이 가이던스는 이 주제에 관한 FDA(Food and Drug Administration, FDA 또는 Agency)의 현재 견해를 나타낸다. 이 가이던스는 누구에게도 어떠한 권리를 설정하지 않으며, FDA나 일반 대중을 구속하지 않는다. 적용 법률과 규정의 요건을 충족한다면 다른 접근 방법을 사용할 수 있다. 다른 접근 방법을 논의하려면 표지에 적힌 이 가이던스 담당 FDA 직원에게 연락한다.

This guidance represents the current thinking of the Food and Drug Administration (FDA or Agency) on this topic. It does not establish any rights for any person and is not binding on FDA or the public. You can use an alternative approach if it satisfies the requirements of the applicable statutes and regulations. To discuss an alternative approach, contact the FDA staff responsible for this guidance as listed on the title page.

FDA는 임상시험계획(IND) 의뢰자인 여러분에게 초기 단계 임상시험에 쓰이는 유전자치료용 미생물 벡터(microbial vectors used for gene therapy, MVGT)의 IND 제출에 관한 권고사항을 제공한다. MVGT가 사람의 질병이나 상태의 예방, 치료 또는 완치에 적용되는 경우, MVGT는 공중보건법(PHS Act) 351(i)항(42 U.S.C. 262)의 "생물의약품(biological product)" 정의에 해당한다. 이 가이던스는 MVGT의 IND에 제출하여야 하는 화학·제조·품질관리(CMC) 정보에 중점을 두며, 이러한 제품의 비임상·임상 고려사항을 개략적으로 제시한다.

We, FDA, are providing you, investigational new drug application (IND) sponsors, with recommendations concerning IND submissions for microbial vectors used for gene therapy (MVGTs) in early-phase clinical trials. MVGTs meet the definition of “biological product” in section 351(i) of the Public Health Service (PHS) Act (42 U.S.C. 262), when such products are applicable to the prevention, treatment, or cure of a disease or condition of human beings. This guidance focuses on the chemistry, manufacturing, and control (CMC) information that you should submit in an IND for MVGTs and provides an overview of preclinical and clinical considerations for these products.

이 가이던스는 2015년 10월자 같은 제목의 가이던스 초안을 최종 확정한 것이며, 2008년 4월자 가이던스 "Guidance for FDA Reviewers and Sponsors: Content and Review of Chemistry, Manufacturing, and Control (CMC) Information for Human Gene Therapy Investigational New Drug Applications (INDs)"(참고문헌 1)를 보완한다.

This guidance finalizes the draft guidance of the same title dated October 2015 and supplements the guidance entitled, “Guidance for FDA Reviewers and Sponsors: Content and Review of Chemistry, Manufacturing, and Control (CMC) Information for Human Gene Therapy Investigational New Drug Applications (INDs),” dated April 2008 (Ref. 1).

이 가이던스를 포함한 FDA 가이던스 문서는 법적으로 강제할 수 있는 책임을 설정하지 않는다. 가이던스는 특정 주제에 관한 FDA의 현재 견해를 기술하며, 특정 규정이나 법률상 요건이 인용된 경우가 아니면 권고사항으로만 보아야 한다. FDA 가이던스에서 should라는 단어는 무언가를 제안하거나 권고한다는 의미이며, 요구한다는 의미는 아니다.

FDA’s guidance documents, including this guidance, do not establish legally enforceable responsibilities. Instead, guidances describe the FDA’s current thinking on a topic and should be viewed only as recommendations, unless specific regulatory or statutory requirements are cited. The use of the word should in FDA’s guidances means that something is suggested or recommended, but not required.

MVGT에는 사람 종양 항원, 사이토카인, 성장인자, 효소, 치료용 단백질 또는 뉴클레오타이드를 발현하도록 유전적으로 변형된 Salmonella, Listeria 또는 E. coli 같은 세균 벡터가 포함된다. 예를 들어, 세균 벡터는 사람 종양 항원, 사이토카인, 성장인자, 효소, 치료용 단백질 또는 뉴클레오타이드를 발현하도록 변형될 수 있다. MVGT는 또한 염색체 유전자나 에피솜 유전자의 변형(결실, 절단 또는 점돌연변이), 외래 유전물질을 염색체나 자연적으로 존재하는 에피솜에 삽입하는 방법, 또는 하나 이상의 플라스미드를 도입하는 방법으로 만들 수 있다. MVGT의 치료 프로파일을 바꿀 수 있는 유전적 변형 외에도, MVGT는 성장 특성을 바꾸도록 변형될 수도 있다.

MVGTs include bacterial vectors such as Salmonella, Listeria, or E. coli genetically modified to express human tumor antigens, cytokines, growth factors, enzymes, therapeutic proteins, or nucleotides. For example, the bacterial vectors may be modified to express human tumor antigens, cytokines, growth factors, enzymes, therapeutic proteins, or nucleotides. MVGTs may also be generated by the modification (deletion, truncation, or point mutation) of chromosomal or episomal genes and by the insertion of foreign genetic material into the chromosome, or into naturally occurring episomes; or by the introduction of one or more plasmids. In addition to the genetic modifications that may alter an MVGT’s therapeutic profile, MVGTs may also be modified to alter their growth characteristics.

예를 들어, MVGT는 살아 있거나, 죽었거나, 특정 생화학적 요구조건이나 유전적 변형의 결과로 복제가 제한된 것일 수 있다.

For example, MVGTs may be live, dead or replication restricted as a result of specific biochemical requirements or genetic modification.

유전자치료제는 2006년 11월자 FDA 가이던스 문서 "Guidance for Industry: Gene Therapy Clinical Trials – Observing Subjects for Delayed Adverse Events"에서 "전달된 유전물질의 전사 및/또는 번역에 의해, 그리고/또는 숙주 유전체에 통합됨으로써 효과를 나타내며, 핵산, 바이러스 또는 유전자 조작 미생물로 투여되는 제품"으로 정의되어 있다. "이 제품은 생체내에서 세포를 변형하는 데 사용되거나, 투여 전에 생체외에서 세포로 전달될 수 있다."(참고문헌 2)

Gene therapies are defined in the FDA guidance document entitled, “Guidance for Industry: Gene Therapy Clinical Trials – Observing Subjects for Delayed Adverse Events” dated November 2006 as “[p]roducts that mediate their effects by transcription and/or translation of transferred genetic material and/or by integrating into the host genome and that are administered as nucleic acids, viruses, or genetically engineered microorganisms. The products may be used to modify cells in vivo or transferred to cells ex vivo prior to administration to the recipient.” (Ref. 2)

21 CFR 312.23(a)(7)(i)에 따라, 여러분은 IND에서 다루는 해당 임상시험에 적절한 범위로, 원료의약품과 완제의약품의 화학·제조·품질관리를 기술한 항을 IND에 제출하여야 한다. 또한 § 312.23(a)(7)(iv)(b)에 따라, 제품 제조에 사용된 모든 구성요소의 목록을 제출자료에 포함하여야 한다. 아울러 § 312.23(a)(11)에 따라, FDA가 요청하면 신청 심사에 필요한 그 밖의 관련 정보를 제출하여야 한다.

Under § 312.23(a)(7)(i) (21 CFR 312.23(a)(7)(i)), you must, in your IND, as appropriate for the particular investigations covered by the IND, submit a section describing the chemistry, manufacturing and control of the drug substance and the drug product. Under § 312.23(a)(7)(iv)(b), you must also include in your submission a list of all components used in the manufacturing of your product. In addition, under § 312.23(a)(11), if requested by FDA, you are required to submit any other relevant information needed for review of the application.

이러한 규정에 따라, 그리고 이어지는 항에서 설명하는 바와 같이, FDA는 IND 제출자료에 MVGT 제조공정 전체를 상세히 기술할 것을 권장한다. 또한 미생물 벡터, 미생물 세포은행 시스템, 미생물 세포가 보유한 플라스미드/파지, 제조에 사용된 시약, 모든 첨가제 등 MVGT 제품 제조 중에 사용된 모든 구성요소를 기술하여야 한다. 아울러 제조공정 중에 사용된 모든 절차를 기술하여야 한다. 이 정보를 바탕으로 FDA는 제품의 확인, 품질, 순도 및 역가를 평가할 수 있다.¹

In accordance with these regulations, and as described in the following sections, we recommend that you provide a detailed description of the complete MVGT manufacturing process in your IND submission. You should also describe all of the components used during the manufacture of the MVGT product, such as microbial vector, microbial cell bank systems, plasmid(s)/phage(s) harbored by the microbial cells, reagents used in the manufacture, and any excipients. In addition, you should describe all procedures used during the manufacturing process. This information will allow FDA to assess¹ the identity, quality, purity, and potency of your product.

