채택이 권고된다.

Having reached Step 4 of the ICH Process at the ICH Steering Committee meeting on 10 March 1999, this guideline is recommended for adoption to the three regulatory parties to ICH

이 가이드라인 문서는 신규 품목허가 신청을 뒷받침하기 위하여, 생명공학의약품 및 생물의약품에 대한 통일된 국제 기준 및 시험방법을 가능한 범위에서 설정하고 그 타당성을 입증하는 데 관한 일반 원칙을 제시한다.

This guidance document provides general principles on the setting and justification, to the extent possible, of a uniform set of international specifications for biotechnological and biological products to support new marketing applications.

기준 및 시험방법은 시험 항목, 분석절차의 참조, 그리고 기술된 시험에 대한 수치 한도, 범위 또는 그 밖의 기준인 적절한 허용기준의 목록으로 정의된다. 기준 및 시험방법은 원료의약품, 완제의약품 또는 제조 과정의 다른 단계에 있는 물질이 의도한 용도에 적합한 것으로 인정되기 위하여 충족하여야 하는 기준의 집합을 설정한다. "기준 및 시험방법에 적합"하다는 것은 원료의약품 및 완제의약품을 열거된 분석절차에 따라 시험하였을 때 허용기준을 충족한다는 의미이다. 기준 및 시험방법은 제조업자가 제안하고 타당성을 입증하며 규제당국이 허가 조건으로 승인하는 핵심적인 품질 기준이다.

A specification is defined as a list of tests, references to analytical procedures, and appropriate acceptance criteria which are numerical limits, ranges, or other criteria for the tests described. It establishes the set of criteria to which a drug substance, drug product or materials at other stages of its manufacture should conform to be considered acceptable for its intended use. “Conformance to specification” means that the drug substance and drug product, when tested according to the listed analytical procedures, will meet the acceptance criteria. Specifications are critical quality standards that are proposed and justified by the manufacturer and approved by regulatory authorities as conditions of approval.

기준 및 시험방법은 제품의 품질과 일관성을 보증하기 위하여 설계된 전체 관리전략의 일부이다. 이 전략의 다른 부분으로는 많은 기준 및 시험방법의 근거가 되는 개발 단계의 철저한 제품 특성분석, GMP(의약품 제조 및 품질관리기준) 준수, 밸리데이션된 제조 공정, 원료 시험, 공정 중 시험, 안정성 시험 등이 있다.

Specifications are one part of a total control strategy designed to ensure product quality and consistency. Other parts of this strategy include thorough product characterization during development, upon which many of the specifications are based, adherence to Good Manufacturing Practices, a validated manufacturing process, raw materials testing, in-process testing, stability testing, etc.

기준 및 시험방법은 완전한 특성분석을 확립하기 위해서가 아니라 원료의약품 및 완제의약품의 품질을 확인하기 위하여 선정되며, 제품의 안전성과 유효성을 보증하는 데 유용한 것으로 밝혀진 분자적·생물학적 특성에 중점을 두어야 한다.

Specifications are chosen to confirm the quality of the drug substance and drug product rather than to establish full characterization and should focus on those molecular and biological characteristics found to be useful in ensuring the safety and efficacy of the product.

이 문서에서 채택하고 설명하는 원칙은 단백질 및 폴리펩티드, 그 유도체, 그리고 이들을 구성 성분으로 하는 제품(예: 결합체)에 적용된다. 이러한 단백질 및 폴리펩티드는 재조합 또는 비재조합 세포배양 발현계에서 생산되며, 적절한 분석절차 세트를 사용하여 고도로 정제하고 특성분석할 수 있다.

The principles adopted and explained in this document apply to proteins and polypeptides, their derivatives, and products of which they are components (e.g., conjugates). These proteins and polypeptides are produced from recombinant or non-recombinant cell-culture expression systems and can be highly purified and characterized using an appropriate set of analytical procedures.

이 문서에 기술된 원칙은 조직 및 체액에서 분리한 단백질 및 폴리펩티드와 같은 다른 유형의 제품에도 적용될 수 있다. 적용 여부를 판단하기 위하여 제조업자는 해당 규제당국과 협의하여야 한다.

The principles outlined in this document may also apply to other product types such as proteins and polypeptides isolated from tissues and body fluids. To determine applicability, manufacturers should consult with the appropriate regulatory authorities.

이 문서는 항생물질, 합성 펩티드 및 폴리펩티드, 헤파린, 비타민, 세포 대사산물, DNA 제품, 알레르겐 추출물, 기존 백신, 세포, 전혈 및 세포성 혈액성분은 다루지 않는다. 별도의 ICH 가이드라인인 "기준 및 시험방법: 신약 원료의약품 및 신약 완제의약품의 시험절차 및 허용기준: 화학물질"이 화학물질에 대한 기준 및 시험방법과 그 밖의 기준을 다룬다.

This document does not cover antibiotics, synthetic peptides and polypeptides, heparins, vitamins, cell metabolites, DNA products, allergenic extracts, conventional vaccines, cells, whole blood, and cellular blood components. A separate ICH Guideline, ”Specifications: Test Procedures and Acceptance Criteria for New Drugs Substances and New Drug Products: Chemical Substances” addresses specifications, and other criteria for chemical substances.

이 문서는 특정 시험절차나 특정 허용기준을 권고하지 않으며, 비임상 및/또는 임상 연구용 물질의 규제에는 적용되지 않는다.

This document does not recommend specific test procedures or specific acceptance criteria nor does it apply to the regulation of preclinical and/or clinical research material.

관련 기준 및 시험방법을 설정하려면 적절한 기법으로 생명공학의약품 또는 생물의약품의 특성분석(물리화학적 특성, 생물학적 활성, 면역화학적 특성, 순도 및 불순물의 측정을 포함한다)을 실시하여야 한다. 허용기준은 비임상 및/또는 임상시험에 사용된 로트에서 얻은 자료, 제조 일관성 입증에 사용된 로트의 자료, 안정성 시험 자료 및 관련 개발 자료에 근거하여 설정하고 그 타당성을 입증하여야 한다.

Characterization of a biotechnological or biological product (which includes the determination of physicochemical properties, biological activity, immunochemical properties, purity and impurities) by appropriate techniques is necessary to allow relevant specifications to be established. Acceptance criteria should be established and justified based on data obtained from lots used in preclinical and/or clinical studies, data from lots used for demonstration of manufacturing consistency and data from stability studies, and relevant development data.

광범위한 특성분석은 개발 단계에서, 그리고 필요한 경우 중대한 공정 변경 후에 실시한다. 신청 시점에 제품은 적절한 표준품이 있는 경우 그 표준품과 비교되어 있어야 한다. 실행 가능하고 관련성이 있는 경우, 제품은 천연 대응물질과 비교되어야 한다. 또한 신청 시점에 제조업자는 생산 로트의 생물학적 시험 및 물리화학적 시험에 사용할, 적절하게 특성분석된 자체 참조물질을 확립해 두어야 한다. 새로운 분석 기술과 기존 기술의 개선이 계속 개발되고 있으며, 적절한 경우 이를 활용하여야 한다.

Extensive characterization is performed in the development phase and, where necessary, following significant process changes. At the time of submission, the product should have been compared with an appropriate reference standard, if available. When feasible and relevant, it should be compared with its natural counterpart. Also, at the time of submission, the manufacturer should have established appropriately characterized in-house reference materials which will serve for biological and physicochemical testing of production lots. New analytical technology and modifications to existing technology are continually being developed and should be utilized when appropriate.

