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바이러스 또는 세균 기반 유전자치료제 및 종양용해 제품의 배출 시험 설계와 분석

Design and Analysis of Shedding Studies for Virus or Bacteria-Based Gene Therapy and Oncolytic Products

분야
FDA
단계
최종
발행일
2015년 8월 27일
FDA 영문 원문 PDF

제약바이오의 정석이 제공하는 FDA 가이던스 한글 번역본이며, 원문과 차이가 있으면 원문을 우선시합니다. 가이던스는 법적 구속력이 없는 FDA의 현재 견해입니다.

이수혁 선생님의 Summary

이 가이던스는 바이러스나 세균을 바탕으로 만든 유전자치료제(VBGT 제품)와 종양용해 제품이 환자 몸에서 밖으로 나오는 현상, 즉 배출(shedding)을 어떻게 시험하고 분석할지 알려 주는 FDA 문서예요.

배출은 대변·소변·침·비인두액이나 피부의 상처를 통해 제품이 방출되는 것을 말해요. 투여 부위에서 몸 안으로 퍼지는 체내분포와는 다른 개념이니 구분해서 봐 두면 좋아요.

비임상과 임상 단계에서 배출 데이터를 언제 모을지, 검체는 무엇을 얼마나 자주 어떻게 보관해 채취할지, qPCR과 감염성 시험을 어떻게 조합할지, 그리고 그 결과로 투여받지 않은 사람에게 전파될 가능성을 어떻게 평가할지를 차례로 다뤄요.

실무에서는 7장 B의 검체 채취 계획(투여 직후 1·3·7·10일 뒤 매주, 검출한계(LOD) 이하 연속 3회까지)과 8장의 분석법 선택 기준, 10장의 배출 시험 보고서에 담을 항목 목록을 가장 자주 찾게 될 거예요.

2014년 7월 초안을 최종본으로 확정한 문서예요. 제품마다 고려할 점이 달라서 개발 초기에 CBER의 세포·조직·유전자치료제실(OCTGT)과 미리 상의하라고 권하고 있어요.

이 가이던스는 이 주제에 관한 FDA의 현재 견해를 나타낸다. 이 가이던스는 누구에게도 어떠한 권리를 만들지 않으며, FDA나 일반 대중을 구속하지 않는다. 적용 법률과 규정의 요건을 충족한다면 다른 접근 방법을 사용할 수 있다. 다른 접근 방법을 논의하려면 이 가이던스 표지에 적힌 담당 FDA 직원에게 연락한다.

This guidance represents the current thinking of the Food and Drug Administration (FDA or Agency) on this topic. It does not establish any rights for any person and is not binding on FDA or the public. You can use an alternative approach if it satisfies the requirements of the applicable statutes and regulations. To discuss an alternative approach, contact the FDA staff responsible for this guidance as listed on the title page.

I. 서론I. INTRODUCTION

생물의약품평가연구센터(CBER) 세포·조직·유전자치료제실(OCTGT)은 바이러스 또는 세균 기반 유전자치료제(VBGT 제품)1와 종양용해 바이러스 또는 세균(종양용해 제품)2의 의뢰자에게 비임상 및 임상 개발 동안 배출(shedding) 시험을 수행하는 방법에 관한 권고를 제공하기 위하여 이 가이던스를 발행한다. 이 가이던스에서 “배출(shedding)”이란 환자에게서 VBGT 제품 또는 종양용해 제품이 다음 경로 중 하나 또는 전부를 통하여 방출되는 것을 말한다: 배설물(대변), 분비물(소변, 침, 비인두액 등), 또는 피부(농포, 궤양, 상처)를 통한 방출.

The Center for Biologics Evaluation and Research (CBER)/Office of Cellular, Tissue, and Gene Therapies (OCTGT) is issuing this guidance to provide you, sponsors of virus or bacteria-based gene therapy products (VBGT products)1 and oncolytic viruses or bacteria (oncolytic products)2 with recommendations on how to conduct shedding studies during preclinical and clinical development. For purposes of this guidance, the term “shedding” means release of VBGT or oncolytic products from the patient through one or all of the following ways: excreta (feces); secreta (urine, saliva, nasopharyngeal fluids etc.); or through the skin (pustules, sores, wounds).

배출은 체내분포(biodistribution)와 구별되는데, 체내분포는 제품이 투여 부위에서 환자 체내로 어떻게 퍼지는지를 설명하는 반면 배출은 제품이 환자의 몸에서 어떻게 배설 또는 방출되는지를 설명하기 때문이다. 배출은 투여받은 사람에게서 투여받지 않은 사람(예: 밀접 접촉자, 보건의료 전문가)에게 VBGT 제품 또는 종양용해 제품이 전파될 가능성을 일으킨다.3 이 가이던스는 비임상 및 임상 개발 동안 VBGT 제품과 종양용해 제품의 배출 데이터를 어떻게, 언제 수집하여야 하는지, 그리고 배출 데이터를 투여받지 않은 사람에 대한 전파 가능성을 평가하는 데 어떻게 사용할 수 있는지에 관한 FDA의 현재 견해를 나타낸다. 이 가이던스는 2014년 7월자 같은 제목의 초안 가이던스를 최종화한 것이다.

Shedding is distinct from biodistribution because the latter describes how a product is spread within the patient’s body from the site of administration while the former describes how it is excreted or released from the patient’s body. Shedding raises the possibility of transmission of VBGT or oncolytic products3 from treated to untreated individuals (e.g., close contacts and health care professionals). This guidance represents FDA’s current thinking on how and when shedding data should be collected for VBGT and oncolytic products during preclinical and clinical development and how shedding data can be used to assess the potential for transmission to untreated individuals. This guidance finalizes the draft guidance of the same title dated July 2014.

1 유전자치료제는 전달된 유전물질의 전사 및/또는 번역에 의하여, 또는 숙주 유전체에 통합됨으로써 그 효과를 나타내며 핵산, 바이러스 또는 유전자 조작 미생물의 형태로 투여되는 모든 제품이다. 이 제품은 생체내(in vivo)에서 세포를 변형하는 데 사용될 수 있고, 수여자에게 투여하기 전에 생체외(ex vivo)에서 세포에 전달될 수도 있다.

1 Gene therapy products are all products that mediate their effects by transcription and/or translation of transferred genetic material and/or by integrating into the host genome and that are administered as nucleic acids, viruses, or genetically engineered microorganisms. The products may be used to modify cells in vivo or transferred to cells ex vivo before administration to the recipient.

2006년 11월자 FDA 가이던스 “Guidance for Industry: Gene Therapy Clinical Trials - Observing Subjects for Delayed Adverse Events”의 III항을 참조한다. http://www.fda.gov/biologicsbloodvaccines/guidancecomplianceregulatoryinformation/guidances/cellularandgenetherapy/ucm072957.htm.

See section III. of FDA’s guidance entitled “Guidance for Industry: Gene Therapy Clinical Trials - Observing Subjects for Delayed Adverse Events” dated November 2006. http://www.fda.gov/biologicsbloodvaccines/guidancecomplianceregulatoryinformation/guidances/cellularandgenetherapy/ucm072957.htm.