IND에는 미생물 제품에 관한 다음 정보를 제공하여야 한다.

You should provide the following information about your microbial product in the IND:

다음을 포함한 MVGT의 이력과 상세한 유래에 대한 기술

A description of the history and detailed derivation of the MVGT including:

MVGT의 이력, 출처 및 유래에 대한 기술을 포함하여야 한다. MVGT 시드 스톡은 잘 분리된 단일 집락으로부터 유래하여야 한다. 베타 락타마제와 같은 항생제 선택 표지가 MVGT 증식 목적으로 MVGT에 도입되지 않도록 하여야 한다. MVGT의 약독화는 중복적이고 견고한 방법으로 이루어져야 하며, 이는 MVGT 유전체의 한 곳 이상에서의 돌연변이와 점돌연변이 이상의 변이로 달성할 수 있다.

You should include a description of the history, source, and derivation of the MVGT. The MVGT seed stock should be derived from a single, well-isolated colony. You should ensure that antibiotic selection markers, such as beta lactamase, are not introduced into the MVGT for the purpose of propagation of the MVGT. Attenuation of MVGT should be through redundant and robust means, which may be achieved by mutation at more than one site on the MVGT genome and by more than a point mutation.

IND 제출자료에는 현미경하의 형태, 집락 형태, 그람 염색이나 항산 염색의 수용 능력을 포함한 염색 성질 등 해당 균의 물리적 성질을 기술하여야 한다(염색은 대수증식기의 세균 배양물로 실시하여야 한다). 성장 특성에는 최적 성장조건에서의 분열시간과, 세균 운동성 평가 등 해당 균의 성장을 평가하는 데 사용되는 특이적 특성이 포함된다.

The IND submission should describe the physical properties of the organism, such as shape under a microscope, colony morphology, and staining properties including their ability to take up gram stain or acid fast staining (staining should be done on a bacterial culture in a log-phase growth). Growth characteristics include dividing time under optimal growth conditions, and any specific characteristics of the organism used to evaluate its growth such as an evaluation of bacterial motility.

MVGT의 염색체 유전표지와 구별되는 유전체 제한효소 절단 양상에 관한 정보를 제공하여야 한다. MVGT가 자연적으로 존재하는 플라스미드를 포함하는 경우, 해당 플라스미드에 대한 기술과 마스터세포은행(MCB) 및 최종 제품에서 그 플라스미드의 존재를 시험하는 방법을 포함하여야 한다. MVGT의 선택 표지/선택 방법을 기술하여야 한다.

You should provide information regarding the MVGT’s chromosomal genetic marker(s) and distinguishing genomic restriction pattern(s). If the MVGT contains a naturally occurring plasmid(s), you should include a description of the plasmid(s), and a method to assay for the presence of the plasmid(s) in the Master Cell Bank (MCB) and final product. You should describe the MVGT’s selection markers/selection method.

IND에는 배지 조성, 성장 보충물, 항생제, 성장 온도 요구조건, 통기/생물반응기/혐기 요구조건 등 성장 배지와 성장 조건에 대한 기술을 포함하여야 한다.

The IND should include a description of the growth media and growth conditions, such as media composition, growth supplements, antibiotics, growth temperature requirements, and aeration/bioreactor/anaerobic requirements.

MVGT가 플라스미드 벡터를 포함하는 경우, 플라스미드 벡터를 모세포에 도입하여 MVGT를 확립하는 데 사용된 방법을 기술하여야 한다(예: 중간 세균 "전달" 균주의 사용, 그리고/또는 전기천공, 형질전환, 접합 등의 기법 사용). 아울러 IND 자료에 MVGT 클론의 유래에 관한 다음 정보를 제공하여야 한다.

If the MVGT contains a plasmid vector, you should describe the method used to introduce the plasmid vector into the parental cells to establish the MVGT (e.g., use of an intermediate bacterial “transfer” strain, and/or the use of techniques such as electroporation, transformation, conjugation, etc.). In addition, you should provide the following information on the derivation of the MVGT clone in your IND package:

외래 유전자를 염색체에 삽입하는 데 사용된 방법을 상세히 기술하여야 한다. FDA는 염색체에 통합된 유전자 삽입물을 가진 최종 클론의 유래를 보여주는 흐름도를 제공하고, 최종 클론의 유래 과정에서 만들어진 중간 클론을 본문에 기술할 것을 권장한다.

You should provide a detailed description of the methods used to insert foreign genes into the chromosome. We recommend that you provide a flow chart of the derivation of the final clone containing a chromosomally integrated gene insert, and describe in the text any intermediate clones that were generated in the process of derivation of the final clone.

IND에는 아래에 기술한 바와 같이 미생물 세포은행 시스템(즉, 마스터세포은행, 제조용세포은행)에 관한 정보를 포함하여야 한다.

The IND should contain information, as described below, on the microbial cell bank system (i.e., master cell bank, working cell bank).

IND에는 세포의 안전성, 확인, 순도 및 안정성을 충분히 확립하기 위한 시험을 포함하여 MCB 특성분석에 관한 정보를 포함하여야 한다. 해당 정보는 다음 사항을 다루어야 한다.

Your IND should include information regarding MCB characterization, including testing to adequately establish the safety, identity, purity, and stability of the cells. The information should address the following:

WCB의 특성분석을 문서화하는 데 필요한 정보의 양은 일반적으로 MCB의 특성분석을 문서화하는 데 필요한 양보다 적다. 2단계 세포은행 시스템을 갖추고 있는 경우, FDA는 WCB에 대하여 다음 항목을 시험할 것을 권장한다.

The amount of information needed to document characterization of the WCB is usually less extensive than that needed to document characterization of the MCB. If there is a two tiered cell bank system in place, we recommend that you test the WCB for:

제품 제조에 사용된 모든 시약을 IND에 기재하여야 한다(§ 312.23(a)(7)(iv)(b)). 이 가이던스에서 시약은 세균 성장, 선택, 정제 또는 그 밖의 핵심 제조 단계에 필수적이지만 최종 제품의 일부가 되도록 의도되지 않은 구성요소를 말한다. 시약은 특히 외래성 인자를 유입시킴으로써 최종 제품의 안전성, 역가 및 순도에 영향을 줄 수 있다. 시약의 예로는 배지와 배지 성분, 항생제, 유전자 발현 유도물질이 있다. 시약 목록 외에 다음 정보를 IND에 제출하여야 한다.

You must list in your IND any reagents used in manufacturing the product (§ 312.23(a)(7)(iv)(b)). For the purpose of this guidance, reagents are those components that are essential for bacterial growth, selection, purification, or other critical manufacturing steps, but are not intended to be part of the final product. Reagents can affect the safety, potency, and purity of the final product, especially by introducing adventitious agents. Examples of reagents include media and media components, antibiotics, and gene expression inducing agents. In addition to the list of reagents, the following information should be submitted in your IND:

MVGT 제조에 사용된 각 시약에 대하여 다음 정보를 제출하여야 한다.

For each reagent used in the manufacture of the MVGT, the following information should be submitted:

시약 공급업체가 제공한 COA를 로트마다 검토하여야 한다. MVGT 제조에 사용되는 시약의 안전성과 품질을 보증하기 위해 추가 시험이 필요할 수 있다. FDA는 안전성 시험(순도, 엔도톡신, 마이코플라스마, 외래성 인자), 기능 분석, 유해 가능 물질의 부재를 입증하는 시험(예: 잔류용매 시험)을 포함하는 적격성 평가 프로그램을 수립할 것을 권장한다. FDA는 적절한 시험의 범위가 해당 시약이 제조공정에서 어떻게 사용되는지에 따라 달라진다고 본다.

The COA provided by the vendor of the reagent should be reviewed for each lot. Additional testing may be needed to help ensure the safety and quality of the reagent for use in the manufacture of your MVGT. We recommend that you establish a qualification program that includes safety testing (purity, endotoxin, mycoplasma, and adventitious agents), functional analysis, and assays to demonstrate the absence of potentially harmful substances (e.g., residual solvent testing). We believe that the appropriate extent of testing will depend on how the specific reagent is used in the manufacturing process.