물리화학적 특성분석 프로그램에는 일반적으로 목적 제품의 조성, 물리적 특성 및 1차 구조의 측정이 포함된다. 경우에 따라 목적 제품의 고차 구조(그 충실도는 일반적으로 생물학적 활성으로 추정한다)에 관한 정보를 적절한 물리화학적 방법으로 얻을 수 있다.

A physicochemical characterization program will generally include a determination of the composition, physical properties, and primary structure of the desired product. In some cases, information regarding higher-order structure of the desired product (the fidelity of which is generally inferred by its biological activity) may be obtained by appropriate physicochemical methodologies.

살아 있는 생물체가 단백질을 생산하는 데 사용하는 생합성 과정 때문에 단백질에는 본질적으로 어느 정도의 구조적 불균일성이 존재하며, 따라서 목적 제품은 예상되는 번역 후 변형체(예: 당형체)의 혼합물일 수 있다. 이러한 형태는 활성을 가질 수 있으며, 그 존재가 제품의 안전성과 유효성에 해로운 영향을 미치지 않을 수 있다(2.1.4항). 제조업자는 목적 제품의 불균일성 양상을 규정하고, 그것이 비임상 및 임상시험에 사용된 로트의 양상과 일관됨을 입증하여야 한다. 제품 불균일성 양상의 일관성이 입증되면 개별 형태의 활성, 유효성 및 안전성(면역원성 포함)에 대한 평가는 필요하지 않을 수 있다.

An inherent degree of structural heterogeneity occurs in proteins due to the biosynthetic processes used by living organisms to produce them; therefore, the desired product can be a mixture of anticipated post-translationally modified forms (e.g., glycoforms). These forms may be active and their presence may have no deleterious effect on the safety and efficacy of the product (section 2.1.4). The manufacturer should define the pattern of heterogeneity of the desired product and demonstrate consistency with that of the lots used in preclinical and clinical studies. If a consistent pattern of product heterogeneity is demonstrated, an evaluation of the activity, efficacy and safety (including immunogenicity) of individual forms may not be necessary.

불균일성은 원료의약품 또는 완제의약품의 제조 및/또는 보관 중에도 생길 수 있다. 이러한 제품의 불균일성은 그 품질을 규정하므로, 로트 간 일관성을 보증하기 위하여 불균일성의 정도와 프로파일을 특성분석하여야 한다. 목적 제품의 이러한 변이체가 활성, 유효성 및 안전성 측면에서 목적 제품과 동등한 특성을 가지면 제품 관련 물질로 간주한다. 공정 변경 및 분해산물로 인하여 비임상 및 임상 개발 중 사용된 물질에서 관찰된 것과 다른 불균일성 양상이 나타나는 경우, 이러한 변화의 의미를 평가하여야 한다.

Heterogeneity can also be produced during manufacture and/or storage of the drug substance or drug product. Since the heterogeneity of these products defines their quality, the degree and profile of this heterogeneity should be characterized, to assure lot-to-lot consistency. When these variants of the desired product have properties comparable to those of the desired product with respect to activity, efficacy and safety, they are considered product-related substances. When process changes and degradation products result in heterogeneity patterns which differ from those observed in the material used during preclinical and clinical development, the significance of these alterations should be evaluated.

물리화학적 특성을 규명하기 위한 분석방법은 부록 6.1에 열거되어 있다. 새로운 분석 기술과 기존 기술의 개선이 계속 개발되고 있으며, 적절한 경우 이를 활용하여야 한다.

Analytical methods to elucidate physicochemical properties are listed in Appendix 6.1. New analytical technology and modifications to existing technology are continually being developed and should be utilized when appropriate.

로트 출하(4항)를 위해서는 이들 방법 중 적절한 일부를 선정하고 그 타당성을 입증하여야 한다.

For the purpose of lot release (section 4), an appropriate subset of these methods should be selected and justified.

생물학적 특성의 평가는 완전한 특성분석 프로파일을 확립하는 데 똑같이 필수적인 단계이다. 중요한 특성 하나는 정해진 생물학적 효과를 나타내는 제품의 특이적 능력 또는 역량을 기술하는 생물학적 활성이다.

Assessment of the biological properties constitutes an equally essential step in establishing a complete characterization profile. An important property is the biological activity that describes the specific ability or capacity of a product to achieve a defined biological effect.

제조업자는 생물학적 활성을 측정하기 위한 유효한 생물학적 시험법을 제시하여야 한다. 생물학적 활성을 측정하는 데 사용하는 절차의 예는 다음과 같다.

A valid biological assay to measure the biological activity should be provided by the manufacturer. Examples of procedures used to measure biological activity include:

리간드 및 수용체 결합 시험법과 같은 그 밖의 절차도 허용될 수 있다.

Other procedures such as ligand and receptor binding assays, may be acceptable.

역가(단위로 표시)는 관련 생물학적 특성과 연관된 제품 특성에 근거한 생물학적 활성의 정량적 척도인 반면, 함량(질량으로 표시)은 단백질 함량의 물리화학적 척도이다. 임상 상황에서의 생물학적 활성을 모사하는 것이 항상 필요한 것은 아니다. 예상되는 임상 반응과 생물학적 시험법에서의 활성 간 상관관계는 약력학 시험 또는 임상시험에서 확립하여야 한다.

Potency (expressed in units) is the quantitative measure of biological activity based on the attribute of the product which is linked to the relevant biological properties, whereas, quantity (expressed in mass) is a physicochemical measure of protein content. Mimicking the biological activity in the clinical situation is not always necessary. A correlation between the expected clinical response and the activity in the biological assay should be established in pharmacodynamic or clinical studies.

생물학적 시험 결과는, 국제 또는 국가 표준품이 있고 사용하는 시험법에 적절한 경우, 그 표준품에 대해 교정한 활성 단위로 표시하여야 한다. 그러한 표준품이 없는 경우에는 특성분석된 자체 참조물질을 확립하고, 생산 로트의 시험 결과를 자체 단위로 보고하여야 한다.

The results of biological assays should be expressed in units of activity calibrated against an international or national reference standard, when available and appropriate for the assay utilized. Where no such reference standard exists, a characterized in-house reference material should be established and assay results of production lots reported as in-house units.

복잡한 분자의 경우 물리화학적 정보가 방대하더라도 고차 구조를 확인하지 못하는 경우가 많으나, 고차 구조는 생물학적 활성으로부터 추정할 수 있다. 이러한 경우, 신뢰한계가 더 넓은 생물학적 시험법이라도 특이적 정량 측정과 병행하면 허용될 수 있다. 중요한 점은, 제품의 생물학적 활성을 측정하는 생물학적 시험법은 다음의 경우에만 물리화학적 시험으로 대체할 수 있다는 것이다.

Often, for complex molecules, the physicochemical information may be extensive but unable to confirm the higher-order structure which, however, can be inferred from the biological activity. In such cases, a biological assay, with wider confidence limits, may be acceptable when combined with a specific quantitative measure. Importantly, a biological assay to measure the biological activity of the product may be replaced by physicochemical tests only in those instances where:

(적절한 상관관계에 근거하여) 물리화학적 시험만으로 생물학적 활성을 정량하는 경우, 결과는 질량으로 표시하여야 한다.

Where physicochemical tests alone are used to quantitate the biological activity (based on appropriate correlation), results should be expressed in mass.

로트 출하(4항)를 위하여, 제조업자는 관련 정량 시험법(생물학적 및/또는 물리화학적)의 선택에 대한 타당성을 입증하여야 한다.