2 종양용해 제품은 종양세포의 용해를 매개하는 치료제로 사용되는 복제 가능 바이러스 또는 분열하는 세균을 말한다. 일부 종양용해 제품은 외래 유전자(면역조절 유전자, 종양용해를 증강하는 유전자 등)를 보유하며, 숙주에서 이러한 외래 유전자의 전사 및/또는 번역을 통하여 항종양 효과의 일부를 매개한다. 따라서 외래 유전자를 보유한 종양용해 제품은 유전자치료제로도 분류될 수 있다.

2 Oncolytic products refer to replication competent viruses or dividing bacteria that are used as therapeutic agents to mediate lysis of tumor cells. Some oncolytic products carry foreign genes (immune modifying genes, genes that enhance oncolysis etc.), and mediate part of their anti-tumor effect by transcription and/or translation of these foreign genes in the host. Hence, oncolytic products that carry foreign genes can also be classified as gene therapy products.

3 전파는 VBGT 제품 또는 종양용해 제품이 온전한 바이러스 또는 세균의 형태로 배출되는 경우에 일어날 수 있으나, 핵산 조각과 같은 바이러스 또는 세균의 분해 산물로 배출되는 경우에는 일어나지 않는다.

3 Transmission could occur if the VBGT or oncolytic product is shed in the form of intact viruses or bacteria but not when shed as viral or bacterial degradation products such as nucleic acid fragments.

이 가이던스를 포함한 FDA의 가이던스 문서는 법적으로 집행 가능한 책임을 설정하지 않는다. 가이던스는 특정 규정상 또는 법령상 요건이 인용된 경우를 제외하고는 해당 주제에 관한 FDA의 현재 견해를 설명하는 것이며 권고로만 보아야 한다. FDA 가이던스에서 should 라는 낱말을 쓴 것은 어떤 사항이 제안 또는 권고된다는 뜻이며 요구되는 것은 아니다.

FDA’s guidance documents, including this guidance, do not establish legally enforceable responsibilities. Instead, guidances describe the FDA’s current thinking on a topic and should be viewed only as recommendations, unless specific regulatory or statutory requirements are cited. The use of the word should in FDA’s guidances means that something is suggested or recommended, but not required.

II. 적용 범위II. SCOPE

이 가이던스가 적용되는 제품은 OCTGT가 심사하는 VBGT 제품과 종양용해 제품이다. 이 가이던스는 배출 데이터를 어떻게, 언제 수집하여야 하는지와 배출 데이터를 투여받지 않은 사람에 대한 전파 가능성을 평가하는 데 어떻게 사용할 수 있는지를 포함한 배출 시험에 중점을 둔다.

The products covered by this guidance are VBGT and oncolytic products that OCTGT reviews. The focus of this guidance is shedding studies, including both how and when shedding data should be collected and how shedding data can be used to assess the potential for transmission to untreated individuals.

이 가이던스는 OCTGT가 함께 심사하는 플라스미드, 펩타이드, 유전자 변형 포유류 세포는 다루지 않는데, 이들은 VBGT 제품이나 종양용해 제품과 달리 감염성이나 전파 가능성이 없기 때문이다. 또한 이 가이던스는 배출에 기인할 수 있는 이상사례를 포함하여 이상사례 정보의 수집이나 제출도 다루지 않는다. 이상사례 정보의 수집과 FDA 제출에 관한 사항은 미국 연방규정집(CFR) 제21편 제312부, 특히 21 CFR 312.32와 제600부, 특히 21 CFR 600.80의 규정을 참조한다.

This guidance does not cover plasmids, peptides, and genetically modified mammalian cells that OCTGT also reviews because, unlike VBGT and oncolytic products, there is no potential for plasmids, peptides, and genetically modified mammalian cells to be infectious or transmissible. This guidance also does not address collection or submission of adverse event information, including those adverse events that could be attributed to shedding. Please see the regulations at Title 21 of the Code of Federal Regulations (CFR) Part 312, specifically 21 CFR 312.32 and 21 CFR Part 600, specifically 21 CFR 600.80, for information on the collection and submission to FDA of adverse event information.

마지막으로, 배출 평가는 환경에 대한 잠재적 위험을 이해하는 데 활용될 수 있으나, 이 가이던스의 적용 범위에는 특정 VBGT 제품 또는 종양용해 제품과 관련된 환경 문제 가능성에 관한 배출은 포함되지 않는다. 이 주제에 관한 더 자세한 정보는 2015년 3월자 FDA 가이던스 “Determining the Need for and Content of Environmental Assessments for Gene Therapies, Vectored Vaccines, and Related Recombinant Viral or Microbial Products; Guidance for Industry”를 참조할 수 있다.4

Finally, while assessment of shedding can be utilized to understand the potential risk to the environment, the scope of this guidance does not include shedding as it may relate to potential environmental concerns with respect to a specific VBGT or oncolytic product. For more information on this topic, you may wish to consult FDA’s guidance document entitled “Determining the Need for and Content of Environmental Assessments for Gene Therapies, Vectored Vaccines, and Related Recombinant Viral or Microbial Products; Guidance for Industry” dated March 2015.4

4 다음에서 확인할 수 있다. http://www.fda.gov/BiologicsBloodVaccines/GuidanceComplianceRegulatoryInformation/Guidances/CellularandGeneTherapy/ucm401869.htm.

4 Available at http://www.fda.gov/BiologicsBloodVaccines/GuidanceComplianceRegulatoryInformation/Guidances/CellularandGeneTherapy/ucm401869.htm.

III. 배경III. BACKGROUND

VBGT 제품과 종양용해 제품은 감염성 바이러스 또는 세균에서 유래한다. 일반적으로 이러한 제품은 유래 방법 및/또는 제품 개발 동안 가한 변형이 약독화를 가져오므로, 모균주 또는 모바이러스 균주만큼 감염성이 높거나 병원성이 강하지 않다. 따라서 이러한 제품은 모균주에 의한 자연 감염 때보다 적게 배출될 가능성이 높다. 그럼에도 배출된 VBGT 제품 또는 종양용해 제품이 감염성을 가질 수 있다는 가능성은 투여받지 않은 사람에게 전파될 위험과 관련한 안전성 우려를 일으킨다. 이 위험을 이해하기 위하여 허가 전에 대상 환자집단에서 수행하는 배출 시험이 적절할 수 있다.

VBGT and oncolytic products are derived from infectious viruses or bacteria. In general, these products are not as infectious or as virulent as the parent strain of virus or bacterium because of, in part, the derivation methods and/or modifications made during product development that lead to attenuation. Hence, it is likely that these products are shed to a lesser extent than during natural infection by the parent strain. Nonetheless, the possibility that the shed VBGT or oncolytic product may be infectious raises safety concerns related to the risk of transmission to untreated individuals. To understand this risk, shedding studies that are conducted in the target patient population(s) may be appropriate before licensure.

통상적으로 임상 배출 시험은 독립적인 시험이 아니라 안전성 또는 유효성 시험의 설계에 통합된다. 배출 시험의 설계에 영향을 줄 수 있는 제품별 요인과 환자별 요인이 많으므로, 의뢰자는 자사 제품에 대한 구체적인 권고를 받기 위하여 제품 개발 초기 단계에 OCTGT와 협의하여야 한다.