알려진 독성이나 잠재적 독성이 있는 잔류 제조 시약에 대하여 완제의약품을 시험하여야 한다. IND에는 최종 제품에서 이러한 시약의 잔류 수준을 검출하는 데 사용된 시험 절차를 기술하여야 한다. FDA는 그 제거를 문서화하는 데 적격성 평가 연구로 충분한지, 아니면 임상시험 개시 전에 로트 출하시험이 적절한지를 판단할 것을 권장한다.

You should test the drug product for residual manufacturing reagents with known or potential toxicities. The IND should describe the test procedures used to detect residual levels of these reagents in the final product. We recommend that you determine whether a qualification study is sufficient to document their removal, or whether lot release testing is appropriate prior to initiation of clinical trials.

FDA는 세균 선택을 위해 항생제를 사용하지 않을 것을 권장한다. 특히, 페니실린과 같은 베타락탐계 항생제는 사람용 치료제의 제조 중에 사용하지 않아야 한다. 항생제를 사용하는 경우, FDA는 최종 제품에 존재하는 잔류 항생제의 양을 정량하고 과민반응을 방지하기 위한 주의사항을 기술할 것을 권장한다.

We recommend that you not use antibiotics for bacterial selection. Specifically, beta-lactam antibiotics such as penicillin should not be used during the manufacturing of a therapeutic product for humans. If antibiotics are used, we recommend that you quantitate the amount of residual antibiotics present in the final product and describe precautions to prevent hypersensitivity reactions.

IND에는 MVGT 제품의 유래, 생산 및 정제 중에 사용된 모든 절차를 상세히 기술하여 포함하여야 한다. FDA는 생산·정제 공정과 공정 중 시험 및 최종 제품 시험의 개요도를 포함하면 이러한 정보를 더 명확하게 제시하는 데 도움이 된다고 본다.

You should include in the IND a detailed description of all procedures used during the derivation, production, and purification of an MVGT product. We believe that inclusion of a schematic of the production and purification process, and in-process and final product testing, will help to provide this information more clearly.

다음을 포함하여 MVGT 생산 중에 사용된 절차를 기술하여야 한다.

You should describe the procedures used during the production of the MVGT, including:

최종 제품이 불활화/사멸 MVGT인 경우, 세포 불활화/사멸의 방법과 조건을 기술하여야 한다. IND에는 또한 해당 세균이 복제 능력을 상실하였으나 불활화 후에도 의도한 특성을 유지함을 입증하는 자료를 포함하여야 한다. 세포 사멸은 MVGT 제품 제조에 사용된 배지와 성장 조건을 포함하는 무균시험과 § 610.12에 규정된 무균시험으로 평가하여야 한다.

If the final product is an inactivated/killed MVGT, you should describe the method and conditions of cell inactivation/killing. The IND should also include data to demonstrate that the bacteria are rendered replication incompetent, but still maintain their desired characteristics after inactivation. You should evaluate cell killing by sterility assays that include media and growth conditions used in the manufacture of the MVGT product and by sterility assays, as described under § 610.12.

최종 수확을 상세히 기술하여야 한다. 최종 MVGT 수확물을 최종 제제화 전에 농축하는지 여부를 기술하고, 농축하는 경우 세척 조건과 사용된 완충액/배지를 기술하여야 한다. MVGT를 보관 전에 동결건조하는 경우, 동결건조 조건과 동결건조에 사용된 안정화제를 기술한다. MVGT 원료의약품(DS) 또는 완제의약품(DP)을 동결보존하는 경우, 이 정보를 개시한 안정성 시험과 함께 포함하여야 한다(이 가이던스 III.B.4항 참조). 또한 세포 성장과 최종 수확 사이, 그리고 최종 수확과 동결건조 사이의 보관 시간과 조건(있는 경우)도 기술하여야 한다. 제조공정에 최종 수확과 최종 제제화 사이의 중간 보관 단계가 포함되는 경우, 보관 조건과 보관 기간을 기술하여야 한다.

You should provide a detailed description of the final harvest. You should describe whether the final MVGT harvest is concentrated prior to final formulation, and if so, describe the wash conditions and buffers/media used. If the MVGT is lyophilized prior to storage, describe the lyophilization conditions and stabilizers used for lyophilization. If the MVGT Drug Substance (DS) or Drug Product (DP) is cryopreserved, you should include this information along with any stability studies initiated (see section III.B.4 of this guidance). You should also describe the time and conditions of storage (if any) between cell growth and final harvest and between final harvest and lyophilization. If the manufacturing process includes intermediate storage steps between final harvest and final formulation, the storage conditions and the length of storage should be described.

§ 312.23(a)(7)(iv)(a)에 규정된 바와 같이 최종 제품의 제제화를 기술하여야 한다. 아울러 IND에는 성장인자, 완충액, 염 안정화제와 같은 첨가제가 최종 제제에 포함되는지 여부를 기술하고 그 출처를 밝혀야 한다(이 가이던스 III.A.3항 참조). 또한 이러한 첨가제의 공급업체와 최종 농도를 밝혀야 한다.

You must describe the formulation of the final product as prescribed under § 312.23(a)(7)(iv)(a). In addition, the IND should describe whether excipients such as growth factors, buffers and salt stabilizers are included in the final formulation and state their source (see section III.A.3 of this guidance). You should also identify the vendor and final concentration of these excipients.

최종 제품에 사용된 MVGT 세포 밀도 또는 농도(생균 대 사멸균)를 기술하여야 한다. 최종 제품을 냉동 상태로 임상시험 실시기관에 전달하는 경우, 제품의 운송 방법에 대한 기술과 제품을 일관된 결과로 해동할 수 있음을 보여주는 자료를 포함하여야 한다. 최종 제품을 재용해하여 사용하는 경우, 재용해 배지 또는 완충액의 용량과 조성을 기술하고 재용해 시 세균 생존성을 보여주는 자료를 제공하여야 한다. 생존성 자료는 서로 다른 제품 배치 2개 이상을 각각 독립적으로 3회 반복 시험한 결과이어야 한다.

The MVGT cell density or concentration (live cells vs. killed cells) used in the final product should be described. If the final product is delivered to the clinical site frozen, you should include a description of how the product will be shipped and data to show that the product can be thawed with consistent results. If the final product is to be reconstituted, you should describe the volume and composition of the reconstitution medium/or buffer and provide data to show bacterial viability when reconstituted. The viability data should be from at least two different product batches tested independently in triplicates.

MVGT의 제품 시험에는 안전성을 보증하기 위한 미생물학적 시험과, 확인·순도(엔도톡신 포함)·생존성·역가 등 제품 특성의 평가가 포함된다.

Product testing for MVGTs includes microbiological tests to help ensure safety, and assessments of product characteristics such as identity, purity (including endotoxin), viability, and potency.

제조공정 자체를 평가하고 제품의 품질과 일관성을 보증하기 위하여, MCB/WCB 제조를 포함한 제조공정 전반에 걸쳐 시험을 실시하여야 한다. 중간체 허용기준과 최종 제품 출하기준에 사용되는 기준 및 시험방법을 기술하여야 한다. 기준 및 시험방법은 제품과 제품 생산에 사용되는 그 밖의 물질의 품질을 확인하는 품질 표준(즉, 시험항목, 분석절차, 허용기준)이다. 허용기준은 기술된 시험항목에 대한 수치 한도, 범위 또는 그 밖의 기준을 의미한다. 출하기준은 일반적으로 제품 개발이 품목허가를 향해 진행되면서 정교해지고 엄격해지므로, 기준 및 시험방법은 제품 개발 단계에 적합하여야 한다(참고문헌 1). 이 가이던스 부록의 표 1은 MVGT 제품에 권장되는 시험의 예를 제시한다.

You should perform testing throughout the manufacturing process, including the manufacture of MCB/WCB, to evaluate the manufacturing process itself and to ensure the quality and consistency of the product. You should describe the specifications used for intermediate acceptance criteria and final product release criteria. Specifications are the quality standards (i.e., tests, analytical procedures, and acceptance criteria) that confirm the quality of products and other materials used in the production of a product. Acceptance criteria mean numerical limits, ranges, or other criteria for the tests described. Specifications should be appropriate to the stage of product development, because release criteria are generally refined and tightened as product development progresses toward licensure (Ref. 1). Table-1 in the Appendix of this guidance provides examples of suggested testing for MVGT products.

