ICH M12 가이드라인의 이행을 돕기 위하여 ICH M12 전문가작업반(Expert Working Group)은 일련의 Q&A를 작성하였다.

In order to facilitate the implementation of the ICH M12 Guideline, the ICH M12 Expert Working Group has developed a series of Q&As:

ICH M12 의견수렴 기간에 제기된 질문에 대응하여, 가이드라인에서 다루는 약물상호작용 평가 관련 개념 일부를 명확히 하기 위한 여러 질의응답(Questions and Answers)을 마련하였다.

In response to questions posted to ICH M12 comment period, several Questions and Answers have been developed to provide clarity around some of the concepts related to evaluation of drug interaction covered in the Guideline.

이 질의응답(Q&A) 문서는 추가적인 명확화를 제공하고 약물상호작용 평가의 조화를 개선하기 위한 것이다.

This Question and Answer (Q&A) document is intended to provide additional clarification and improve harmonization of drug interaction assessment.

이 Q&A 문서의 범위와 구성은 ICH M12를 따른다.

The scope and organization of this Q&A document follow that of ICH M12.

3상 시험을 시작하기 전에 물질수지 시험 결과를 확보하는 것이 일반적으로 권장된다는 기술과 관련하여, 약물상호작용(drug-drug interaction, DDI) 평가를 위한 물질수지 시험 시기에 관해 보다 구체적인 권고를 제시하여 주기 바란다.

With regard to the statement that the results of the mass balance study are generally recommended to be available before starting phase 3 study, please provide more specific recommendations on the timing of mass balance study for DDI evaluation.

물질수지 시험은 시험약의 주요 소실 경로를 확인하는 데 유용하다. 이 가이드라인에는 물질수지 시험과 시험관내 시험에서 얻은 약물의 약동학적 프로파일에 근거하여 추가 DDI 평가 전략을 검토하는 일반적인 시나리오가 제시되어 있다. 임상 DDI 시험은 물질수지 시험에서 추가 정보를 얻기 전에 시험관내 시험 정보에 근거하여 수행할 수 있다. 이 가이드라인은 DDI 평가를 위한 물질수지 시험 시기를 제한하려는 것이 아니며, 본문에 언급된 바와 같이 시험약의 특성에 따라 유연성이 보장되어야 한다.

The mass balance study is useful for confirming the principal elimination routes of the investigational drug. In this guideline, a general scenario is shown in which strategies for further DDI assessment are considered based on the pharmacokinetic profile of the drug obtained in the mass balance study and in vitro studies. Clinical DDI studies can be conducted based on information from in vitro studies prior to obtaining additional information from mass balance study. This guideline does not intend to restrict the timing of mass balance study for DDI evaluation, and flexibility should be ensured according to the characteristics of the investigational drug, as mentioned in the text.

시험관내 대사 평가(기질 평가 및 저해 평가)에는 여러 공여자의 마이크로솜과 간세포를 풀링(pooling)하여 사용하는 것이 권장된다. 어떤 목적에서 단일 공여자의 자료가 허용되는가?

It is recommended to pool microsomes and hepatocytes from multiple donors for in vitro metabolism evaluations (substrate and inhibition evaluations). For what purposes would data from a single donor be acceptable?

일반적으로 전체 인구집단의 대사효소 발현을 더 잘 대표하기 위하여, 시험관내 대사 평가(기질 평가 및 저해 평가)에는 여러 공여자의 마이크로솜과 간세포를 풀링하여 사용하는 것이 권장된다.

In general, it is recommended to pool microsomes and hepatocytes from multiple donors for in vitro metabolism evaluations (substrate and inhibition evaluations) in order to have a better representation of expression of the metabolizing enzymes for the entire population.

단일 공여자 배치는 기전 시험(예: 다형성이 시험관내 대사에 미치는 영향 평가)에 사용할 수 있다. 이러한 단일 배치 간세포 또는 마이크로솜의 대사효소 활성은 프로브 기질을 사용하여 충분히 특성분석하여야 한다.

Single donor batches may be used for mechanistic studies (e.g., to evaluate the impact of polymorphisms on the in vitro metabolism). Activities of metabolic enzymes of this single batch of hepatocytes or microsomes should be well characterized by using probe substrates.