Typically, clinical shedding studies are not stand-alone studies but are integrated into the design of a safety or efficacy trial. Because there are many product-specific factors and patient-specific factors that can influence the design of a shedding study, sponsors should consult with OCTGT in the early stages of product development for specific recommendations as to their product.

IV. 제품 개발 동안 배출 데이터를 수집하는 이유IV. WHY COLLECT SHEDDING DATA DURING PRODUCT DEVELOPMENT?

과거 데이터만으로는 배출 양상을 예측하지 못할 수 있으므로, 투여받지 않은 사람에 대한 전파 가능성에 관한 정보를 제공하기 위하여 각 VBGT 제품 또는 종양용해 제품마다 배출 시험을 수행하여야 한다. 배출 데이터는 전파를 예방하는 조치를 평가하는 데 사용할 수 있다. 제품 개발 동안 수집한 배출 데이터는 대상 환자집단에서 VBGT 제품 또는 종양용해 제품의 배출 양상을 명확하고 포괄적으로 이해할 수 있게 하여야 한다. 승인된 생물의약품 허가신청(BLA)의 첨부문서(package insert)에 이러한 데이터를 기술하는 것이 적절할 수 있다는 점에 유의한다.

Shedding studies should be conducted for each VBGT or oncolytic product to provide information about the likelihood of transmission to untreated individuals because historical data alone may not be predictive of the shedding profile. Shedding data can be used to evaluate measures to prevent transmission. Shedding data collected during product development should provide a clear and comprehensive understanding of the shedding profile of VBGT or oncolytic products in the target patient population(s). Note that it may be appropriate to describe these data in the package insert for an approved Biologics License Application (BLA).

사람 배출 시험의 설계에 참고하기 위하여, VBGT 제품 또는 종양용해 제품을 투여한 동물에서 배출 데이터를 수집할 수 있다. 이러한 데이터는, 특히 투여받지 않은 사람에 대한 전파가 우려되는 경우에 사람에서의 배출 가능성과 배출 양상을 추정하는 데 도움이 될 수 있다. 그러나 이러한 데이터는 여러 이유로 사람 배출 시험을 대체할 수 없다. 예를 들어 VBGT 제품 또는 종양용해 제품이 사람에 특이적인 균주에서 유래한 경우, 동물은 사람에서의 배출 양상을 충분히 예측하지 못할 수 있다. 마찬가지로 여러 동물종·동물모델은 제품 투여 시점의 면역 상태 차이와 같이 사람에서 배출 가능성에 기여할 수 있는 환자별 요인을 충분히 반영하지 못할 수 있다(자세한 내용은 이 가이던스 VII.B항 참조).

To inform the design of human shedding studies, shedding data may be collected in animals following administration of the VBGT or oncolytic product. These data can help estimate the likelihood and potential shedding profile in humans, particularly when there is concern about transmission to untreated individuals. However, such data cannot substitute for human shedding studies for several reasons. For example, a VBGT or oncolytic product may be derived from a human-specific strain; therefore, animals may not adequately predict the shedding profile in humans. Similarly, various animal species/models may not adequately address patient-specific factors, such as differences in the immune status at the time of product administration, which may contribute to the potential for shedding in humans (for more details refer to section VII.B. of this guidance).

제품별 변수도 배출에 영향을 줄 수 있다. 예를 들어 VBGT 제품 또는 종양용해 제품의 생물학적 특성과 투여(진입) 경로는 모바이러스 균주 또는 모균주와 다를 수 있다. 구체적으로 이러한 제품은 다음과 같을 수 있다.

Product-specific variables may also affect shedding. For example, the biological characteristics and route of administration (entry) of VBGT or oncolytic products can be different from that of the parent strain of viruses and bacteria. Specifically, these products may be:

  • 이전 시험에서 사람에 대하여 특성분석되지 않았을 수 있는, 실험실 적응 야생형·약독화 또는 조작 균주에서 유래한 것.
  • 복제 가능 또는 복제 불능 바이러스. 숙주세포를 감염시키고 증폭하여 자손을 생산할 수 있는 바이러스는 복제 가능하며, 숙주세포를 감염시킬 수는 있으나 감염을 성립시키고 증폭하여 자손을 생산할 수 없는 바이러스는 복제 불능이다.
  • 분열하는 세균 및/또는 영양요구성 세균. 영양요구성 세균은 성장과 분열에 필요한 유기분자를 합성할 수 없으나, 이 분자가 필요한 다른 영양소와 함께 공급되면 세균의 성장과 분열이 일어날 수 있다.
  • 비자연적 경로로 사람의 몸에 도입되어, 그 결과 감염성, 복제, 체내 지속 및 체외 배출이 모균주와 다를 수 있는 것.
  • 도입유전자(예: 친화성 변경 유전자, 면역조절 유전자 또는 종양용해를 증강하는 유전자)를 보유하도록 조작된 것.
  • Derived from laboratory-adapted wild-type, attenuated or engineered strains that may not have been characterized in humans in prior studies.
  • Replication competent or incompetent viruses; viruses that can infect a host cell and amplify to produce progeny are replication competent and those that can infect a host cell but cannot establish an infection, amplify, and produce progeny are replication incompetent.
  • Dividing and/or auxotrophic bacteria; auxotrophic bacteria are unable to synthesize an organic molecule required for their growth and division but when this molecule is available with the other nutrients they require, growth and division of the bacteria may occur.
  • Introduced into the human body through unnatural routes and hence, the infectivity, replication, persistence and shedding from the human body may be different than that of the parental strains.
  • Engineered to carry transgenes, e.g., tropism-altering genes, immune modifying gene(s) or genes that enhance oncolysis.

V. 비임상시험에서의 배출 데이터 수집V. COLLECTION OF SHEDDING DATA IN PRECLINICAL STUDIES

비임상시험5에서 배출을 평가할지 여부는 VBGT 제품 또는 종양용해 제품의 생물학적 특성, 유래 및 유전적 구성에 근거하여 결정한다. 예를 들어 종양용해 제품 또는 복제 가능 VBGT 제품에 대하여 다음의 경우에는 비임상 배출 데이터를 요구할 수 있다.

The decision to assess shedding in preclinical studies5 is based on the biological characteristics, derivation, and genetic make-up of the VBGT or oncolytic product. For example, preclinical shedding data may be requested for an oncolytic or a replication competent VBGT product, if:

  • 사람에 대한 세균 또는 바이러스 균주가 아닌 경우처럼, 사람이 이전에 그 제품에 노출된 적이 없는 경우.
  • 제품을 사람에게 투여한 적은 있으나, 모균주와 다른 생체내 친화성을 갖도록 변형된 경우.
  • 제품을 이전에 사람에게 투여한 적은 있으나 투여 경로의 변경을 제안하는 경우.
  • 사람이 이전에 그 제품에 노출된 적이 없고, 투여 경로가 자연 노출·감염 경로와 다른 경우.
  • Humans have not been previously exposed to the product, as in the case of a non-human bacterial or viral strain.
  • The product has been administered to humans, but has been modified to achieve a different in vivo tropism than the parent strain.
  • The product has been previously administered to humans; however, a change in the route of administration is proposed.
  • Humans have not been previously exposed to the product, and the route of administration differs from the natural route of exposure/infection.