§ 312.33(b)(7)에 따라, 지난 1년간 이루어진 중요한 제조 또는 미생물학적 변경사항의 요약을 포함한 연차 보고를 IND에 제출하여야 한다. 연차 보고에는 MCB/WCB의 안정성 시험 결과와, 보고 기간 중에 제조된 로트에 대한 특성분석 시험 및 로트 출하시험 결과를 포함한 제조 관련 갱신 내용을 담아야 한다. 결과는 표 형태로 제출할 수 있으며, 로트번호 또는 식별자, 제조일, 사용된 시험항목, 시험방법, 해당되는 경우 시험방법의 감도와 특이성, 출하기준 및 시험 결과를 포함하여야 한다. 모든 시험법은 의도한 목적에 대하여 충분한 감도, 특이성 및 재현성을 가져야 한다.

You must, under § 312.33(b)(7), provide an annual report to your IND that includes a summary of any significant manufacturing or microbiological changes made during the past year. Your annual report should contain manufacturing updates that include results related to stability testing of MCB/WCB, and results of characterization testing and lot release testing for lots manufactured during the reporting period. The results may be submitted in a tabular form and should include the lot number or identifier, date of manufacture, test used, test method, the sensitivity and specificity of test methods when appropriate, release criteria, and test results. All assay methods should be adequately sensitive, specific, and reproducible for the intended purpose.

§ 312.23(a)(7)(i)에 따라, 원료의약품과 완제의약품의 조성, 제조 및 품질관리를 기술한 항을 제출하여야 한다. 임상시험의 각 단계에서 임상시험용 의약품의 적절한 확인, 품질, 순도 및 함량을 보증하기에 충분한 정보를 제출하여야 하지만, 그 보증에 필요한 정보의 양은 임상시험 단계, 계획된 임상시험 기간, 제형 및 그 밖에 이용 가능한 정보의 양에 따라 달라진다. 따라서 MVGT 제품의 IND에는 (1) 다른 오염 미생물이 없음(미생물 순도 및 무균성), (2) 확인, (3) 순도(공정 관련 외래 물질이 없음), (4) 역가를 보증하는 정보를 제공하여야 한다. 이러한 요건에 따라 FDA는 다음 시험을 권장한다.

Under § 312.23(a)(7)(i), you must provide a section describing the composition, manufacture, and control of the drug substance and the drug product. Although in each phase of the investigation, you are required to submit sufficient information to assure the proper identification, quality, purity, and strength of the investigational drug, the amount of information needed to make that assurance will vary with the phase of the investigation, the proposed duration of the investigation, the dosage form, and the amount of information otherwise available. As such, you must provide information in your IND for MVGT products to assure their: (1) freedom from other contaminating organisms (microbial purity and sterility); (2) identity; (3) purity (freedom from extraneous process related material); and (4) potency. In accordance with these requirements, we recommend the following testing:

MCB와 DP에 대하여 MVGT를 충분히 확인하고(§ 312.23(a)(7)(i)) 같은 제조시설에서 처리되는 다른 제품과 구별할 수 있도록, 각 제품에 특이적인 시험법으로 확인시험을 실시하여야 한다. 최종 제품의 경우, 바이알의 내용물이 적절히 표시기재되었음을 보증하기 위하여 확인시험이 중요하다.

You should test for identity with respect to the MCB and DP by assays that will be specific for each product in a manner that will adequately identify the MVGT (§ 312.23(a)(7)(i)) and distinguish it from any other products being processed in the same manufacturing facility. For the final product, identity testing is important to ensure that the contents of the vial are labeled appropriately.

세균 균주 확인에는 다음과 같은 시험 등 서로 보완적인 확인시험법⁵을 2가지 이상 사용할 것을 권장한다.

For bacterial strain identification, we recommend at least two complementary methods⁵ of identity assays, such as the following tests:

제품 순도는 허가된 생물의약품 허가신청(BLA)에 기술된 제조공정에서 불가피한 것을 제외하고 외래 물질이 없는 상태로 정의된다(21 CFR 600.3(r)). 제품 순도는 IND에 기술하여야 한다(§ 312.23(a)(7)(i)). MVGT 제품의 순도 시험에는 발열성/엔도톡신 시험과, 제품에 의도하지 않은 세균 및 진균이 없음을 입증하는 단일배양 시험을 포함하여야 한다. 순도 시험은 시드 스톡, MCB 및 WCB 적격성 평가 시험의 일부로, 그리고 최종 DP의 출하시험으로 포함하여야 한다.

Product purity is defined as freedom from extraneous material, except that which is unavoidable in the manufacturing process described in the approved biologics license application (BLA) (21 CFR 600.3(r)). Product purity must be described in the IND (§ 312.23(a)(7)(i)). Purity testing for MVGT products should include assays for pyrogenicity/endotoxin and a test for monoculture to demonstrate that the product is free from unintended bacterial and fungal organisms. Tests for purity should be included as a part of seed stock, MCB and WCB qualification tests, and as a release test for the final DP.

MVGT 제품에 특이한 순도 시험으로 다음을 제안한다.

Suggested purity tests specific to MVGT products include the following:

역가 측정에 사용할 시험법을 기술하고 정당성을 제시하여야 한다. FDA는 역가 측정에 정량적 시험법을 사용할 것을 권장한다. 역가의 정량적·정성적 측정을 포함하는 시험법 조합(matrix)을 사용하는 다른 접근 방법도 고려될 수 있다(참고문헌 4). 역가 시험은 MCB 적격성 평가 시험과 DP 출하시험의 일부로 포함하여야 한다. 제1상/제2상 시험의 경우, 생균 및 사균의 양을 정량하는 시험법과 함께 전이유전자 발현을 정량하는 시험법이 역가의 대리 측정으로 인정될 수 있다. 제3상 시험의 경우, MVGT의 적절한 생물학적 활성을 측정하는 생체내 또는 시험관내 시험법을 포함하여야 한다. 역가 시험법은 허가 전에 밸리데이션을 완료하여야 한다는 점에 유의한다(21 CFR 211.165(e)).

You should describe and justify the assay(s) you will use to measure potency. We recommend the use of a quantitative assay(s) to measure potency. An alternative approach using a matrix of assays, including quantitative and qualitative measures of potency, may be considered (Ref. 4). Potency assay should be included as a part of the MCB, qualification and DP release tests. For Phase 1/Phase 2 studies, an assay to quantify transgene expression, along with assays to quantitate the amount of live and dead organisms, may be acceptable as a surrogate measurement of potency. For a Phase 3 study, you should include in vivo or in vitro assay(s) that measure an appropriate biological activity of the MVGT. Note that potency assays must be validated prior to licensure (21 CFR 211.165(e)).

생균 세균 제품의 경우, FDA는 생존성과 생균 대 사균 세포 비율에 대한 최소 출하기준을 설정할 것을 권장한다. FDA는 DP 기준을 생균/생존 세포 > 60%⁶로 설정할 것을 권장한다(참고문헌 5). 생존성은 MCB, WCB, DS 및 DP 단계에서 시험하여야 한다.

For live bacterial products, we recommend that you establish minimum release criteria for viability and a live to dead bacterial cell ratio. We recommend that the DP specification be set at > 60% live/viable cells⁶ (Ref. 5). Viability should be tested at the MCB, WCB, DS and DP stages.

최종 MVGT 제품이 비경구로 투여되는 경우, 사균도 항원 특이 및 벡터 특이 면역반응에 기여할 수 있음을 고려하여 FDA는 최종 제품 중 생균 및 사균의 수에 근거하여 용량 수준을 설정할 것을 권장한다.

If the final MVGT product is administered parenterally, we recommend that you establish a dose level based on the number of live and dead bacteria in the final product considering dead bacteria can also contribute to antigen-specific and vector-specific immune responses.

미생물 응집체의 존재와 크기는 비경구로 투여되는 MVGT 제품에서 잠재적인 안전성 우려사항이다. 최종 제품은 제조 시점과 안정성 계획서의 일부로서 정해진 주기마다 응집체의 존재를 시험하여야 한다. DP 중 미립자의 존재와 크기에 대하여 허용한계를 갖는 로트 출하기준을 설정하여야 한다.