For the purpose of lot release (section 4), the choice of relevant quantitative assay (biological and/or physicochemical) should be justified by the manufacturer.

항체가 목적 제품인 경우, 그 면역학적 특성을 충분히 특성분석하여야 한다. 친화도, 결합력 및 면역반응성(교차반응성 포함)을 측정하기 위하여, 가능한 범위에서 정제된 항원 및 항원의 특정 부위에 대한 항체 결합 시험을 수행하여야 한다. 또한 가능한 경우, 관련 에피토프를 가진 표적 분자를 생화학적으로 규정하고 에피토프 자체도 규정하여야 한다.

When an antibody is the desired product, its immunological properties should be fully characterized. Binding assays of the antibody to purified antigens and defined regions of antigens should be performed, as feasible, to determine affinity, avidity and immunoreactivity (including cross-reactivity). In addition, the target molecule bearing the relevant epitope should be biochemically defined and the epitope itself defined, when feasible.

일부 원료의약품 또는 완제의약품의 경우, 단백질 분자의 서로 다른 에피토프를 인식하는 항체를 이용한 면역화학적 절차(예: ELISA, 웨스턴 블롯)로 단백질 분자를 검사할 필요가 있을 수 있다. 단백질의 면역화학적 특성은 그 확인, 균질성 또는 순도를 확립하거나 그 양을 정량하는 데 활용될 수 있다.

For some drug substances or drug products, the protein molecule may need to be examined using immunochemical procedures (e.g., ELISA, Western-blot) utilizing antibodies which recognize different epitopes of the protein molecule. Immunochemical properties of a protein may serve to establish its identity, homogeneity or purity, or serve to quantify it.

면역화학적 특성이 로트 출하 기준을 구성하는 경우, 해당 항체에 관한 모든 관련 정보를 제공하여야 한다.

If immunochemical properties constitute lot release criteria, all relevant information pertaining to the antibody should be made available.

절대 순도와 상대 순도의 측정은 분석상 상당한 어려움이 있으며, 그 결과는 방법에 크게 의존한다. 역사적으로 생물의약품의 상대 순도는 비활성(제품 mg당 생물학적 활성 단위)으로 표시되어 왔는데, 이 또한 방법에 크게 의존한다. 따라서 원료의약품 및 완제의약품의 순도는 여러 분석절차를 조합하여 평가한다.

The determination of absolute, as well as relative purity, presents considerable analytical challenges, and the results are highly method-dependent. Historically, the relative purity of a biological product has been expressed in terms of specific activity (units of biological activity per mg of product) which is also highly method-dependent. Consequently, the purity of the drug substance and drug product is assessed by a combination of analytical procedures.

생명공학의약품 및 생물의약품 고유의 생합성 생산 공정과 분자 특성으로 인하여, 원료의약품에는 여러 분자 실체 또는 변이체가 포함될 수 있다. 이러한 분자 실체가 예상되는 번역 후 변형에서 유래한 것이면 목적 제품의 일부이다. 목적 제품의 변이체가 제조 공정 및/또는 보관 중에 생성되고 목적 제품과 동등한 특성을 가지면, 이는 불순물이 아니라 제품 관련 물질로 간주한다(2.1.1항).

Due to the unique biosynthetic production process and molecular characteristics of biotechnological and biological products, the drug substance can include several molecular entities or variants. When these molecular entities are derived from anticipated post-translational modification, they are part of the desired product. When variants of the desired product are formed during the manufacturing process and/or storage and have properties comparable to the desired product, they are considered product-related substances and not impurities (section 2.1.1).

제품 관련 물질에 대하여 적절히 개별 및/또는 총합 허용기준을 설정하여야 한다.

Individual and/or collective acceptance criteria for product-related substances should be set, as appropriate.

로트 출하(4항)를 위해서는 순도 측정용 방법 중 적절한 일부를 선정하고 그 타당성을 입증하여야 한다.

For the purpose of lot release, (section 4), an appropriate subset of methods should be selected and justified for determination of purity.

제조업자는 목적 제품과 여러 제품 관련 물질로 구성될 수 있는 원료의약품 및 완제의약품의 순도를 평가하는 것 외에, 존재할 수 있는 불순물도 평가하여야 한다. 불순물은 공정 관련 불순물이거나 제품 관련 불순물일 수 있다. 불순물은 구조가 알려져 있거나, 부분적으로 특성분석되었거나, 확인되지 않은 것일 수 있다. 불순물을 충분한 양으로 생성할 수 있는 경우, 이들 물질을 가능한 범위에서 특성분석하고, 가능하면 그 생물학적 활성을 평가하여야 한다.

In addition to evaluating the purity of the drug substance and drug product, which may be composed of the desired product and multiple product-related substances, the manufacturer should also assess impurities which may be present. Impurities may be either process or product-related. They can be of known structure, partially characterized, or unidentified. When adequate quantities of impurities can be generated, these materials should be characterized to the extent possible and, where possible, their biological activities should be evaluated.

공정 관련 불순물은 제조 공정에서 유래한 것, 즉 세포기질(예: 숙주세포 단백질, 숙주세포 DNA), 세포배양(예: 유도물질, 항생물질 또는 배지 성분) 또는 다운스트림 공정("부록", 6.2.1항 참조)에서 유래한 불순물을 포함한다. 제품 관련 불순물(예: 전구체, 일부 분해산물)은 제조 및/또는 보관 중에 생기는 분자 변이체로서, 활성, 유효성 및 안전성 측면에서 목적 제품과 동등한 특성을 갖지 않는 것이다.

Process-related impurities encompass those that are derived from the manufacturing process, i.e., cell substrates (e.g., host cell proteins, host cell DNA), cell culture (e.g., inducers, antibiotics, or media components), or downstream processing (see “Appendix”, section 6.2.1). Product-related impurities (e.g., precursors, certain degradation products) are molecular variants arising during manufacture and/or storage, which do not have properties comparable to those of the desired product with respect to activity, efficacy, and safety.

나아가 불순물의 허용기준은 비임상 및 임상시험에 사용된 로트와 제조 일관성 로트에서 얻은 자료에 근거하여야 한다. 불순물(제품 관련 및 공정 관련)에 대하여 적절히 개별 및/또는 총합 허용기준을 설정하여야 한다. 특정 상황에서는 선정된 불순물에 대한 허용기준이 필요하지 않을 수 있다(2.3항).

Further, the acceptance criteria for impurities should be based on data obtained from lots used in preclinical and clinical studies and manufacturing consistency lots. Individual and/or collective acceptance criteria for impurities (product-related and process-related) should be set, as appropriate. Under certain circumstances, acceptance criteria for selected impurities may not be necessary (section 2.3).

불순물의 존재를 시험하는 데 사용할 수 있는 분석절차의 예는 부록 6.2에 열거되어 있다. 새로운 분석 기술과 기존 기술의 개선이 계속 개발되고 있으며, 적절한 경우 이를 활용하여야 한다.

Examples of analytical procedures which may be employed to test for the presence of impurities are listed in Appendix 6.2. New analytical technology and modifications to existing technology are continually being developed and should be utilized when appropriate.

로트 출하(4항)를 위해서는 이들 방법 중 적절한 일부를 선정하고 그 타당성을 입증하여야 한다.

For the purpose of lot release (section 4), an appropriate subset of these methods should be selected and justified.