시험약의 시험관내 유도 가능성이 2배 미만이면 생체내 유도 가능성을 항상 배제할 수 있는가?

Can in vivo induction potential always be ruled out when the in vitro induction potential of the investigational drug is < 2-fold?

양성대조의 반응이 6배 이상인 조건에서, 컷오프 농도 이상의 시험약으로 배양하였을 때 mRNA가 증가하지 않거나 2배 미만으로 증가하면 해당 시험관내 유도 시험은 효소 유도에 대해 음성으로 간주한다.

An in vitro induction study is considered negative for enzyme induction if the incubations with the investigational drug at the cut-off concentrations or higher give rise to no increase or less than 2-fold increase in mRNA provided that the response of the positive control is ≥ 6-fold.

그러나 일부 효소(예: CYP2C8, CYP2C9, CYP2C19(때로는 CYP2B6))는 유도성이 낮아 양성대조에 의한 mRNA 증가가 보통 6배 미만이다. 이러한 경우, CYP 효소 mRNA를 용매대조 대비 2배 미만이지만 양성대조 반응의 20%를 초과하여 증가시키고 농도 의존적 관계를 보이는 시험약은 유도 가능성을 배제할 수 없다.

However, some enzymes (e.g., CYP2C8, CYP2C9, CYP2C19 (sometimes CYP2B6)) are less inducible, and the increase in mRNA by the positive control is usually <6-fold. In such a case, the induction potential cannot be ruled out for an investigational drug that increases CYP enzyme mRNA less than 2-fold of the vehicle control but more than 20% of the response of the positive control, along with a concentration-dependent relationship.

유도를 배제할 수 없는 예 1: 시험약이 mRNA를 용량 의존적으로 증가시켰으나 최대 증가가 1.8배이고 양성대조가 mRNA를 3배 증가시킨 경우, 시험약의 유도 가능성은 양성대조의 40%이다(40% = (1.8 mRNA fold increase – 1)/(3 mRNA fold increase positive control - 1)*100%). 시험약의 유도 반응이 2배 미만이더라도 양성대조 반응의 20%를 초과하므로 추가 평가가 권장된다.

Example 1 where induction cannot be ruled out: the investigational drug increased mRNA dose dependently but maximal increase of 1.8-fold and the positive control increased mRNA 3-fold, the induction potential of the investigational drug is 40% that of the positive control (40% = (1.8 mRNA fold increase – 1)/(3 mRNA fold increase positive control - 1)*100%). Even though the induction response of the drug is < 2-fold, it is > 20% of the response of the positive control; therefore, further evaluation is recommended.

유도 가능성이 낮은 예 2: 시험약이 mRNA를 용량 의존적으로 증가시켰으나 최대 증가가 1.8배이고 양성대조가 mRNA를 5.1배 증가시킨 경우, 시험약의 유도 가능성은 양성대조의 19.5%이다(19.5% = 1.8 mRNA fold increase – 1)/(5.1 mRNA fold increase positive control - 1)*100%). 이 경우 시험약의 유도 반응이 2배 미만이고 양성대조 반응의 20% 미만이므로 추가 조사가 필요하지 않다. 따라서 생체내 유도 가능성은 낮다.

Example 2 where induction is unlikely: the investigational drug increased mRNA dose dependently but maximal increase of 1.8-fold and the positive control increased mRNA 5.1-fold, the induction potential of the investigational drug is 19.5% of that of the positive control (19.5% = 1.8 mRNA fold increase – 1)/(5.1 mRNA fold increase positive control - 1)*100%). In this case, no further investigation is needed because the induction response of the drug is < 2-fold, and it is < 20% of the response of the positive control. Therefore, the likelihood of induction in vivo is low.

미변화체와 대사체 간 극성 비교가 DDI 유발약물(precipitant)로서 대사체를 선정하는 기준이 아닌 이유는 무엇인가?

Why is comparison of polarity between unchanged drug and metabolites not a selection criterium for the metabolite as DDI precipitant?