5 이러한 제품의 시험 설계를 포함한 비임상 평가에 관한 일반적인 정보는 2013년 11월자 FDA 가이던스 “Guidance for Industry: Preclinical Assessment of Investigational Cellular and Gene Therapy Products”를 참조한다. http://www.fda.gov/BiologicsBloodVaccines/GuidanceComplianceRegulatoryInformation/Guidances/CellularandGeneTherapy/ucm376136.htm.

5 For general information about preclinical assessment, including study design, of these products see FDA’s guidance entitled “Guidance for Industry: Preclinical Assessment of Investigational Cellular and Gene Therapy Products” dated November 2013, http://www.fda.gov/BiologicsBloodVaccines/GuidanceComplianceRegulatoryInformation/Guidances/CellularandGeneTherapy/ucm376136.htm.

동물종·동물모델의 사용은 동물에서 산출되는 배출 양상의 생물학적 관련성에 영향을 줄 수 있는 중요한 요인이다. 고려사항에는 시험 대상 VBGT 제품 또는 종양용해 제품에 의한 감염에 대한 동물의 허용성 또는 감수성, 그리고 감염성이나 제품 제거에 영향을 줄 수 있는 기존 면역이 포함된다.

The use of the animal species/model(s) is an important factor that can affect the biological relevance of the shedding profile generated in the animal. Considerations include the permissiveness or susceptibility of the animal to infection from the VBGT or oncolytic product under investigation, and any preexisting immunity that may affect infectivity or product clearance.

배출 데이터 수집은 안전성, 체내분포 등 다른 데이터를 수집하기 위하여 설계된 비임상시험에 포함할 수 있는 평가변수이다. 동물시험에 VBGT 제품 또는 종양용해 제품의 배출 양상 평가를 포함할지 여부는 위와 이 가이던스 I항 및 IV항에 기술한 여러 제품별 요인에 따라 달라진다. 의뢰자는 동물에서 자사 VBGT 제품 또는 종양용해 제품의 배출 양상을 산출할 필요성과 이 배출 데이터를 수집하기 위한 계획된 방법론을 논의하기 위하여, 제품 개발 프로그램 초기에 OCTGT의 약리·독성 담당자와 소통을 시작할 것을 권장한다.

Collection of shedding data is an endpoint that can be included in preclinical studies designed to collect other data, such as safety and biodistribution. The decision to include an assessment of the shedding profile of a VBGT or oncolytic product in an animal study will depend on various product-specific factors, as described above and in sections I. and IV. of this guidance. We recommend that sponsors initiate communication with the Pharmacology/Toxicology staff in OCTGT early in their product development program to discuss the need for generating a shedding profile for their VBGT or oncolytic product in animals, and the planned methodology to collect this shedding data.

VI. 배출 시험의 설계: 기본 원칙VI. DESIGN OF SHEDDING STUDIES: GUIDING PRINCIPLES

배출 시험 설계의 핵심 측면은 시험대상자에게서 채취하는 임상 검체의 선택(예: 대변, 소변, 비강 스왑), 검체 채취 빈도와 모니터링 기간, 그리고 임상 검체에서 배출된 VBGT 제품 또는 종양용해 제품의 존재를 검사하기 위하여 선택한 시험법이다(참고문헌 1). 배출 시험의 설계에 참고하기 위하여 다음을 고려하여야 한다.

The key aspects in the design of shedding studies are: the choice of clinical samples that are collected from subjects in a trial (e.g., feces, urine, nasal swabs); the frequency of sample collection and duration of the monitoring period; and the assay methodology selected to test for the presence of the shed VBGT or oncolytic product in the clinical sample (Ref. 1). To guide the design of shedding studies, the following should be considered:

A. 생물학적 특성A. Biological Characteristics

  • 복제 능력: VBGT 제품 또는 종양용해 제품이 사람 숙주에서 증식하고 증폭할 수 있는 능력은 제품이 체내에 어떻게 퍼지는지에 크게 영향을 주며, 배출의 정도와 기간을 늘릴 수 있다.

    Replication competence: The ability of the VBGT or oncolytic product to multiply and amplify in the human host greatly affects how it is disseminated in the body and may increase the extent and duration of shedding.

  • 면역원성: VBGT 제품 또는 종양용해 제품이 강한 면역반응을 유발하는 바이러스 또는 세균에서 유래한 경우, 그 제품은 면역원성이 낮은 제품보다 순환계에서 더 빨리 제거될 수 있고 더 짧은 기간 배출될 수 있다. 마찬가지로 제품을 여러 번 투여하는 경우, 면역을 유도하는 첫 투여 또는 초기 투여 이후보다 이후의 투여 주기에서 제품이 더 짧은 기간 배출될 수 있다.

    Immunogenicity: When the VBGT or oncolytic product is derived from viruses or bacteria that elicit a strong immune response, the product may be more rapidly cleared from circulation than a poorly immunogenic product, and may be shed for a shorter duration. Similarly, when a product is administered multiple times, the product may be shed for a shorter duration in the later dose cycles than after the immune-priming first or early doses.

  • 지속성과 잠복: 잠복이 가능한 종양용해 헤르페스바이러스 제품의 경우처럼 VBGT 제품 또는 종양용해 제품이 숙주에서 지속성 또는 잠복-재활성화를 나타내면 배출 시험의 기간이 더 길어질 수 있다(잠복은 바이러스가 뚜렷한 임상 증상을 일으키지 않고 숙주에 존재하는 기간이다). 이러한 제품의 배출은 간헐적이고 예측하기 어려울 수 있다.

    Persistence and latency: The duration of a shedding study may be longer if the VBGT or oncolytic product exhibits persistence or latency-reactivation in the host, as in the case of an oncolytic herpes virus product that is capable of latency (period of time during which a virus is present in the host without producing overt clinical symptoms). Shedding of such products may be intermittent and unpredictable.

  • 친화성(tropism): 제품의 친화성은 배출을 평가하기 위하여 어떤 검체를 채취하여야 하는지에 영향을 줄 수 있다. 예를 들어 친화성 변경 유전자 또는 돌연변이를 보유하도록 조작된 VBGT 제품 또는 종양용해 제품은 제품이 다른 조직이나 장기로 재표적화되기 때문에 모바이러스와 다른 배출 양상을 나타낼 수 있다.

    Tropism: Tropism of the product may affect what samples should be collected to assess shedding. For example, VBGT or oncolytic products that are engineered to carry tropism modifying gene(s) or mutation(s) may exhibit an altered shedding profile than the parent virus because of retargeting of the product to different tissues or organs.