The presence and size of microbial aggregates is a potential safety concern in parenterally administered MVGT products. The final product should be tested for the presence of aggregates at the time of manufacture and at periodic intervals as a part of the stability protocol. A lot release specification with acceptance limits should be set for the presence and size of particulates in the DP.

원료의약품은 약리 활성을 제공하도록 의도된 유효성분이다. 최종 DP를 얻기 위하여 추가로 처리되는(예: 가열 사멸, 동결건조, 캡슐화, 정제 제조 등) MVGT는 순도, 플라스미드의 존재(해당되는 경우), 생존성, 세포 수 등을 평가하여야 하며, 이 정보는 시험 기준, 허용한계 및 시험방법 설명과 함께 IND에 포함하여야 한다. IND에 포함할 것을 고려할 그 밖의 일부 시험 항목은 이 가이던스 III.F.2항에 아래에서 기술한다. 이 정보는 DS를 시험하여 얻을 수 있으며, 최종 제품이 분할 충전 외에 추가 조작 없이 제조되는 경우에는 DP를 시험하여 얻을 수 있다(DS와 DP에 제안되는 시험 항목 목록은 이 가이던스 부록의 Table-1 참조).

Drug substance is an active ingredient that is intended to furnish pharmacological activity. An MVGT that is processed further (e.g., heat killed, lyophilized, encapsulated, made into a tablet, etc.) to obtain the final DP, should be assessed for purity, the presence of plasmids (if applicable), viability, cell number etc., and this information should be included in the IND, along with test specifications, acceptance limits and a description of test methods. Some of the other testing parameters to be considered for inclusion in the IND are described below in section III.F.2 of this guidance. This information may be obtained by testing the DS, or if the final product is manufactured without additional manipulations other than aliquoting, the DP (see Table-1 in the Appendix of this guidance for a list of suggested test parameters for DS and DP).

완제의약품은 환자 투여에 사용되는 최종 제제화 제품이다. MVGT 제품의 경우, 예를 들어 바이알에 충전된 미생물 벡터가 이에 해당한다. 완제의약품 출하기준 시험은 제조되는 제품의 각 로트마다 수행하여야 한다. FDA는 제안하는 모든 기준(이 가이던스 III.C항에 기술된 안전성, 순도, 역가 및 확인 시험)을 표 형식으로 제시할 것을 권장한다.

The drug product is the final formulated product used for patient administration. In the case of an MVGT product, this would include, for example, the vialed microbial vector. Drug product release criteria testing should be performed on each lot of product manufactured. We recommend that you use a table format to provide all of your proposed specifications (tests for safety, purity, potency, and identity as described in section III.C of this guidance).

§ 312.23(a)(7)(ii)에 규정된 바와 같이, 제품이 제안된 임상시험의 계획 기간 동안 허용 가능한 화학적·물리적 한도 내에 있음을 입증하기 위하여 IND의 모든 단계에서 안정성 시험을 수행하여야 한다. 안정성 시험은 제품이 해당 시험에 필요한 기간 동안 충분히 안정함을 확립하기 위하여 임상시험의 초기 단계에서 수행한다. 최종 제제와 유효기간을 뒷받침하는 자료는 허가를 위하여 필요하다.

As provided in § 312.23(a)(7)(ii), you must conduct stability testing in all phases of the IND to demonstrate that the product is within acceptable chemical and physical limits for the planned duration of the proposed clinical investigation. Stability testing is performed during early phases of the clinical trial to establish that the product is sufficiently stable for the time period required by the study. Data supporting a final formulation and dating period will be necessary for licensure.

공정 중 물질과 최종 MVGT 제품 모두에 대한 안정성 계획서와 자료를 제출하여야 한다. 제안하는 안정성 계획서에는 제품의 확인, 순도, 품질 및 역가 측정을 포함하여야 한다. 수행하는 각 시험에 대하여 시험방법, 시료 채취 시점(0시점이 있어야 한다), 시험 온도 및 제품 안정성을 나타내는 데 사용한 시험법의 정당성을 포함한 그 밖의 적절한 정보를 기술하여야 하며, 임상시험 계획서가 요구하는 보관 기간 동안 이러한 항목을 측정하여야 한다. 추가 정보는 국제조화회의(ICH) Q5C Guideline for Industry: Quality of Biotechnological Products: Stability Testing of Biotechnological/Biological Products(참고문헌 6)를 참조한다.

You should submit a stability protocol and data for both in-process material and the final MVGT product. A proposed stability protocol should include a measure of product identity, purity, quality, and potency. For each test conducted you should describe the test method, sampling time points (there should be a zero-time point), testing temperature, and other appropriate information, including your justification of the assays used to indicate product stability, measuring these parameters for the duration of storage required by the clinical protocol. For further information, refer to International Conference on Harmonisation (ICH) Q5C Guideline for Industry: Quality of Biotechnological Products: Stability Testing of Biotechnological/Biological Products (Ref. 6).

MVGT를 동결보존하거나 동결건조하는 경우, 안정성 계획서는 동결보존/동결건조 기간 중 제품이 안정함을 보증하고 위에 기술한 항목을 적절히 측정하도록 설계하여야 한다. MVGT의 생물학적 기능을 평가하기 위하여, FDA는 보관 후 회복 시 유도기(lag phase) 기간의 평가를 생리학적 조건의 영양이 풍부한 배지에서 수행할 것을 권장한다.

If the MVGT is cryopreserved or lyophilized, your stability protocol should be designed to ensure that the product is stable during the period of cryopreservation/lyophilization, and to measure the parameters described above, as appropriate. In order to assess the biological function of the MVGT, we recommend that evaluation of the duration of lag phase for post-storage revival be conducted in rich medium under physiological conditions.

생균 및 사균 시험은 안정성 계획서의 일부가 되어야 한다. 적절한 허용기준은 세균 종마다 다를 것으로 예상되며, FDA는 해당 MVGT 제품의 제조 및 시험 경험에 근거하여 기준을 설정할 것을 권장한다.

Testing for live and dead bacteria should be part of your stability protocol. We expect that the appropriate acceptance criteria will be different for each bacterial species and we recommend that you establish specifications based on manufacturing and testing experience with your MVGT product.

유효기간 설정에 도움이 되도록, 제제화 시점부터 환자 주입 시점까지 제품이 안정함을 입증하는 자료를 모두 포함하여야 한다. FDA는 적절한 온도에서, 예상되는 보관 기간에 부합하는 시점에 시험을 수행할 것을 권장한다. 제품을 제조소에서 임상시험실시기관으로 운송하는 경우, 소요 시간과 운송 조건(즉, 포장, 온도)을 기술한다. 안정성 계획서는 제안된 보관 및 운송 조건에서 제품의 완전성, 순도, 회수 가능한 시료량, 제품 응집 프로파일 및 역가가 유지됨을 입증하기에 적절하여야 한다. FDA는 제3상까지 시스템에 부하를 주는 조건을 사용한 밸리데이션 시험을 착수하여 완료할 것을 권장한다.

You should include any data that demonstrate that the product is stable between the time of product formulation and patient infusion to aid in establishing an expiration-dating period. We recommend that you conduct the testing at the appropriate temperatures and at time points consistent with predicted storage times. If the product is shipped from the manufacturing site to the clinical site, describe the time and shipping conditions (i.e., packaging, temperature). Your stability protocol should be adequate to demonstrate that product integrity, purity, recoverable sample volume, product aggregation profile, and potency are maintained under the proposed storage and shipping conditions. We recommend that you initiate and complete validation studies using conditions that stress the system by Phase 3.

항생제 감수성 시험은 시드 스톡, MCB 및 DP에 대하여 수행하여야 하며, 결과가 있는 경우 IND에 포함하여야 한다. 항생제 감수성 시험에는 MVGT가 유래한 미생물 인자의 감염 치료에 통상적으로 사용되는 1차 치료 항생제 2종 이상과 2차 치료 항생제 2종 이상을 포함하여야 한다.

Antibiotic sensitivity testing should be performed on the seed stock, MCB and DP, and the results included in the IND, when available. Antibiotic sensitivity tests should contain at least two first line therapy and two second line therapy antibiotics normally used to treat infections with the microbial agent(s) for which the MVGT was derived.