대사체는 흔히 미변화체보다 극성이 크다. 그러나 최근 문헌 보고에 따르면 일부 대사체와 모약물 간 극성과 저해 강도 사이에 뚜렷한 관계가 없다(Steinbronn et al., 2021 CPT, 110:452-463). 따라서 극성은 DDI 유발약물로서 대사체를 선정하는 기준에 포함되지 않는다.

Metabolites are often more polar than the unchanged drug. However, a recent literature report suggests no clear relationship between the polarity of some metabolites versus parent drug and inhibition potency (Steinbronn et al., 2021 CPT, 110:452-463). Hence, polarity is not included as a selection criterium for the metabolite as a DDI precipitant.

표 1에 열거되지 않은 수송체의 유발약물로서 약물에 대한 컷오프 값은 무엇인가?

What are the cut-off values for drugs as precipitant of transporters that are not listed in Table 1?

표 1에 열거된 수송체에 대해서는 시험관내-생체내 외삽(in vitro-to-in vivo extrapolation, IVIVE) 분석에 근거하여 컷오프 값이 제안되었으나, 그 밖의 수송체(예: OCT1, MRP2)에 대해서는 IVIVE 기준이 확립되지 않았다. 수송체의 기관 및 세포 내 위치는 수송체 부위에서의 저해제 농도의 관련성을 이해하는 데 중요한 요인이다. 따라서 표 1에 열거되지 않은 수송체의 컷오프 값은 수송체의 기관 및 세포 내 위치의 유사성을 고려하여 표 1에 열거된 수송체의 컷오프 값으로부터 추론할 수 있다.

For the transporters listed in Table 1, cut-off values have been proposed based on in vitro-to-in vivo extrapolation (IVIVE) analyses; however, no IVIVE criteria has been established for other transporters (e.g., OCT1, MRP2). The organ and the cellular localization of a transporter are important factors for understanding the relevance of inhibitor concentrations at the site of the transporter. Therefore, cut-off values for transporters that are not listed in Table 1 may be deduced from the cut-off values from transporters listed in Table 1 when the similarity in organ and the cellular localization of the transporter are taken into consideration.

시험약이 피임 스테로이드에 미치는 영향을 확인하기 위한 DDI 평가에서 고유하게 고려할 사항은 무엇인가?

What are the unique considerations regarding DDI evaluations for determining the effect of an investigational drug on contraceptive steroids?

ICH M12에 기술된 과학적 원칙은 시험약이 피임 스테로이드에 미치는 영향에 대한 약물상호작용 평가에 일반적으로 적용할 수 있다. 그러나 기형유발 가능성이 있는 약물을 가임 여성에게 사용하려는 경우에는 피임 스테로이드와의 DDI 위험을 고려하여야 한다. 자세한 내용은 해당하는 지역 가이드라인이 있으면 이를 참조하거나 관련 규제당국에 문의한다.

The scientific principles described in ICH M12 are generally applicable for the drug interaction evaluation of the effect of an investigational drug on contraceptive steroids. However, the risk of a DDI with contraceptive steroids for drugs that have teratogenic potential should be considered if the drug is intended for use in women of childbearing potential. For more information, refer to regional guidance where available or contact the relevant regulatory authorities.

DDI 시험의 대상자 수는 어떻게 정하는가?

How is the number of subjects determined for DDI studies?

가이드라인에 명시된 바와 같이, DDI 시험에 포함되는 대상자 수는 잠재적 상호작용의 크기와 변동성을 신뢰성 있게 추정하기에 충분하여야 한다. 표본 크기를 정할 때 고려할 요인으로는 예상 변동성, 예상되는 상호작용의 크기, 자료의 활용 방식(예: 상호작용 배제, 상호작용 정량, 용량 조절 뒷받침)이 있다. 일반적으로 임상 DDI 시험에는 약 12-20명의 대상자가 포함되지만, 예를 들어 변동성이 크거나 시험의 특정 목적에 따라 더 큰 규모의 시험이 필요할 수 있다.

As stated in the guideline, the number of subjects included in a DDI study should be sufficient to provide a reliable estimate of the magnitude and variability of a potential interaction. When determining the sample size, factors to consider include the expected variability, the anticipated magnitude of the interaction, and how the data will be used (e.g., to rule out an interaction, to quantify an interaction, to support a dose adjustment). Typically, a clinical DDI study includes around 12-20 subjects, but larger studies may be needed, for example, when variability is high or based on the specific objectives of the study.