  • 제품 약독화의 안정성: VBGT 제품 또는 종양용해 제품은 정상(비종양) 세포에서의 복제에 대하여, 또는 사람 숙주에서의 병원성이나 잠복의 상실에 대하여 약독화되는 것이 일반적이다. 그러나 환자에서 재조합 또는 복귀 가능성이 더 높은 일부 제품에서는 배출 양상 및/또는 배출되는 물질이 달라질 수 있다.

    Stability of product attenuation: It is common for VBGT or oncolytic products to be attenuated either for replication in normal (non-tumor) cells, or for loss of virulence or latency in the human host. However, for some products that have a higher potential for recombination or reversion in the patient, the shedding pattern and/or what is shed may change.

B. 투여 경로B. Route of Administration

VBGT 제품 또는 종양용해 제품의 친화성에 더하여, 배출 시험에서 채취할 검체 종류를 선택할 때 제품의 투여 경로를 고려하여야 한다. 예를 들어 종양용해 바이러스를 피내 경로로 투여받은 환자의 배출을 평가하려면, 배출 평가에 통상적으로 쓰는 다른 검체(예: 소변, 대변, 침)에 더하여 주사 부위의 피부 스왑을 채취할 것을 권장한다. 마찬가지로 종양용해 바이러스를 흡입 또는 비강내 경로로 투여하는 경우에는 비인두 세척액을 채취할 것을 권장한다.

In addition to the tropism of the VBGT or oncolytic product, the route of product administration should be considered in the selection of sample types to collect in a shedding study. For example, to assess shedding in patients administered an oncolytic virus by the intradermal route, we recommend the collection of skin swabs at the site of injection, in addition to the other samples routinely assessed for shedding (e.g., urine, feces, and saliva). Similarly, we recommend the collection of nasopharyngeal washes when an oncolytic virus is administered by inhalation or via the intranasal route.

VII. 임상시험에서의 배출 데이터 수집VII. COLLECTION OF SHEDDING DATA IN CLINICAL STUDIES

임상시험에서 수집한 배출 데이터는 대상 환자집단에서 제품의 배출 양상을 제시하며, 투여받지 않은 사람에 대한 전파 가능성을 추정하는 데 사용된다. 배출 양상에 따라 임상시험계획(IND) 시험의 임상시험자 자료집과 동의서에 배출에 관한 정보를 포함하는 것이 적절할 수 있다. 또한 배출 양상에 따라 허가된 제품의 첨부문서에 배출 데이터를 포함하는 것이 적절할 수 있다. 이 정보는 VBGT 제품 또는 종양용해 제품의 사용에 따라 배출이 일어날 수 있는지, 제품이 투여받지 않은 사람에게 전파될 가능성이 있는지, 그리고 그러한 전파를 예방하기 위하여 취할 조치가 무엇인지를 환자와 의사에게 알려 준다.

Shedding data collected in clinical studies provides a shedding profile of a product in the target patient population and is used to estimate the potential of transmission to untreated individuals. Depending on the shedding profile, it may be appropriate to include the information on shedding in the Investigator Brochure and in the Informed Consent for Investigational New Drug (IND) studies. Depending on the shedding profile, it also may be appropriate to include shedding data in the package insert for licensed products. This information will inform patients and physicians if shedding could occur with the use of a VBGT or oncolytic product, the potential for transmission of the product to untreated individuals, and of the measures to take to prevent such transmission.

A. 임상시험에서 배출 데이터를 언제 수집하여야 하는가A. When to Collect Shedding Data in Clinical Studies?

  • 복제 가능으로 분류되는 VBGT 제품과 종양용해 제품에 대하여는 의뢰자가 제1상 시험에서 배출 데이터 수집을 시작할 것을 권장한다. 복제 가능 제품은 감염성 바이러스 또는 세균으로 방출될 가능성이 더 높다는 점을 고려하면, 의뢰자는 배출을 더 잘 특성분석하기 위하여 용량과 투여 요법이 정해진 이후 제2상과 제3상 동안에도 배출 데이터 수집을 계속해야 할 수 있다.
  • 복제 불능 또는 복제 결핍으로 분류되는 VBGT 제품에 대하여는 의뢰자가 용량과 투여 요법이 정해진 이후 제품 개발의 후반(예: 제2상 시험 동안)에 배출 데이터를 수집할 것을 권장한다. 복제 가능 제품의 배출과 비교하여, 복제 불능 또는 복제 결핍 제품의 배출은 적고 기간이 제한적이며 감염성 바이러스 또는 세균으로 방출될 가능성이 더 낮을 것으로 예상된다.
  • 초기 상 시험에서 배출 데이터를 수집한 뒤에 용량, 경로, 투여 요법(제품 투여 빈도, 병용요법, 전처치 요법 등) 또는 적응증이 변경되는 일은 드물지 않다. 이러한 변경은 제품이 배출되는 방식을 바꿀 수 있다. 이러한 경우 초기 임상시험에서 수집한 배출 데이터는 현재 상태의 제품 배출 양상을 예측하는 데 충분하지 않거나 관련성이 없을 수 있다. 경로, 용량 요법, 적응증이 중추적 임상시험과 동일한 후속 임상시험에서 추가 데이터를 수집하여야 한다.
  • For VBGT and oncolytic products classified as replication competent, we recommend that sponsors begin collecting shedding data in Phase 1 trials. Considering that replication competent products are associated with a higher potential for release as infectious viruses or bacteria, sponsors may need to continue collecting shedding data during Phase 2 and Phase 3, after a dose and regimen have been determined, to better characterize shedding.
  • For VBGT products that are classified either as replication incompetent or replication deficient, we recommend that sponsors collect shedding data later in product development (e.g., during Phase 2 studies), after a dose and regimen have been determined. Compared to shedding of replication competent products, shedding of replication incompetent or replication deficient products is expected to be low, for a limited duration, and associated with a lower potential for release as infectious viruses or bacteria.
  • After shedding data are collected in early phase studies, it is not uncommon that dose, route, regimen (frequency of product administration, concomitant therapy, preconditioning regimens, etc.), or indication are modified. These changes can alter how product is shed. In such cases, shedding data collected in early clinical trials may not be adequate or relevant to predict the shedding profile of the product in its current state. Additional data should be collected in subsequent clinical trials where the route, dose regimen, and indication are the same as in the pivotal trial.

B. 시험 설계B. Study Design

임상시험에서 배출 데이터를 수집하는 계획은 동일하거나 유사한 제품에 대한 기존 임상 경험에 근거할 수 있으나, 최초 사람 대상 VBGT 제품 또는 종양용해 제품의 경우처럼 그러한 경험이 없을 때에는 동물에서 산출한 배출 양상이 참고가 될 수 있다. 의뢰자는 배출 데이터를 수집하기 위한 검체 채취 계획을 임상시험에 전향적으로 설계하여 포함할 것을 권장한다.

The plan to collect shedding data in clinical studies can be based on prior clinical experience with the same or similar product, but when there is no such experience, as in the case of first-in-human VBGT or oncolytic products, the shedding profile generated in animals can be informative. We recommend that sponsors prospectively design and incorporate the sampling plan in the clinical study to collect shedding data.

검체 채취 계획의 설계에는 네 가지 중요한 선택이 있다.