제품 중 오염물질에는 제조 공정의 일부로 의도되지 않은, 우발적으로 유입된 모든 물질, 예컨대 화학적·생화학적 물질(예: 미생물 프로테아제) 및/또는 미생물 종이 포함된다. 오염물질은 엄격히 방지하고/하거나, 원료의약품 또는 완제의약품 기준 및 시험방법에 대한 적절한 공정 중 허용기준 또는 조치 한도로 적절히 관리하여야 한다(2.3항). 외래성 바이러스 또는 마이코플라스마 오염이라는 특수한 경우에는 조치 한도 개념이 적용되지 않으며, ICH 조화 3자 가이드라인 "생명공학/생물의약품의 품질: 사람 또는 동물 유래 세포주에서 유래한 생명공학의약품의 바이러스 안전성 평가"와 "생명공학/생물의약품의 품질: 생명공학/생물의약품 생산에 사용되는 세포기질의 유래 및 특성분석"에서 제안하는 전략을 고려하여야 한다.

Contaminants in a product include all adventitiously introduced materials not intended to be part of the manufacturing process, such as chemical and biochemical materials (e.g., microbial proteases), and/or microbial species. Contaminants should be strictly avoided and/or suitably controlled with appropriate in-process acceptance criteria or action limits for drug substance or drug product specifications (section 2.3). For the special case of adventitious viral or mycoplasma contamination, the concept of action limits is not applicable, and the strategies proposed in ICH Harmonised Tripartite Guidelines “Quality of Biotechnological/Biological Products: Viral Safety Evaluation of Biotechnology Derived Products Derived from Cell Lines of Human or Animal Origin” and “Quality of Biotechnological/Biological Products: Derivation and Characterization of Cell Substrates Used for Production of Biotechnological/Biological Products“ should be considered.

통상 단백질 함량으로 측정하는 함량은 생명공학의약품 및 생물의약품에 핵심적이며, 적절한 시험법, 대개 물리화학적 시험법으로 측정하여야 한다. 경우에 따라 얻어진 함량 값이 생물학적 시험법으로 얻은 값과 직접 연관될 수 있음이 입증될 수 있다. 이러한 상관관계가 있는 경우, 충전과 같은 제조 공정에서 생물학적 활성 측정 대신 함량 측정을 사용하는 것이 적절할 수 있다.

Quantity, usually measured as protein content, is critical for a biotechnological and biological product and should be determined using an appropriate assay, usually physicochemical in nature. In some cases, it may be demonstrated that the quantity values obtained may be directly related to those found using the biological assay. When this correlation exists, it may be appropriate to use measurement of quantity rather than the measurement of biological activity in manufacturing processes, such as filling.

신규 분자 실체에 대한 의약품 신청의 경우 국제 또는 국가 표준품이 있을 가능성은 낮다. 신청 시점에 제조업자는 생산용 및 임상용 물질을 대표하는 로트로부터 조제하고 적절하게 특성분석한 자체 일차 참조물질을 확립해 두어야 한다. 생산 로트 시험에 사용하는 자체 작업 참조물질은 이 일차 참조물질에 대해 교정하여야 한다. 국제 또는 국가 표준품이 있고 적절한 경우, 참조물질은 그 표준품에 대해 교정하여야 한다. 생물학적 시험과 물리화학적 시험 모두에 동일한 참조물질을 사용하는 것이 바람직하지만, 경우에 따라 별도의 참조물질이 필요할 수 있다. 또한 제품 관련 물질, 제품 관련 불순물 및 공정 관련 불순물에 대해 각각 별개의 참조물질을 확립할 필요가 있을 수 있다. 적절한 경우, 참조물질의 제조 및/또는 정제에 관한 기술을 신청서에 포함하여야 한다.

For drug applications for new molecular entities, it is unlikely that an international or national standard will be available. At the time of submission, the manufacturer should have established an appropriately characterized in-house primary reference material, prepared from lot(s) representative of production and clinical materials. In-house working reference material(s) used in the testing of production lots should be calibrated against this primary reference material. Where an international or national standard is available and appropriate, reference materials should be calibrated against it. While it is desirable to use the same reference material for both biological assays and physicochemical testing, in some cases, a separate reference material may be necessary. Also, distinct reference materials for product-related substances, product-related impurities and process-related impurities, may need to be established. When appropriate, a description of the manufacture and/or purification of reference materials should be included in the application.

참조물질의 안정성을 뒷받침하는 특성분석, 보관 조건 및 제형에 관한 문서도 제출하여야 한다.

Documentation of the characterization, storage conditions and formulation supportive of reference material(s) stability should also be provided.

신청서를 규제당국에 제출하는 시점에, 신청자는 생명공학의약품 및 생물의약품 분석에 사용되는 고유한 시험에 특수한 문제가 있는 경우를 제외하고, 기준 및 시험방법에 사용되는 분석절차를 ICH 조화 3자 가이드라인 "분석절차 밸리데이션: 정의 및 용어"와 "분석절차 밸리데이션: 방법론"에 따라 밸리데이션해 두어야 한다.

At the time the application is submitted to the regulatory authorities, applicants should have validated the analytical procedures used in the specifications in accordance with the ICH Harmonised Tripartite Guidelines “Validation of Analytical Procedures: Definitions and Terminology” and “Validation of Analytical Procedures: Methodology", except where there are specific issues for unique tests used for analyzing biotechnological and biological products.

공정의 적절한 설계와 공정 능력에 대한 지식은, 기준 및 시험방법에 적합한 원료의약품 또는 완제의약품을 산출하는, 관리되고 재현 가능한 제조 공정을 개발하기 위한 전략의 일부이다. 이와 관련하여, 한도는 초기 개발부터 상업적 규모 생산에 이르는 전체 공정에서 얻은 핵심 정보에 근거하여 타당성이 입증된다.

Adequate design of a process and knowledge of its capability are part of the strategy used to develop a manufacturing process which is controlled and reproducible, yielding a drug substance or drug product that meets specifications. In this respect, limits are justified based on critical information gained from the entire process spanning the period from early development through commercial scale production.

일부 불순물의 경우, 적절한 연구로 허용 가능한 수준까지 효율적으로 관리 또는 제거됨이 입증되면 원료의약품이나 완제의약품에 대한 시험이 필요하지 않을 수 있으며 기준 및 시험방법에 포함할 필요가 없을 수 있다. 이 시험에는 지역 규정에 따른 상업적 규모에서의 확인이 포함될 수 있다. 신청서 제출 시점에는 제한된 자료만 있을 수 있음을 인정한다. 따라서 이 개념은 경우에 따라 지역 규정에 따라 품목허가 후에 시행될 수 있다.

For certain impurities, testing of either the drug substance or the drug product may not be necessary and may not need to be included in the specifications if efficient control or removal to acceptable levels is demonstrated by suitable studies. This testing can include verification at commercial scale in accordance with regional regulations. It is recognized that only limited data may be available at the time of submission of an application. This concept may, therefore, sometimes be implemented after marketing authorization, in accordance with regional regulations.

공정 중 시험은 원료의약품 또는 완제의약품 생산 중 핵심적인 의사결정 단계와, 그 자료가 공정의 일관성을 확인하는 데 쓰이는 그 밖의 단계에서 수행한다. 공정 중 시험 결과는 조치 한도로 기록하거나 허용기준으로 보고할 수 있다. 이러한 시험을 수행하면 원료의약품 또는 완제의약품에 대한 시험이 필요 없게 될 수 있다(2.3.1항). 세포배양 종료 시점의 외래성 인자에 대한 공정 중 시험은 허용기준을 설정하여야 하는 시험의 한 예이다.