사용하는 용기와 마개의 종류를 기술하고 용기와 마개가 제품과 적합성이 있음을 보증하여야 한다(참고문헌 7).

You should describe the types of containers and closures used and ensure that the containers and closures are compatible with the product (Ref. 7).

동결건조/건조 세균 제품을 사용하는 경우, 잔류 수분 함량 시험에 관한 FDA의 기존 권고사항을 참조한다(참고문헌 8).

If using lyophilized/dried bacterial products, please refer to FDA’s previous recommendations regarding tests for residual moisture content (Ref. 8).

IND에 따른 MVGT 제품의 임상개발 중에는 21 CFR 25.31에 따른 범주별 적용 제외 주장이나 21 CFR 25.40에 따른 환경 평가 중 하나를 제출하여야 한다(§ 312.23(a)(7)(iv)(e)). 추가 정보는 2015년 3월자 FDA 가이던스 "Determining the Need for and Content of Environmental Assessments for Gene Therapies, Vectored Vaccines, and Related Recombinant Viral or Microbial Products"를 참조한다(참고문헌 9).

During clinical development of an MVGT product under an IND, you must submit either a claim for categorical exclusion under 21 CFR 25.31, or an environmental assessment under 21 CFR 25.40 (§ 312.23(a)(7)(iv)(e)). Please refer to FDA’s guidance for industry entitled, “Determining the Need for and Content of Environmental Assessments for Gene Therapies, Vectored Vaccines, and Related Recombinant Viral or Microbial Products” dated March 2015, for additional information (Ref. 9).

MVGT 제품의 제조공정에는 복잡성, 변동성 및 외래성 인자 유입 위험이 서로 다른 시약과 출발물질의 사용이 수반된다. 제1상 임상시험용으로 제조된 MVGT가 안전성, 확인, 품질 및 순도의 적절한 기준을 충족하도록 보증하기 위하여 적절한 방법, 시설 및 제조 관리를 사용하여야 한다. 제2상 및 제3상 임상시험용으로, 그리고 BLA에 따른 판매용으로 제조되는 MVGT 제품은 21 CFR 210 및 211의 요건을 준수하여야 한다. FDA는 제1상 임상시험의 cGMP 권고사항에 관한 추가 가이던스를 이미 발행하였다(참고문헌 10).

The manufacturing process for MVGT products entails the use of reagents and source materials of differing complexity, variability, and risk for introduction of adventitious agents. You should use the appropriate methods, facilities, and manufacturing controls to ensure that the MVGT manufactured for Phase 1 clinical studies meets appropriate standards of safety, identity, quality, and purity. MVGT products manufactured for Phase 2 and Phase 3 clinical studies, and for marketing under a BLA, must comply with 21 CFR Parts 210 and 211 requirements. FDA has previously issued additional guidance regarding cGMP recommendations for Phase 1 clinical trials (Ref. 10).

이 가이던스의 이 부분은 비임상시험에서 MVGT 제품의 활성, 안전성 및 생체분포를 평가하기 위한 고려사항을 기술한다. 비임상시험은 대상 환자군에서 특정 MVGT 제품을 사용하는 과학적 근거를 뒷받침하기 위하여 수행한다. 의뢰자가 제안된 임상시험을 수행하는 것이 합리적으로 안전하다고 결론을 내린 근거가 되는 MVGT의 약리·독성 시험에 관한 충분한 정보를 IND에 제출하여야 한다(§ 312.23(a)(8)).

This section of the guidance describes the considerations for evaluating the activity, safety, and biodistribution of MVGT products in preclinical studies. Preclinical studies are conducted to support the scientific rationale for the use of a particular MVGT product in a target patient population. Adequate information about pharmacological and toxicological studies of the MVGT on the basis of which the sponsor has concluded that it is reasonably safe to conduct the proposed clinical trial, must be submitted in the IND (§ 312.23(a)(8)).

FDA는 MVGT 제품을 포함한 임상시험용 제품에 대하여 적절한 동물 종과 질병 동물모델의 선정 및 비임상 개념증명·독성시험의 전반적 설계에 관한 포괄적 권고사항을 제공하는 2013년 11월자 가이던스 "Preclinical Assessment of Investigational Cellular and Gene Therapy Products"(비임상평가 가이던스)를 이미 발행하였다(참고문헌 11). MVGT의 비임상시험 설계에 관한 몇 가지 추가 고려사항을 아래에서 다룬다.

FDA has previously issued a guidance document entitled, “Preclinical Assessment of Investigational Cellular and Gene Therapy Products” dated November 2013 (Preclinical Assessment Guidance) that provides comprehensive recommendations regarding the selection of appropriate animal species and animal models of disease, as well as the overall design of preclinical proof-of-concept and toxicology studies for investigational products, including MVGT products (Ref. 11). Some additional considerations of preclinical study design for MVGTs are highlighted below.

생물학적으로 적절한 동물 종과 모델의 선정 시 고려사항으로는 MVGT 벡터에 대한 해당 종의 허용성/감수성, MVGT와 발현된 전이유전자에 대한 약리학적 반응, 대상 임상군과 해당 동물 종/모델의 비교 생리·병태생리가 있다. 실행 가능한 경우, FDA는 MVGT 제품의 용량-반응/생물학적 활성 관계를 특성분석하기 위하여 질병 동물모델을 사용할 것을 권장한다. 질병 상태가 이러한 시험에서 생성되는 안전성 자료에 영향을 줄 수 있고 MVGT 제품의 위험-이익 평가에 보다 적절한 추정치를 제공할 수 있으므로, MVGT 제품의 독성 및 생체분포 프로파일을 평가하는 시험을 설계할 때에도 이러한 동물모델을 고려하여야 한다. 이 주제에 관한 보다 상세한 논의는 비임상평가 가이던스(참고문헌 11)의 III.A항과 V.B항을 참조한다.

Considerations for selection of biologically relevant animal species and models include the permissiveness/susceptibility of the species to the MVGT vector; the pharmacological response to the MVGT and to the expressed transgene; and the comparative physiology/pathophysiology of the animal species/model to the targeted clinical population. When feasible, we recommend the use of animal models of disease to characterize a dose response/biological activity relationship of the MVGT product. These animal models should also be considered when designing studies to evaluate the toxicology and biodistribution profile of the MVGT product, as disease status may affect the safety data generated from these studies, as well as provide a more relevant estimate of the risk-benefit assessment of the MVGT product. Refer to sections III.A and V.B of the Preclinical Assessment Guidance (Ref. 11) for a more detailed discussion of this topic.

비임상 안전성 시험의 전반적 목적은 MVGT 제품의 잠재적인 국소·전신·급성·만성 독성을 확인하고 특성분석하며 정량하는 것이다. 이러한 시험에서 생성된 자료는 초회 용량 수준, 용량 증가 방식, 투여 일정, 모니터링 항목 및 임상시험의 그 밖의 요소를 선정하는 데 도움이 된다. MVGT 제품에 적용할 수 있는 비임상시험 설계에 관한 일반적 권고사항은 비임상평가 가이던스(참고문헌 11)의 III항과 V항에 제시되어 있다. 이 제품군에 특유한 평가 항목으로는 전염증성 사이토카인과 케모카인의 유도 가능성, MVGT 또는 발현된 전이유전자가 매개하는 선천면역 및 적응면역 반응이 있다. MVGT 제품 투여로 인한 표적 외 독성과 면역반응의 연관 가능성은 임상시험 설계에 영향을 줄 수 있는 정보이므로 검토하여야 한다.

The overall objectives of the preclinical safety studies are to identify, characterize, and quantify any potential local, systemic, acute, or chronic toxicity of the MVGT product. The data generated from these studies will help guide the selection of the starting dose level, dose-escalation scheme, dosing schedule, monitoring parameters, and other elements of the clinical trial. General recommendations for preclinical study designs applicable to MVGT products are provided in sections III and V of the Preclinical Assessment Guidance (Ref. 11). Specific to this product class, parameters to assess include: the potential induction of proinflammatory cytokines and chemokines; and innate and adaptive immune responses mediated by the MVGT or the expressed transgene. A possible association of an immune response with any off-target toxicities resulting from administration of the MVGT product should be explored as this information could affect clinical trial design.