There are four critical choices in the design of a sampling plan:

  • 검체 채취 빈도
  • 검체 채취 기간
  • 채취하는 검체의 종류
  • 채취한 검체 종류별 보관 조건
  • Frequency of sample collection;
  • Duration of sample collection;
  • Type(s) of samples collected; and
  • Storage conditions for types of samples collected.

그러나 이 가이던스 VI항에서 앞서 기술하고 아래에서 더 자세히 설명하는 것처럼, 이러한 선택에 영향을 줄 수 있는 측면이 많다.

However, there are many aspects that can influence these choices, as described earlier in section VI. of this guidance and further elaborated below.

  • 검체 채취 빈도: 배출은 VBGT 제품 또는 종양용해 제품의 복제 능력과 무관하게 제품 투여 직후의 기간에 일어날 가능성이 가장 높다. 복제 가능 제품의 경우 생체내 증식·증폭의 결과로 투여 후 수일 내지 수주에 두 번째 배출 정점이 관찰될 수 있다. 따라서 검체 채취는 제품 투여 직후에 시작하여, 배출 양상을 정확히 포착하기 위하여 치료 후 초기 몇 주 동안 자주 채취하여야 한다(예: 1일, 3일, 7일, 10일에 채취한 뒤 매주 채취). 검체 분석은 배출 시험법의 검출한계(LOD) 이하인 데이터 점이 연속 3회 얻어질 때까지 계속하여야 한다. 배출 수준이 시험법의 LOD에 도달하지 않으나 지속적인 감소 추세가 있는 경우에는, 연속된 데이터 점이 적어도 3회 평탄역에 도달하였음을 결과가 입증할 때까지 채취를 계속하여야 한다.

    Frequency of sample collection: Shedding is most likely to occur in the period immediately following product administration, irrespective of replication competence of the VBGT or oncolytic product. A second peak of shedding may be noted in the days/weeks after administration of a replication competent product as a result of its multiplication/amplification in vivo. Accordingly, sampling should start immediately after product administration, with frequent sampling during the initial weeks following treatment to capture the shedding pattern accurately (e.g., sampling on day 1, 3, 7, 10 and then weekly). Analysis of samples should continue until three consecutive data points are obtained at or below the limit of detection (LOD) of the shedding assay. If the level of shedding does not reach the LOD of the assay but there is a continual decreasing trend, collection should continue until the results demonstrate that a plateau has been reached in at least three consecutive data points.

  • 검체 채취 기간(배출 모니터링 기간):

    Duration of sample collection (monitoring period for shedding):

    • 일반적으로 VBGT 제품 또는 종양용해 제품이 복제 가능 바이러스 또는 세균인 경우, 배출 모니터링 기간(검체 채취 기간)은 제품이 복제 불능 또는 복제 결핍인 경우보다 길다. 이는 생체내 증식 또는 증폭과 관련된 두 번째 배출 정점을 포착하고자 하기 때문이다.

      In general, when the VBGT or oncolytic product is a replication competent virus or bacteria, the monitoring period for shedding is longer (for sample collection) as compared to when the product is replication incompetent or replication deficient. This is because you will want to capture the second peak of shedding associated with multiplication or amplification in vivo.

    • 환자집단의 면역 상태를 고려하여야 한다. 면역이 저하된 환자는 면역이 정상인 환자보다 배출 기간이 길거나 배출 양상 자체가 다를 수 있다. 복제 가능 제품의 경우, 이러한 제품이 면역억제 화학요법을 받은 암환자에게 많이 사용되므로 환자집단의 면역 능력은 관련 있는 요인이다. 복제 가능 VBGT 제품 또는 종양용해 제품을 투여받은 면역억제 환자는 지속적으로 감염된 상태가 될 수 있고 장기간 제품을 배출할 수 있다(참고문헌 2). 따라서 복제 가능 VBGT 제품 또는 종양용해 제품을 투여받은 면역억제 환자에 대하여는 배출 모니터링 기간이 더 길어질 수 있다.

      The immune status of the patient population should be considered. Patients who are immune compromised may have an extended or even different shedding profile than their immune competent counterparts. For replication competent products, the immune competence of the patient population is a relevant factor because many of these products are used in cancer patients who have had immunosuppressive chemotherapy. When treated with replication competent VBGT or oncolytic products, immunosuppressed patients may become persistently infected and may shed the product for extended periods of time (Ref. 2). Therefore, the monitoring period for shedding may be longer for immunosuppressed patients treated with a replication competent VBGT or oncolytic product.

    • VBGT 제품 또는 종양용해 제품을 여러 주기로 투여하는 경우 또는 기존 면역이 있는 경우에는 제품 특이적 면역반응 때문에 배출 기간이 짧아질 수 있다. 단회 투여 데이터는 여러 번 투여한 이후의 검체 채취 시점을 정하는 데 참고로 사용할 수 있다.

      When a VBGT or oncolytic product is administered in multiple cycles, or when there is pre-existing immunity, the duration of shedding may be shortened because of product-specific immune responses. Data from single dose administration of product may be used to guide the timing of sample collection following multiple administrations.

    • 종양용해 제품이 잠복 재활성화 가능성이 있는 바이러스에 기반한 경우에는, 임상 징후가 나타날 때 즉 재활성화로 인한 감염 징후를 환자가 보일 때 배출 분석을 위한 검체를 추가로 채취할 것을 권장한다.

      If an oncolytic product is based on a virus that has the potential for latency reactivation, we recommend the collection of additional samples for shedding analysis when clinical signs warrant, i.e., when patients show signs of infection due to reactivation.

  • 채취하는 검체의 종류: 배출을 평가하기 위하여 채취하는 임상 검체의 종류(예: 소변, 대변 스왑, 침 등)는 제품의 투여 경로, 바이러스 또는 세균의 친화성, 제품이 유래한 모바이러스 또는 모균주의 자연 전파 및 배출 경로(이 가이던스 VI항에 기술), 비임상시험의 체내분포 또는 배출 데이터 등 여러 요인에 따라 달라진다. 예를 들어 종양용해 헤르페스바이러스 제품을 피부암 치료를 위하여 피내 투여하는 경우, 헤르페스바이러스의 자연 전파 경로가 그것이므로 감염된 딱지·피부 분비물을 통하여 종양용해 헤르페스바이러스 제품이 전파될 가능성이 있다. 이 경우 주사 부위의 피부 스왑 또는 드레싱을 배출에 대하여 분석하여야 한다.

    Type(s) of samples collected: The types of clinical samples (e.g., urine, fecal swabs, saliva, etc.) collected to assess shedding depend on a variety of factors including the route of administration of the product, the tropism of the virus or bacteria, the natural route of transmission and shedding of the parent virus or bacterium from which the product is derived (as described in section VI. of this guidance), and biodistribution or shedding data from preclinical studies. For example, if an oncolytic herpes virus product is administered intradermally for treatment of skin cancers, there is the potential of transmission of the oncolytic herpes virus product through infected scabs/skin secretions because that is a natural route of transmission for herpes viruses. In this case, skin swabs or dressing from injection sites should be analyzed for shedding.