In-process tests are performed at critical decision making steps and at other steps where data serve to confirm consistency of the process during the production of either the drug substance or the drug product. The results of in-process testing may be recorded as action limits or reported as acceptance criteria. Performing such testing may eliminate the need for testing of the drug substance or drug product (section 2.3.1). In-process testing for adventitious agents at the end of cell culture is an example of testing for which acceptance criteria should be established.

덜 중요한 단계에서 공정의 일관성을 평가하기 위하여 제조업자가 내부 조치 한도를 사용하는 것도 중요하다. 개발 및 밸리데이션 가동 중에 얻은 자료는 제조 공정에 설정할 잠정 조치 한도의 근거가 되어야 한다. 제조업자의 책임 하에 있는 이러한 한도는 조사 또는 추가 조치를 개시하는 데 사용할 수 있다. 이러한 한도는 제품 허가 후 추가 제조 경험과 자료가 확보됨에 따라 더욱 정교하게 다듬어야 한다.

The use of internal action limits by the manufacturer to assess the consistency of the process at less critical steps is also important. Data obtained during development and validation runs should provide the basis for provisional action limits to be set for the manufacturing process. These limits, which are the responsibility of the manufacturer, may be used to initiate investigation or further action. They should be further refined as additional manufacturing experience and data are obtained after product approval.

원료의약품(또는 완제의약품) 생산에 사용되는 원료의 품질은 그 의도한 용도에 적절한 기준을 충족하여야 한다. 생물학적 원료 또는 시약은 해로운 내재성 또는 외래성 인자의 존재 여부를 확인하기 위하여 신중한 평가가 필요할 수 있다. 친화 크로마토그래피를 이용하는 절차(예: 단클론항체 사용)에는, 그 생산 및 사용에서 비롯되는 공정 관련 불순물이나 잠재적 오염물질이 원료의약품 또는 완제의약품의 품질과 안전성을 손상하지 않도록 보증하는 적절한 조치가 수반되어야 한다. 해당 항체에 관한 적절한 정보를 제공하여야 한다.

The quality of the raw materials used in the production of the drug substance (or drug product) should meet standards, appropriate for their intended use. Biological raw materials or reagents may require careful evaluation to establish the presence or absence of deleterious endogenous or adventitious agents. Procedures which make use of affinity chromatography (for example, employing monoclonal antibodies), should be accompanied by appropriate measures to ensure that such process-related impurities or potential contaminants arising from their production and use do not compromise the quality and safety of the drug substance or drug product. Appropriate information pertaining to the antibody should be made available.

완제의약품 제형(경우에 따라 원료의약품)에 사용되는 첨가제의 품질과 용기·마개 시스템의 품질은, 약전 기준이 있고 적절한 경우 그 기준을 충족하여야 한다. 그렇지 않은 경우, 비약전 첨가제에 대해 적절한 허용기준을 설정하여야 한다.

The quality of the excipients used in the drug product formulation (and in some cases, in the drug substance), as well as the container/closure systems, should meet pharmacopoeial standards, where available and appropriate. Otherwise, suitable acceptance criteria should be established for the non-pharmacopoeial excipients.

약전에는 특정 분석절차 및 허용기준에 관한 중요한 요건이 수록되어 있으며, 해당되는 경우 이는 원료의약품 또는 완제의약품 평가의 일부이다. 생명공학의약품 및 생물의약품에 적용되는 이러한 각조에는 일반적으로 무균, 엔도톡신, 미생물 한도, 용기 내 용량, 제제균일성 및 불용성 미립자 시험이 포함되며, 이에 국한되지 않는다. 약전 방법 및 허용기준의 사용과 관련하여, 이 가이드라인의 가치는 각 약전의 분석절차가 조화된 정도와 연계되어 있다. 각 약전은 동일하거나 방법론적으로 동등한 시험절차 및 허용기준을 개발하는 데 전념하고 있다.

Pharmacopoeias contain important requirements pertaining to certain analytical procedures and acceptance criteria which, where relevant, are part of the evaluation of either the drug substance or drug product. Such monographs, applicable to biotechnological and biological products, generally include, but are not limited to tests for sterility, endotoxins, microbial limits, volume in container, uniformity of dosage units and particulate matter. With respect to the use of pharmacopoeial methods and acceptance criteria, the value of this guidance is linked to the extent of harmonisation of the analytical procedures of the pharmacopoeias. The pharmacopoeias are committed to developing identical or methodologically equivalent test procedures and acceptance criteria.

출하 한도 대 유효기간 한도 개념은 타당한 경우 적용할 수 있다. 이 개념은 원료의약품 또는 완제의약품의 유효기간보다 출하에 대해 더 엄격한 한도를 설정하는 것에 관한 것이다. 이 개념이 적용될 수 있는 예로는 역가와 분해산물이 있다. 일부 지역에서는 출하 한도 개념이 자체 한도에만 적용되고 규제상 유효기간 한도에는 적용되지 않을 수 있다.

The concept of release limits vs. shelf-life limits may be applied where justified. This concept pertains to the establishment of limits which are tighter for the release than for the shelf-life of the drug substance or drug product. Examples where this may be applicable include potency and degradation products. In some regions, the concept of release limits may only be applicable to in-house limits and not to the regulatory shelf-life limits.

필요한 경우, 보고되는 정량 자료에 적절한 통계 분석을 적용하여야 한다. 타당성 및 근거를 포함하여 분석 방법을 충분히 기술하여야 한다. 이러한 기술은 제시된 결과를 독립적으로 계산할 수 있을 만큼 충분히 명확하여야 한다.

Appropriate statistical analysis should be applied, when necessary, to quantitative data reported. The methods of analysis, including justification and rationale, should be described fully. These descriptions should be sufficiently clear to permit independent calculation of the results presented.

원료의약품 및 완제의약품의 기준 및 시험방법 설정은 원료 및 첨가제 관리, 공정 중 시험, 공정 평가 또는 밸리데이션, GMP 준수, 안정성 시험 및 로트 일관성 시험을 포함하는 전체 관리전략의 일부이다. 이러한 요소들이 모두 결합되면 제품의 적절한 품질이 유지된다는 보증을 제공한다. 기준 및 시험방법은 제품을 특성분석하기 위해서가 아니라 품질을 확인하기 위하여 선정되므로, 제조업자는 특정 품질 특성에 대한 시험을 포함 및/또는 제외하는 근거와 타당성을 제시하여야 한다. 과학적으로 타당한 기준 및 시험방법을 설정할 때에는 다음 사항을 고려하여야 한다.

The setting of specifications for drug substance and drug product is part of an overall control strategy which includes control of raw materials and excipients, in-process testing, process evaluation or validation, adherence to Good Manufacturing Practices, stability testing, and testing for consistency of lots. When combined in total, these elements provide assurance that the appropriate quality of the product will be maintained. Since specifications are chosen to confirm the quality rather than to characterize the product, the manufacturer should provide the rationale and justification for including and/or excluding testing for specific quality attributes. The following points should be taken into consideration when establishing scientifically justifiable specifications.

기준 및 시험방법에 포함할 시험의 선정은 제품별로 다르다. 허용기준의 허용 범위를 설정하는 데 사용한 근거를 기술하여야 한다. 허용기준은 비임상 및/또는 임상시험에 사용된 로트에서 얻은 자료, 제조 일관성 입증에 사용된 로트의 자료, 안정성 시험 자료 및 관련 개발 자료에 근거하여 설정하고 그 타당성을 입증하여야 한다.

Selection of tests to be included in the specifications is product specific. The rationale used to establish the acceptable range of acceptance criteria should be described. Acceptance criteria should be established and justified based on data obtained from lots used in preclinical and/or clinical studies, data from lots used for demonstration of manufacturing consistency, and data from stability studies, and relevant development data.