MVGT를 투여받는 임상 대상군의 대다수는 어느 정도 면역저하 상태이거나 면역억제 상태일 수 있다. 따라서 제품의 약독화 정도와 약독화 표현형의 안정성을 평가하여야 한다. 예를 들어 MVGT 제품의 증식이 특수한 영양요구성이나 특정 미세환경에 의존하는 경우, 이러한 의존성의 엄격함과 이들 인자가 없을 때 제품이 증식하지 않음을 입증하는 시험관내 및/또는 생체내 자료를 IND 신청에 제출하여야 한다. 해당되는 경우, MVGT 제품에서 병원성 인자의 제거 또는 새로운 병원성 인자의 도입이 숙주 세포/조직에 미치는 영향도 평가하여야 한다. 포자를 형성할 수 있는 MVGT 제품의 경우, 표적 부위를 포함하여 포자가 형성되거나 증식하는 조건을 충분히 특성분석하여야 한다.

The majority of the clinical population receiving an MVGT may be immuno-compromised or immunosuppressed to some extent. Therefore, the degree of product attenuation and the stability of the attenuated phenotype should be assessed. For example, if MVGT product replication is dependent on special nutrient requirement(s) or a specific microenvironment, then in vitro and/or in vivo data demonstrating the rigorousness of this dependence and the lack of product replication in the absence of these factors should be submitted in the IND application. As applicable, the effect of abrogation of virulence factors or the introduction of new virulence factors in the MVGT product on the host cells/tissues should also be evaluated. For MVGT products capable of forming spores, the conditions under which the spores form or replicate, including the target site(s), should be well-characterized.

많은 임상시험에서 MVGT 제품은 자연적인 감염 또는 전파 경로로 투여되지 않는다. 따라서 동물에서 계획된 임상 투여 경로로 투여한 후 MVGT와 발현된 전이유전자(해당되는 경우)의 생체분포/배출 프로파일은 중요한 안전성 평가변수이다. FDA는 MVGT 제품 투여 후 여러 시점에서 표적 및 비표적 조직/생체 체액으로부터 생체분포/배출 자료를 수집할 것을 권장한다. 조직/시료는 적절한 양성 및 음성 대조를 사용하는 충분히 특성분석된 방법으로 분석하여야 하며, 생균 및 사균 미생물의 수를 측정하여야 한다. FDA는 시험 설계에 관한 일반 원칙의 권고사항을 이미 제공하였다(참고문헌 2).

In many clinical trials, administration of the MVGT product is not via its natural route(s) of infection or transmission. Thus, the biodistribution/shedding profile of the MVGT and the expressed transgene (if applicable) following administration via the planned clinical route of administration in animals is an important safety endpoint. We recommend that you collect biodistribution/shedding data from target and non-target tissues/biological fluids at multiple time points following administration of the MVGT product. The tissues/samples should be analyzed using well-characterized methods that use appropriate positive and negative controls, and the number of live and dead microorganisms should be determined. FDA has previously provided recommendations for general principles regarding study design (Ref. 2).

배출시험의 설계와 분석에 관한 추가 정보는 2015년 8월자 FDA 가이던스 "Design and Analysis of Shedding Studies for Virus or Bacteria-Based Gene Therapy and Oncolytic Products"(배출시험 가이던스)(참고문헌 12)도 참조할 수 있다.

You may also refer to the FDA guidance entitled, “Design and Analysis of Shedding Studies for Virus or Bacteria-Based Gene Therapy and Oncolytic Products” dated August 2015 (Shedding Studies Guidance) (Ref. 12), for additional information on the design and analysis of shedding studies.

FDA는 여러 항생제가 있는 조건과 없는 조건에서 MVGT 제품의 생체내 생물학적 활성, 안전성 및 생체분포/지속성 프로파일을 평가할 것을 권장한다(포함할 항생제 종류에 관한 권고사항은 이 가이던스 III.G.1항 참조). 이러한 시험에서 얻은 자료는 효과적인 항생제의 선정과 임상시험에서 항생제 투여의 적절한 시기를 정하는 데 도움이 될 수 있다.

We recommend evaluating in vivo biological activity, safety, and biodistribution/persistence profiles of the MVGT product in the presence and absence of various antibiotics (see section III.G.1 of this guidance for recommendations on the types of antibiotics to include). Data obtained from these studies can help guide the selection of effective antibiotics, as well as appropriate timing of antibiotic administration in the clinical trial.

이 가이던스의 이 부분은 MVGT 제품 연구에 고유한 임상개발 및 초기 임상시험 설계 문제에 중점을 둔다. 일반적인 임상시험 문제는 ICH 가이드라인 E8 General Considerations for Clinical Trials(참고문헌 13)에서 논의된다. MVGT 제품의 초기 단계 임상시험과 특히 관련된 임상 고려사항을 아래에서 기술한다.

This section of the guidance focuses on clinical development and early clinical trial design issues that are unique to the study of MVGT products. General trial issues are discussed in the ICH guideline E8 General Considerations for Clinical Trials (Ref. 13). Clinical considerations that are particularly relevant to early-phase clinical trials of MVGT products are described below.

임상시험에서 MVGT 제품의 투여는 상당한 안전성 우려를 제기할 수 있다. 이러한 우려는 제품의 감염성, 필요한 병용 약물의 위험 및 시험 절차의 위험에서 비롯된다. 이 부분의 목적은 MVGT 제품의 초기 단계 임상시험 설계와 수행에 지침이 될 수 있는 위험 완화의 일반적 요소를 논의하는 것이다.

Administration of MVGT products in clinical trials may present substantial safety concerns. Such concerns derive from the infectious nature of the product, the risks of necessary concomitant medications, and the risks of the study procedures. The purpose of this section is to discuss general elements of risk mitigation that may guide the design and conduct of an early-phase trial of an MVGT product.

특정 MVGT 제품(예: 생균 세균 제품)과 특정 시험 대상군(예: 면역저하 환자)은 임상적으로 유의한 패혈증 및/또는 질병의 위험을 수반한다. 이러한 감염 위험을 줄이기 위하여 예방적, 병용 또는 치료 후 항생제가 필요할 수 있다. 항생제 감수성 시험(III.G.1항 참조)과 항생제를 사용한 비임상시험(이 가이던스 IV.E항 참조)은 임상시험용 1차 및 2차 항생제 선정을 뒷받침할 수 있다. 관련 임상 또는 비임상 자료는 이러한 항생제의 투여 일정과 투여 기간도 뒷받침하여야 한다.

Specific MVGT products (e.g., live bacterial product) and specific study populations (e.g., immunocompromised patients) entail a risk of clinically significant sepsis and/or disease. Prophylactic, concomitant, or post treatment antibiotics may be indicated to decrease this risk of infection. Antibiotic sensitivity assays (see section III.G.1) and preclinical studies with antibiotics (see section IV.E of this guidance) may support the choice of first- and second-line antibiotics for the clinical trial. Relevant clinical or preclinical data should also support the dosing schedules and duration of administration of these antibiotics.

MVGT 제품의 생체내 생존은 면역억제제의 병용 투여에 의존할 수 있다. 그러나 이러한 면역억제제는 시험대상자의 중대한 감염 위험을 상당히 증가시킬 수 있다. 따라서 면역억제제의 투여는 정당성이 입증되어야 하며 적절한 주의조치(예: 신중한 용량 선정 및 감염성 이상반응 모니터링)와 함께 시험에 포함되어야 한다.

In vivo survival of an MVGT product may depend on concomitant administration of immunosuppressive drugs. However, such immunosuppressive drugs may substantially increase the risk of serious infection for the study subjects. Therefore, the administration of immunosuppressive drugs must be justified and incorporated into the study with appropriate precautions (e.g., careful dose selection and monitoring for infectious adverse events).

MVGT 제품은 다른 제품(예: 위에 기술한 항생제나 면역억제제)과 병용하여 연구될 수 있고, 침습적 절차(예: 수술)를 통하여 투여될 수 있으며, 전신으로 전달될 수 있다. 이러한 경우, 초회 용량, 투여 일정 및 용량 증가를 정당화하는 근거와 자료는 제품과 시험 절차 양쪽에서 예상되는 위험을 고려하여야 한다. 시험 계획서에는 이러한 예상 위험을 모니터링하는 계획을 포함하여야 한다.