    마찬가지로 종양용해 아데노바이러스 제품을 비강내 투여하는 경우에는 호흡기 분비물을 통하여 아데노바이러스 제품이 전파될 가능성이 있으므로, 배출 시험에서 비인두 스왑 또는 세척액을 채취하여야 한다. 친화성이 변경된 제품의 경우, 모바이러스 또는 모균주의 전파 및 배출 경로에 관한 지식은 검체 채취를 정하는 데 관련성이 없거나 충분하지 않을 수 있다.

    Likewise, if an oncolytic adenovirus product is administered intranasally, there is the possibility of transmission of the adenovirus product through respiratory secretions, therefore, nasopharyngeal swabs or washes should be collected in the shedding study. For tropism-modified products, knowledge about the route of transmission and shedding of the parent virus or bacterium may not be relevant or sufficient to guide in sample collection.

  • 혈액은 통상적으로 배출에 대하여 분석하지 않으나, 투여 부위로부터 제품이 퍼지는 정도와 제품 제거의 신속성을 이해하기 위하여 약동학 분석의 일부로 채취하여야 한다. 이 정보는 국소 투여되는 제품(예: 종양내, 근육내, 뇌내, 망막하 경로)에서 혈관 내 확산이 제한적일 것으로 예상되는 경우 제품 배출 정도를 평가하는 데 특히 유용할 수 있다.

    Blood is not typically analyzed for shedding but should be collected as part of pharmacokinetic analysis to understand the extent of product dissemination from the site of administration and the rapidity of product clearance. This information can be particularly useful to assess the extent of product shedding when limited vascular spread is expected for products administered locally (e.g., intratumoral, intramuscular, intracranial, subretinal routes).

  • 채취한 검체 종류별 보관 조건: 제품 특이적 핵산의 분해 또는 제품 특이적 감염성이나 세균 생존력의 손실을 최소화하기 위하여, 검체 종류별로 적절한 보관 조건을 확립할 필요가 있다. 검체가 제품 특이적 핵산에 대하여 양성으로 판정된 후 수행하는 제품 특이적 감염성 시험 등 서로 다른 시험을 위하여 검체를 여러 분할량으로 나누어 둘 필요가 있을 수 있다.

    Storage conditions for type(s) of samples collected: The appropriate storage conditions for different type(s) of samples need to be established in order to minimize degradation of product-specific nucleic acids or loss of product-specific infectivity or bacterial viability. Multiple aliquots of samples may be needed for different tests, such as for a product-specific infectivity assay after a sample is scored positive for product-specific nucleic acids.

VIII. 배출을 측정하는 분석법VIII. ANALYTICAL ASSAYS TO MEASURE SHEDDING

배출을 측정하는 분석법은 핵산의 검출 또는 감염성 바이러스 입자나 분열하는 세균의 존재 확인을 통하여 임상 검체에서 제품을 검출하도록 설계된다. 배출 시험법은 설계와 출력(시험 판독의 성질)에 따라 성능과 적합성이 크게 다를 수 있다. 따라서 배출 시험법의 선택은 수집되는 데이터의 품질에 크게 영향을 줄 수 있으며, 의미 있는 배출 데이터, 즉 제품의 완전한 배출 양상을 제시하고 투여받지 않은 사람에 대한 전파 가능성을 추정하는 데 사용할 수 있는 데이터를 산출하는 데 중요하다.

An analytical assay that measures shedding is designed to detect product in the clinical sample, either by detection of nucleic acids or for the presence of infectious viral particles or dividing bacteria. Based on the design and output (nature of the assay readout), shedding assays can vary greatly in their performance and suitability. Hence, the choice of a shedding assay can greatly affect the quality of the data collected, and is important in the generation of meaningful shedding data, i.e., data that provides a complete shedding profile for a product and can be used to estimate the potential for transmission to untreated individuals.

의뢰자는 배출을 측정하는 분석법을 선택할 때 다음을 고려할 것을 권장한다.

We recommend that sponsors consider the following in the selection of the analytical assay to measure shedding:

  • 배출을 측정하는 데 사용하는 시험법 중 적어도 하나는 정량적이어야 한다. 의뢰자는 배출을 정량적으로 평가할 수 있도록 VBGT 제품 또는 종양용해 제품의 배출 정도를 유전체 사본 수 또는 감염 단위로 보고할 것을 권장한다. 정량적 중합효소연쇄반응(qPCR)과 같이 정량 판독이 가능한 시험법은 시험 수행·표준화가 쉽고 고속 처리 형식이며 결과가 빠르게 나오고 시험 감도가 좋기 때문에 자주 사용된다.

    At least one of the assays used to measure shedding should be quantitative. We recommend that sponsors report the extent of shedding of VBGT or oncolytic products in terms of the number of genome copies or infectious units to provide a quantitative assessment of shedding. Often an assay with a quantitative readout, like quantitative polymerase chain reaction (qPCR), is used because of the ease of performing/standardizing the assay, high throughput format, rapid turnaround time, and assay sensitivity.

  • qPCR에 의한 핵산 검출이 감염성 바이러스의 존재를 나타내지 않을 수 있으므로, 복제 가능 제품의 경우 핵산 검출에 이어 감염성 시험 또는 성장 기반 시험을 수행하여야 한다. 복제 가능 제품은 사람에서 성장 또는 증식할 수 있으며, 배출되면 감염성을 가질 수 있다. 감염성 바이러스 또는 세균만이 전파될 가능성이 있으므로, 의뢰자는 복제 가능 제품의 배출 분석에 단계적 접근을 따를 것을 권장한다. 구체적으로, 연속된 시점에 채취한 임상 검체에서 제품 특이적 핵산에 대한 PCR 신호가 꾸준히 상승하는 것은 생체내 세균 성장 또는 바이러스 증식을 시사한다. 이러한 경우 임상 검체를 세포배양에서의 감염성(바이러스) 또는 성장(세균)에 대하여 추가로 분석하여야 한다.

    Because detection of nucleic acids by qPCR may not indicate the presence of infectious virus, for replication competent products, detection of nucleic acids should be followed up with infectivity or growth-based assays. Replication competent products are capable of growth or multiplication in humans and if shed, can be infectious. Since only infectious viruses or bacteria are potentially transmissible, we recommend that sponsors follow a step-wise approach for the analysis of shedding of replication competent products. Specifically, a steady rise in the PCR signal for product-specific nucleic acids in clinical samples collected over successive time-points is suggestive of bacterial growth or viral multiplication in vivo. In such cases, clinical samples should be further analyzed for infectivity in cell culture (for viruses) or growth (for bacteria).

  • 조건부 복제 VBGT 제품 또는 종양용해 제품의 배출이 qPCR 시험에서 LOD 이상의 수준으로 확인되면, 이러한 제품은 복제가 대부분 종양이나 특정 조직 유형에 국한되더라도 감염성 형태로 배출될 수 있으므로, 의뢰자는 감염성 또는 성장을 확인하기 위하여 배출된 물질을 추가로 특성분석할 것을 권장한다. 조건부 복제 아데노바이러스나 영양요구성 세균과 같은 조건부 복제 가능 제품의 감염성 평가는 제품 특이적 시험관내 세포배양 또는 성장 조건을 고려하여야 하며, 예를 들어 영양요구성 세균의 경우 선택배지에서의 성장에 이어 제품 확인을 위한 선택적 방법을 적용한다.