경우에 따라 원료의약품 또는 완제의약품 단계가 아닌 생산 단계에서 시험하는 것이 적절하고 허용될 수 있다. 그러한 경우 시험 결과는 공정 중 허용기준으로 간주하고, 해당 지역 규제당국의 요건에 따라 원료의약품 또는 완제의약품의 기준 및 시험방법에 포함하여야 한다.

In some cases, testing at production stages rather than at the drug substance or drug product stages may be appropriate and acceptable. In such circumstances, test results should be considered as in-process acceptance criteria and included in the specification of drug substance or drug product in accordance with the requirements of the regional regulatory authorities.

일반적으로 다음 시험 및 허용기준은 모든 원료의약품에 적용되는 것으로 본다(분석절차는 2.2.2항 참조). 적절한 경우 원료의약품에 대해 약전 시험(예: 엔도톡신 검출)을 수행하여야 한다. 원료의약품별 추가 허용기준이 필요할 수도 있다.

Generally, the following tests and acceptance criteria are considered applicable to all drug substances (for analytical procedures see section 2.2.2). Pharmacopoeial tests (e.g., endotoxin detection) should be performed on the drug substance, where appropriate. Additional drug substance specific acceptance criteria may also be necessary.

원료의약품의 물리적 상태(예: 고체, 액체)와 색을 기술하는 정성적 기술을 제시하여야 한다.

A qualitative statement describing the physical state (e.g., solid, liquid) and color of a drug substance should be provided.

확인시험은 원료의약품에 대해 높은 특이성을 가져야 하며, 그 분자 구조의 고유한 측면 및/또는 그 밖의 특이적 특성에 근거하여야 한다. 확인을 위하여 둘 이상의 시험(물리화학적, 생물학적 및/또는 면역화학적)이 필요할 수 있다. 확인시험은 정성적일 수 있다. 2.1항 및 부록 6.1에 기술된 바와 같이 제품 특성분석에 통상 사용되는 방법 중 일부를 확인 목적에 맞게 적절히 사용하거나 변형할 수 있다.

The identity test(s) should be highly specific for the drug substance and should be based on unique aspects of its molecular structure and/or other specific properties. More than one test (physicochemical, biological and/or immunochemical) may be necessary to establish identity. The identity test(s) can be qualitative in nature. Some of the methods typically used for characterization of the product as described in section 2.1 and in Appendix 6.1 may be employed and/or modified as appropriate for the purpose of establishing identity.

생명공학의약품 및 생물의약품의 절대 순도는 측정하기 어려우며 그 결과는 방법에 의존한다(2.1.4항). 따라서 원료의약품의 순도는 보통 여러 방법을 조합하여 추정한다. 분석절차의 선택과 최적화는 목적 제품을 제품 관련 물질 및 불순물로부터 분리하는 데 중점을 두어야 한다.

The absolute purity of biotechnological and biological products is difficult to determine and the results are method-dependent (section 2.1.4.). Consequently, the purity of the drug substance is usually estimated by a combination of methods. The choice and optimization of analytical procedures should focus on the separation of the desired product from product-related substances and from impurities.

이러한 제품에서 관찰되는 불순물은 공정 관련 불순물과 제품 관련 불순물로 분류된다.

The impurities observed in these products are classified as process-related and product-related:

불순물에 대해서는 분석절차의 선택과 최적화가 목적 제품 및 제품 관련 물질을 불순물로부터 분리하는 데 중점을 두어야 한다. 불순물에 대하여 적절히 개별 및/또는 총합 허용기준을 설정하여야 한다. 특정 상황에서는 선정된 불순물에 대한 허용기준이 요구되지 않을 수 있다(2.3항).

For the impurities, the choice and optimization of analytical procedures should focus on the separation of the desired product and product-related substances from impurities. Individual and/or collective acceptance criteria for impurities should be set, as appropriate. Under certain circumstances, acceptance criteria for selected impurities may not be required (section 2.3).

관련성 있고 밸리데이션된 역가 시험법(2.1.2항)은 생명공학 또는 생물의약품 원료의약품 및/또는 완제의약품의 기준 및 시험방법의 일부가 되어야 한다. 완제의약품에 적절한 역가 시험법을 사용하는 경우(4.2.4항), 원료의약품 단계의 정량 평가에는 대체 방법(물리화학적 및/또는 생물학적)으로 충분할 수 있다. 경우에 따라 비활성 측정이 유용한 추가 정보를 제공할 수 있다.

A relevant, validated potency assay (section 2.1.2) should be part of the specifications for a biotechnological or biological drug substance and/or drug product. When an appropriate potency assay is used for the drug product (section 4.2.4), an alternative method (physicochemical and/or biological) may suffice for quantitative assessment at the drug substance stage. In some cases, the measurement of specific activity may provide additional useful information.

통상 단백질 함량(질량)에 근거한 원료의약품의 함량은 적절한 시험법으로 측정하여야 한다. 함량 측정은 표준품 또는 참조물질과 무관하게 수행할 수 있다. 제품 제조가 역가에 근거하는 경우에는 함량을 따로 측정할 필요가 없을 수 있다.

The quantity of the drug substance, usually based on protein content (mass), should be determined using an appropriate assay. The quantity determination may be independent of a reference standard or material. In cases where product manufacture is based upon potency, there may be no need for an alternate determination of quantity.

일반적으로 다음 시험 및 허용기준은 모든 완제의약품에 적용되는 것으로 본다. 각 항(4.2.1~4.2.5)은 원료의약품의 해당 항(4.1.1~4.1.5)과 상호 참조된다. 약전 요건은 해당 제형에 적용된다. 약전에 수록된 대표적인 시험에는 무균, 엔도톡신, 미생물 한도, 용기 내 용량, 불용성 미립자, 제제균일성, 그리고 동결건조 완제의약품의 수분 함량이 포함되며, 이에 국한되지 않는다. 적절한 경우, 제제균일성 시험은 공정 중 관리로 수행하고 그에 상응하는 허용기준을 설정할 수 있다.

Generally, the following tests and acceptance criteria are considered applicable to all drug products. Each section (4.2.1 - 4.2.5) is cross-referenced to respective sections (4.1.1 - 4.1.5) under Drug Substance. Pharmacopoeial requirements apply to the relevant dosage forms. Typical tests found in the pharmacopoeia include, but are not limited to sterility, endotoxin, microbial limits, volume in container, particulate matter, uniformity of dosage units, and moisture content for lyophilized drug products. If appropriate, testing for uniformity of dosage units may be performed as in-process controls and corresponding acceptance criteria set.

완제의약품의 물리적 상태(예: 고체, 액체), 색 및 투명도를 기술하는 정성적 기술을 제시하여야 한다.

A qualitative statement describing the physical state (e.g., solid, liquid), color, and clarity of the drug product should be provided.

확인시험은 완제의약품에 대해 높은 특이성을 가져야 하며, 그 분자 구조의 고유한 측면 및 그 밖의 특이적 특성에 근거하여야 한다. 확인시험은 정성적일 수 있다. 대부분의 경우 단일 시험으로 충분하다고 인정되지만, 일부 제품의 확인을 위해서는 둘 이상의 시험(물리화학적, 생물학적 및/또는 면역화학적)이 필요할 수 있다. 2.1항 및 부록 6.1에 기술된 바와 같이 제품 특성분석에 통상 사용되는 방법 중 일부를 확인 목적에 맞게 적절히 사용하거나 변형할 수 있다.