MVGT products may be studied in combination with other products (e.g., antibiotics or immunosuppressive drugs, as described above), administered through invasive procedures (e.g., surgery), or delivered systemically. In such cases, the rationale and data to justify the starting dose, dosing schedule, and dose escalation should consider the expected risks from both the product(s) and the study procedures. The study protocol should include a plan to monitor for these expected risks.

초기 단계 임상시험에서 사전에 정한 위험관리 계획은 개입의 차이로 인한 위험 결과의 변동성과 중증도를 줄인다. 따라서 사전에 정한 위험관리 계획은 안전성 자료의 해석 가능성을 높일 수 있다. MVGT 제품 임상시험의 위험 평가와 관리는 새로운 자료가 나오면서 계속 발전할 것이다.

In early-phase clinical trials, a pre-specified plan for management of risks reduces the variability and severity of the risk outcomes due to differences in interventions. Thus, a pre-specified risk management plan may improve the interpretability of the safety data. Risk assessments and managements for clinical trials of MVGT products will continue to evolve as new data emerge.

해당 임상시험용 MVGT 제품이나 관련 제품이 이전에 사람에게 투여된 적이 있을 수 있다. 그러한 경우, 제안된 시험의 설계에 참고할 수 있는 관련 임상 안전성 및 활성 자료를 이용할 수 있다. 이용 가능한 자료가 해당 임상시험용 MVGT 제품과 어느 정도 관련이 있는지 평가하려면 이전에 투여된 MVGT 제품을 충분히 특성분석하여야 한다(이 가이던스 III항 참조). 따라서 이전에 투여된 이러한 MVGT 제품의 특성분석은 이용 가능한 자료가 제안된 MVGT 제품의 시험 설계에 어느 정도까지 참고될 수 있는지를 결정한다.

The specific investigational MVGT product, or a related product, may have been previously administered to humans. If so, then relevant clinical safety and activity data may be available to inform the design of the proposed study. To assess the relevance of the available data to the specific investigational MVGT product, adequate characterization of the previously administered MVGT product(s) is necessary (please refer to section III of this guidance). Thus, the characterization of these previously administered MVGT products determines the extent to which the available data can inform the design of a trial for a proposed MVGT product.

기존 인체 자료가 있는 경우, 그 자료의 관련성에 따라 초회 용량 및/또는 용량 증가 방식을 뒷받침하기 위한 추가 비임상시험의 수행이 필요하지 않을 수 있다. FDA는 추가 비임상시험을 수행하기 전에 CBER에 연락하여 이러한 용량 설정 문제를 논의할 것을 권장한다. 제안된 MVGT 제품 용량 설정의 안전성을 뒷받침하기 위하여 선행 인체 사용 경험에서 얻은 포괄적인 활성 및 안전성 자료를 제출하여야 한다.

In situations where previous human data exist, and depending on the relevance of those data, the conduct of additional preclinical studies may not be necessary to support the starting dose and/or the dose-escalation scheme. FDA recommends that you contact CBER to discuss these dosing issues prior to conducting additional preclinical studies. You should provide comprehensive activity and safety data from the previous human experience to support the safety of the proposed dosing of the MVGT product.

MVGT 제품의 임상개발은 광범위한 의학적 상태에서의 초기 시험을 포함할 수 있다. 이러한 상태는 쉽게 치료되는 비교적 양성인 상태부터 치료 선택지가 제한된 치명적·장애성 질환의 진행 단계까지 이르며, 이용 가능한 치료법이 없는 희귀 유전질환도 포함한다. 일반적으로 초기 단계 시험의 선정기준은 추구하는 치료 적응증과 관련된 적절한 질병 상황을 규정하여야 한다. MVGT 제품의 내재적 성질이나 알레르기 유발 성질로 인한 위험이 비교적 적은 대상군의 선정을 고려하여야 한다. 예를 들면 다음과 같다.

The clinical development of MVGT products may involve initial testing in a wide spectrum of medical conditions. These range from relatively benign conditions that are easily treated to advanced stages of fatal or disabling diseases with only limited treatment options, and also include rare genetic diseases without available treatments. In general, the eligibility criteria for early-phase trials should define an appropriate disease setting that is relevant to the treatment indication being pursued. You should consider selection of a population with relatively reduced risks from the intrinsic or allergenic properties of the MVGT product. For example:

초기 단계 임상시험의 용량 선정과 투여 일정은 MVGT 제품과 관련된 위험에 상당한 영향을 줄 수 있다. 이러한 잠재적 위험은 이 가이던스의 CMC 부분과 비임상 부분에서 논의하였다. 사람 대상자에 대한 위험을 최소화하기 위하여, 비임상 개념증명시험과 안전성시험의 결과는 초기 임상 용량 수준, 용량 증가 방식 및 투여 일정의 선정에 도움이 될 수 있다. 의뢰자는 MVGT 제품의 초기 단계 시험을 뒷받침하는 데 필요한 비임상 자료를 논의하기 위하여 제품 개발 초기에 FDA와 적극적으로 협의할 것을 권한다.

The dose selection and dosing schedule in early-phase clinical trials may substantially impact the risks associated with the MVGT product. These potential risks have been discussed in the CMC and preclinical sections of this guidance. To minimize the risks to human subjects, the results of preclinical proof-of-concept and safety studies can help guide the selection of the initial clinical dose level, dose-escalation scheme, and dosing schedule. Sponsors are encouraged to actively engage with the FDA early in product development to discuss the preclinical data needed to support early-phase trials for MVGT products.

초회 용량, 용량 증가 방식 및 투여 일정은 용량 증가 계획에 제시된 근거와 정당성이 충분하다면 기존 임상 자료로도 뒷받침될 수 있다. 용량제한독성(DLT), 최대내성용량(MTD) 및 권장 제2상 용량(RP2D)에 대한 적절한 정의도 용량 증가와 관련된 위험을 최소화한다. 이러한 정의에 MVGT와 관련된 특정 위험을 포함하는 것을 고려한다. 예를 들면 다음과 같다.

The starting dose, dose-escalation scheme, and dosing schedule may also be supported by previous clinical data, if the rationale and justification provided for the dose-escalation plan are adequate. Appropriate definitions for dose-limiting toxicities (DLTs), maximum tolerated dose (MTD), and recommended Phase 2 dose (RP2D) also minimize risks associated with dose escalation. Consider including specific MVGT-related risks in these definitions. For example:

시험 중단 규칙과 개별 대상자에 대한 "투여 중단" 기준은 초기 단계 임상시험의 안전성을 높인다. MVGT와 관련된 위험 감소 절차의 예로는 예상되는 감염 위험(예: 혐기성 MVGT 제품 시험에서의 농양 형성, 균혈증)의 과도한 발생률이나 중증도에 근거한 시험 중단 규칙이 있다.

Study stopping rules and “off-treatment” criteria for individual subjects enhance the safety of an early-phase clinical trial. An example of an MVGT-related risk reduction procedure includes study stopping rules based on excessive rates or severity of expected infectious risks (e.g., abscess formation in studies of anaerobic MVGT products; septicemia).

안전성 모니터링 계획은 선행 비임상 및 임상 경험에서 확인된 해당 MVGT 제품과 전이유전자 산물에 관련된 잠재적 위험을 고려하여야 한다. 구체적인 모니터링 계획의 예는 다음과 같다.

Safety monitoring plans should consider the potential risks associated with the specific MVGT product and the transgene product as identified in the previous preclinical and clinical experience. Examples of specific monitoring plans include the following:

초기 단계 임상시험에서는 MVGT 제품의 배출 모니터링이 권장된다. 배출 모니터링은 충분한 횟수의 연속 측정에서 MVGT 제품의 존재가 확인되지 않을 때까지 계속하여야 한다. 시료(예: 체내 분비물 및/또는 배설물)의 선택은 해당 MVGT 제품과 제안된 투여 경로에 따라 달라질 수 있다. 추가 정보는 FDA의 배출시험 가이던스를 참조한다(참고문헌 12).

For early-phase clinical trials, monitoring for shedding of MVGT products is recommended. Monitoring for shedding should be continued until after adequate successive measurements do not demonstrate the presence of the MVGT product. The choice of samples (e.g., bodily secretions and/or excretions) may depend on the specific MVGT product and the proposed route of administration. Please refer to FDA’s Shedding Studies Guidance for additional information (Ref. 12).