시험관내 유도 시험에서 간세포와의 배양 마지막 날에 배지 중 모약물 농도를 측정하도록 의뢰자에게 권장하는 이유는 무엇인가?

Why are sponsors encouraged to measure concentrations of the parent drug in the medium on the last day of incubation with hepatocytes for in vitro induction studies?

배양 배지 중 시험약 농도가 명목 농도보다 낮으면 유도 강도가 과소평가될 수 있다. 농도 감소의 잠재적 원인을 논의하여야 한다.

The induction potency might be underestimated when the concentration of the investigational drug is lower in the incubation medium than the nominal concentration. Potential causes for the reduced concentrations should be discussed.

광범위하게 대사되거나 수송되는 약물은 간세포에 흡수되거나 대사되므로 배지 중 농도가 낮을 것으로 예상할 수 있다. 이러한 경우 시간 경과에 따른 약물 농도 감소가 예상된다. 이는 생체내 상황을 반영하는 것이므로 배지 중 농도 저하를 보정할 필요는 없다. 농도 저하는 배지 중 약물의 불안정성 때문일 수도 있다. 이러한 경우에는 간세포가 없는 배지에서도 농도 감소가 일어날 것으로 예상된다. 불안정성에 대한 보정이나 더 잦은 배지 교체를 고려하여야 한다. 다른 시험관내 시험과 마찬가지로, 약물의 재료 또는 세포에 대한 비특이적 결합과 침전도 배지 중 약물의 비결합 농도가 명목 농도보다 낮은 원인이 될 수 있다. 특히 단백결합률이 높은 약물에서 이러한 상황이 문제가 될 수 있다.

For drugs that are extensively metabolized or transported, a lower concentration in the medium can be expected because the drug is taken up by the hepatocytes and/or metabolized. In such a case, a decrease in drug concentration over time is expected. Since this is reflecting the in vivo situation, no correction for the lower medium concentration is necessary. Lower concentrations could also be due to instability of the drug in the medium. In such case, a decrease in concentration is also expected to occur in medium without hepatocytes. Correction for instability or more frequent refreshment of the medium should be considered. As for other in vitro assays, non-specific binding of the drug to materials or cells and precipitation could also be reasons for a lower unbound concentration of the drug in the medium than the nominal concentration. Especially for highly protein bound drugs, this scenario could be an issue.

의뢰자는 이러한 불일치가 자료 해석에 미칠 수 있는 영향을 논의하고, 대사/수송 이외의 이러한 교란요인을 보정하여야 한다.

Sponsors should discuss the potential impact of the discrepancy on data interpretation and correct for these non-metabolism/transporter confounders.

시험관내 실험에서 약물 회수율의 특성분석이 중요하다고 보는 이유는 무엇인가?

Why is characterization of drug recovery considered important for in vitro experiments?

시험관내 실험에서 바람직한 관행에는 시험계 내 시험약의 회수율을 평가하고 배양 용액 중 시험약의 비결합 농도를 측정하거나 계산하는 것이 포함된다. K_i,u 또는 IC_50,u 결정과 같은 정량적 목적에는 높은 회수율이 바람직하다. 반면 정성적 목적(예: 기질 여부)에서는 회수율이 낮더라도 결론적인 답을 얻는 데 지장이 없을 수 있다.

For in vitro experiments, good practices include evaluating the recovery of the investigational drug in the test system and measuring or calculating the unbound investigational drug concentration in the incubation solution. For quantitative objectives such as determination of K_i,u or IC_50,u, a high recovery is desirable. On the other hand, for qualitative purposes (e.g., substrate yes/no), a lower recovery may not preclude a conclusive answer.

회수율 감소를 초래하는 영향의 성질과 정도를 조사하여야 한다. 다음 요인을 고려하여야 한다.

The nature and extent of the effects leading to a decrease of recovery should be investigated. The following factors should be considered:

이러한 불일치가 자료 해석에 미칠 수 있는 영향을 논의하여야 한다.

The potential impact of the discrepancy on data interpretation should be discussed.