The identity test(s) should be highly specific for the drug product and should be based on unique aspects of its molecular structure and for other specific properties. The identity test(s) can be qualitative in nature. While it is recognized that in most cases, a single test is adequate, more than one test (physicochemical, biological and/or immunochemical) may be necessary to establish identity for some products. Some of the methods typically used for characterization of the product as described in section 2.1 and in Appendix 6.1 may be employed and/or modified as appropriate for the purpose of establishing identity.

불순물은 완제의약품의 제조 및/또는 보관 중에 생성되거나 증가할 수 있다. 이러한 불순물은 원료의약품 자체에 존재하는 것과 같은 것이거나, 공정 관련 불순물이거나, 제제화 중 또는 보관 중에 완제의약품에서 특이적으로 생성되는 분해산물일 수 있다. 불순물이 정성적·정량적으로(즉, 상대적 양 및/또는 농도) 원료의약품과 동일하면 시험이 필요하지 않다. 완제의약품의 생산 및/또는 보관 중에 불순물이 유입되거나 생성되는 것으로 알려져 있으면, 이러한 불순물의 수준을 측정하고 허용기준을 설정하여야 한다.

Impurities may be generated or increased during manufacture and/or storage of the drug product. These may be either the same as those occurring in the drug substance itself, process-related, or degradation products which form specifically in the drug product during formulation or during storage. If impurities are qualitatively and quantitatively (i.e., relative amounts and/or concentrations) the same as in the drug substance, testing is not necessary. If impurities are known to be introduced or formed during the production and/or storage of the drug product, the levels of these impurities should be determined and acceptance criteria established.

완제의약품의 제조 및/또는 보관 중 원료의약품의 변화를 측정하기 위한 허용기준과 분석절차는 해당 완제의약품에 대한 이전 경험에 근거하여 개발하고 그 타당성을 입증하여야 한다.

Acceptance criteria and analytical procedures should be developed and justified, based upon previous experience with the drug product, to measure changes in the drug substance during the manufacture and/or storage of the drug product.

분석절차의 선택과 최적화는 목적 제품 및 제품 관련 물질을 분해산물을 포함한 불순물로부터, 그리고 첨가제로부터 분리하는 데 중점을 두어야 한다.

The choice and optimization of analytical procedures should focus on the separation of the desired product and product-related substances from impurities including degradation products, and from excipients.

관련성 있고 밸리데이션된 역가 시험법(2.1.2항)은 생명공학 및 생물의약품 원료의약품 및/또는 완제의약품의 기준 및 시험방법의 일부가 되어야 한다. 원료의약품에 적절한 역가 시험법을 사용하는 경우, 완제의약품의 정량 평가에는 대체 방법(물리화학적 및/또는 생물학적)으로 충분할 수 있다. 다만 그러한 선택의 근거를 제시하여야 한다.

A relevant, validated potency assay (section 2.1.2) should be part of the specifications for a biotechnological and biological drug substance and/or drug product. When an appropriate potency assay is used for the drug substance, an alternative method (physicochemical and/or biological) may suffice for quantitative assessment of the drug product. However, the rationale for such a choice should be provided.

통상 단백질 함량(질량)에 근거한 완제의약품 중 원료의약품의 함량은 적절한 시험법으로 측정하여야 한다. 제품 제조가 역가에 근거하는 경우에는 함량을 따로 측정할 필요가 없을 수 있다.

The quantity of the drug substance in the drug product, usually based on protein content (mass), should be determined using an appropriate assay. In cases where product manufacture is based upon potency, there may be no need for an alternate determination of quantity.

물리적 기술과 그 밖의 품질 특성의 측정은 완제의약품 기능 평가에 중요한 경우가 많다. 이러한 시험의 예로는 pH 및 삼투압이 있다.

Physical description and the measurement of other quality attributes is often important for the evaluation of the drug product functions. Examples of such tests include pH and osmolarity.

일부 특수 제형에는 위에서 언급한 시험 외에 추가 시험이 필요할 수 있음을 인식하여야 한다.

It should be recognized that certain unique dosage forms may need additional tests other than those mentioned above.

이 부록은 목적 제품, 원료의약품 및/또는 완제의약품의 구조 특성분석 및 확인과 물리화학적 특성 평가를 위해 고려할 수 있는 기술적 접근방법의 예를 제시한다. 실제 사용하는 구체적인 기술적 접근방법은 제품마다 다르며, 많은 경우 이 부록에 포함된 것 외의 대체 접근방법이 적절할 것이다. 새로운 분석 기술과 기존 기술의 개선이 계속 개발되고 있으며, 적절한 경우 이를 활용하여야 한다.

This appendix provides examples of technical approaches which might be considered for structural characterization and confirmation, and evaluation of physicochemical properties of the desired product, drug substance and/or drug product. The specific technical approach employed will vary from product to product and alternative approaches, other than those included in this appendix, will be appropriate in many cases. New analytical technology and modifications to existing technology are continuously being developed and should be utilized when appropriate.

목적 제품의 아미노산 서열은 b)~e) 항목에 기술된 것과 같은 접근방법을 사용하여 가능한 범위에서 결정한 후, 목적 제품의 유전자 서열로부터 추정한 아미노산 서열과 비교하여야 한다.

The amino acid sequence of the desired product should be determined to the extent possible using approaches such as those described in items b) through e) and then compared with the sequence of the amino acids deduced from the gene sequence of the desired product.

전체 아미노산 조성은 다양한 가수분해 및 분석 절차를 사용하여 결정하며, 필요하다고 판단되면 목적 제품의 유전자 서열로부터 추정한 아미노산 조성 또는 천연 대응물질의 아미노산 조성과 비교한다. 많은 경우 아미노산 조성 분석은 펩티드 및 작은 단백질에 대해 유용한 구조 정보를 제공하지만, 큰 단백질에 대해서는 일반적으로 그 자료의 결정력이 떨어진다. 정량적 아미노산 분석 자료는 많은 경우 단백질 함량을 측정하는 데에도 사용할 수 있다.

The overall amino acid composition is determined using various hydrolytic and analytical procedures, and compared with the amino acid composition deduced from the gene sequence for the desired product, or the natural counterpart, if considered necessary. In many cases amino acid composition analysis provides some useful structural information for peptides and small proteins, but such data are generally less definitive for large proteins. Quantitative amino acid analysis data can also be used to determine protein content in many cases.

말단 아미노산 분석은 아미노 말단 및 카르복시 말단 아미노산의 성질과 균질성을 확인하기 위하여 수행한다. 목적 제품이 말단 아미노산에 대하여 불균일한 것으로 확인되면, 적절한 분석절차를 사용하여 변이 형태의 상대적 양을 측정하여야 한다. 이러한 말단 아미노산의 서열은 목적 제품의 유전자 서열로부터 추정한 말단 아미노산 서열과 비교하여야 한다.

Terminal amino acid analysis is performed to identify the nature and homogeneity of the amino- and carboxy-terminal amino acids. If the desired product is found to be heterogeneous with respect to the terminal amino acids, the relative amounts of the variant forms should be determined using an appropriate analytical procedure. The sequence of these terminal amino acids should be compared with the terminal amino acid sequence deduced from the gene sequence of the desired product.

적절한 효소 또는 화학물질을 사용하여 제품을 개별 펩티드로 선택적으로 절단하고, 생성된 펩티드 단편을 HPLC 또는 그 밖의 적절한 분석절차로 분석한다. 펩티드 단편은 아미노산 조성 분석, N-말단 서열분석 또는 질량분석과 같은 기법을 사용하여 가능한 범위에서 확인하여야 한다. 적절히 밸리데이션된 절차를 사용한 원료의약품 또는 완제의약품의 펩티드 매핑은 로트 출하 목적으로 목적 제품의 구조를 확인하는 데 자주 사용되는 방법이다.

Selective fragmentation of the product into discrete peptides is performed using suitable enzymes or chemicals and the resulting peptide fragments are analyzed by HPLC or other appropriate analytical procedure. The peptide fragments should be identified to the extent possible using techniques such as amino acid compositional analysis, N-terminal sequencing, or mass spectrometry. Peptide mapping of the drug substance or drug product using an appropriately validated procedure is a method that is frequently used to confirm desired product structure for lot release purposes.

목적 제품의 유전자 서열에 근거하여 시스테인 잔기가 예상되는 경우, 유리 설프히드릴기 및/또는 이황화 결합의 수와 위치를 가능한 범위에서 결정하여야 한다. 이 평가에는 펩티드 매핑(환원 및 비환원 조건), 질량분석 또는 그 밖의 적절한 기법이 유용할 수 있다.

If, based on the gene sequence for the desired product, cysteine residues are expected, the number and positions of any free sulfhydryl groups and/or disulfide bridges should be determined, to the extent possible. Peptide mapping (under reducing and non-reducing conditions), mass spectrometry, or other appropriate techniques may be useful for this evaluation.

당단백질의 경우 탄수화물 함량(중성당, 아미노당 및 시알산)을 측정한다. 또한 탄수화물 사슬의 구조, 올리고당 양상(안테나 프로파일) 및 폴리펩티드 사슬의 당화 부위를 가능한 범위에서 분석한다.

For glycoproteins, the carbohydrate content (neutral sugars, amino sugars, and sialic acids) is determined. In addition, the structure of the carbohydrate chains, the oligosaccharide pattern (antennary profile) and the glycosylation site(s) of the polypeptide chain is analyzed, to the extent possible.

분자량(또는 크기)은 크기배제 크로마토그래피, SDS-폴리아크릴아미드 겔 전기영동(환원 및/또는 비환원 조건), 질량분석 및 그 밖의 적절한 기법을 사용하여 측정한다.

Molecular weight (or size) is determined using size exclusion chromatography, SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (under reducing and/or non-reducing conditions), mass spectrometry, and other appropriate techniques.

이는 등전점 전기영동 또는 그 밖의 적절한 기법으로 측정한다.

This is determined by isoelectric focusing or other appropriate techniques.

많은 경우 특정 자외선/가시광선 파장(예: 280 nm)에서 목적 제품의 흡광계수(또는 몰 흡광도)를 측정하는 것이 바람직하다. 흡광계수는 아미노산 조성 분석이나 질소 정량 등의 기법으로 단백질 함량을 알고 있는 제품 용액에 대해 자외선/가시광선 분광광도법을 사용하여 측정한다. 단백질 함량 측정에 자외선 흡광을 사용하는 경우, 해당 제품의 흡광계수를 사용하여야 한다.

In many cases it will be desirable to determine the extinction coefficient (or molar absorptivity) for the desired product at a particular UV/visible wavelength (e.g., 280 nm). The extinction coefficient is determined using UV/visible spectrophotometry on a solution of the product having a known protein content as determined by techniques such as amino acid compositional analysis, or nitrogen determination, etc. If UV absorption is used to measure protein content, the extinction coefficient for the particular product should be used.

전기영동 양상과 확인, 균질성 및 순도에 관한 자료는 폴리아크릴아미드 겔 전기영동, 등전점 전기영동, SDS-폴리아크릴아미드 겔 전기영동, 웨스턴 블롯, 모세관 전기영동 또는 그 밖의 적절한 절차로 얻을 수 있다.

Electrophoretic patterns and data on identity, homogeneity and purity can be obtained by polyacrylamide gel electrophoresis, isoelectric focusing, SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, Western-blot, capillary electrophoresis, or other suitable procedures.

크로마토그래피 양상과 확인, 균질성 및 순도에 관한 자료는 크기배제 크로마토그래피, 역상 액체 크로마토그래피, 이온교환 액체 크로마토그래피, 친화 크로마토그래피 또는 그 밖의 적절한 절차로 얻을 수 있다.

Chromatographic patterns and data on the identity, homogeneity, and purity can be obtained by size exclusion chromatography, reverse-phase liquid chromatography, ion-exchange liquid chromatography, affinity chromatography or other suitable procedures.

적절한 경우 자외선 및 가시광선 흡수 스펙트럼을 측정한다. 제품의 고차 구조는 적절한 경우 원편광 이색성, 핵자기공명(NMR) 또는 그 밖의 적절한 기법과 같은 절차를 사용하여 검사한다.

The ultraviolet and visible absorption spectra are determined as appropriate. The higher-order structure of the product is examined using procedures such as circular dichroism, nuclear magnetic resonance (NMR), or other suitable techniques, as appropriate.

이 부록은 잠재적 불순물, 그 유래, 그리고 검출을 위한 관련 분석 접근방법의 예를 열거한다. 물리화학적 특성분석의 경우와 마찬가지로, 구체적인 불순물과 사용하는 기술적 접근방법은 제품마다 다르며, 많은 경우 이 부록에 열거된 것 외의 대체 접근방법이 적절할 것이다. 새로운 분석 기술과 기존 기술의 개선이 계속 개발되고 있으며, 적절한 경우 이를 적용하여야 한다.

This appendix lists potential impurities, their sources and examples of relevant analytical approaches for detection. Specific impurities and technical approaches employed, as in the case of physicochemical characterization, will vary from product to product and alternative approaches, other than those listed in this appendix will be appropriate in many cases. New analytical technology and modifications to existing technology are continuously being developed, and should be applied when appropriate.

이들은 제조 공정에서 유래하며(2.1.4항), 세포기질 유래, 세포배양 유래 및 다운스트림 유래의 세 가지 주요 범주로 분류된다.

These are derived from the manufacturing process (section 2.1.4) and are classified into three major categories: cell substrate-derived, cell culture-derived and downstream-derived.

의도적으로 도입된 바이러스, 내재성 바이러스 및 외래성 바이러스에 대해서는, ICH 조화 3자 가이드라인 "사람 또는 동물 유래 세포주에서 유래한 생명공학의약품의 바이러스 안전성 평가"에 기술된 바에 따라 제조 공정의 바이러스 제거 및/또는 불활화 능력을 입증하여야 한다.

For intentionally introduced, endogenous and adventitious viruses, the ability of the manufacturing process to remove and/or inactivate viruses should be demonstrated as described in ICH Harmonised Tripartite Guideline “Viral Safety Evaluation of Biotechnology Products Derived From Cell Lines of Human or Animal Origin”

다음은 가장 흔히 접하는 목적 제품의 분자 변이체와 그 평가를 위한 관련 기술을 열거한 것이다. 이러한 변이체는 변형 유형을 확인하기 위하여 분리 및 특성분석에 상당한 노력이 필요할 수 있다. 제조 및/또는 보관 중 상당량 생기는 분해산물은 시험하고, 적절히 설정된 허용기준에 대하여 모니터링하여야 한다.

The following represents the most frequently encountered molecular variants of the desired product and lists relevant technology for their assessment. Such variants may need considerable effort in isolation and characterization in order to identify the type of modification(s). Degradation products arising during manufacture and/or storage in significant amounts should be tested for and monitored against appropriately established acceptance criteria.