    If shedding of conditionally replicating VBGT or oncolytic products is noted by qPCR assay at a level above the LOD, we recommend that sponsors further characterize the shed material to confirm infectivity or growth because such products could be shed in their infectious form even if replication is confined, mostly, to tumors or to a particular tissue-type. The assessment of infectivity for conditionally replication competent products, such as conditionally replicating adenovirus or auxotrophic bacteria, should take into account product-specific in vitro cell culture or growth conditions; for example growth in differential media for auxotrophic bacteria followed by a selective method for product identification.

  • 정량 판독이 가능한 시험법으로 감염성 또는 성장을 평가하는 접근 방법은 여러 가지가 있다(참고문헌 3). 예를 들면 다음과 같다.

    There are many different approaches to assess infectivity or growth with assays that have a quantitative read-out (Ref. 3). For example:

    • 감염성 바이러스의 검출: 50% 조직배양 감염용량(TCID50), 플라크 형성 단위(PFU), 포커스 형성 단위(FFU)로 감염성을 측정하는 시험법.

      For detection of infectious viruses: Assays that measure infectivity in terms of Tissue Culture Infectious Dose 50 (TCID50), plaque-forming units (PFU), focus-forming units (FFU).

    • 분열하는 세균의 검출: 집락 형성 단위(CFU)로 세균 성장을 측정하는 시험법.

      For detection of dividing bacteria: Assays that measure bacterial growth in colony forming units (CFU).

의뢰자는 다음의 경우 복제 가능 제품 또는 조건부 복제 제품의 배출 분석을 qPCR 시험으로 한정하는 것을 타당하다고 입증할 수 있다.

Sponsors may justify limiting the shedding analysis of a replication competent or conditionally replicating product to qPCR assay, if:

  • qPCR과 감염성 시험 또는 성장 기반 시험 사이의 상관성이 확립되어 있고, qPCR 시험에서 확인된 신호가 감염성 시험 또는 성장 기반 시험의 LOD 이하인 경우, 또는
  • 감염성 시험의 세포배양 단계가 세포 생존력에 대한 악영향 때문에 배설물과 같이 조성이 복잡한 임상 검체의 분석에 적합하지 않음이 입증된 경우.
  • A correlation between qPCR and the infectivity assay or growth-based assay is established, and the signal noted in the qPCR assay is at or below the LOD of the infectivity or growth-based assay; or
  • The cell culture step in an infectivity assay is demonstrated to be unsuitable for the analysis of clinical samples with complex composition such as excreta due to adverse effects on cell viability.
  • 복제 불능 또는 복제 결핍 제품의 배출 분석은 qPCR로 충분할 수 있다. 대부분의 VBGT 제품은 복제 불능 또는 복제 결핍이며, 예를 들어 아데노연관바이러스(AAV) 벡터, E1 결손 아데노바이러스(Ad) 벡터, 일부 헤르페스바이러스 벡터(HSV)가 있다. 복제 불능 또는 복제 결핍 제품은 사람에서 증식할 수 없으므로 더 적게 배출되고 감염을 성립시킬 수 없는 형태로 배출된다. 따라서 복제 불능 또는 복제 결핍 제품의 배출을 평가하는 주된 시험법으로 qPCR이 충분할 수 있다.
  • Shedding analysis of replication incompetent or deficient products by qPCR may be adequate. Most VBGT products are replication incompetent or replication deficient; for example, adeno-associated virus (AAV) vectors, E1-deleted adenovirus (Ad) vectors, and some herpes virus vectors (HSV). Replication incompetent or replication deficient products are incapable of multiplying in humans, and therefore, are shed to a lower extent and in a form that is incapable of establishing an infection. Hence, qPCR may be adequate as the primary assay to assess shedding of replication incompetent or replication deficient products.
  • 정성 시험법을 배출 평가에 사용하는 것이 타당할 수 있다. 특정 제품의 검출에서 정성 배출 시험법이 정량 시험법보다 더 민감함이 입증된 경우, 의뢰자는 정성 시험법의 사용이 타당하다고 입증할 수 있다. 그러나 정성 시험법으로 검출 가능한 배출이 있으면, 양성으로 판정된 검체의 배출 정도를 파악하기 위하여 후속 정량 분석을 수행하여야 한다.
  • 배출 시험법은 특이성, 감도, 재현성, 정확성이 있음을 입증하여야 한다. 재현성을 확인하기 위하여 배출 시험법에서 임상 검체를 반복 측정할 것을 권장한다. 특히 비강 스왑이나 피부 스왑처럼 양이 제한된 임상 검체로는 재시험이 늘 가능하지 않으므로, 위양성 또는 위음성 결과를 피하기 위하여 시험법의 특이성을 충분히 이해하여야 한다. 시험법의 감도는 LOD로, 정량 시험법을 사용하는 경우에는 정량한계(LOQ)로도 정하여야 한다. FDA는 배출 시험법의 밸리데이션을 요구하지는 않으나, 시험법은 최소한의 성능 능력을 충족하고 의도된 목적에 적합하도록 적격성 평가를 하여야 한다.
  • Use of a qualitative assay to assess shedding may be justified. When a qualitative shedding assay is demonstrated to be more sensitive than a quantitative assay in the detection of a specific product, a sponsor may justify the use of the former. However, if there is detectable shedding with a qualitative assay, a follow-up quantitative analysis should be performed to understand the extent of shedding in positively scored samples.
  • Shedding assay(s) should be demonstrated to be specific, sensitive, reproducible and accurate. We recommend testing of clinical samples in a shedding assay in replicates to determine reproducibility. The specificity of the assay should be well understood to avoid false-positive or false-negative results, particularly since retesting is not always feasible with clinical samples that are limited in quantity, such as nasal or skin swabs. The sensitivity of the assay should be determined in terms LOD and the limit of quantitation (LOQ), if using a quantitative assay. While the Agency does not expect shedding assays to be validated, the assays should be qualified to meet minimal performance capabilities and be suitable for the intended purpose.

검체의 종류와 조성이 시험법 성능에 미치는 영향을 충분히 이해하여야 한다. 대변과 소변 같은 임상 검체는 복잡한 유기물이 풍부하여 시험법의 성능에 악영향을 주고 배출을 과소평가하게 할 수 있다. 또한 대변, 침, 비강 스왑 같은 검체는 숙주 단백질과 핵산뿐 아니라 체내 정상 균총과 환경에서 유래한 유행 중인 바이러스·세균 균주도 풍부하다. 따라서 시험 대상 제품만을 선택적으로 분석할 수 있도록 시험 조건을 최적화하여야 한다. 이를 위하여 시험에 사용하는 시약의 특이성을 평가하고 시약의 품질을 관리하여야 한다. 배출 시험법으로 임상 검체를 분석할 때에는 인증된 무오염 시약을 사용하여야 한다.

The effect of sample type and composition on assay performance should be well understood. Clinical samples such as feces and urine are rich in complex organic matter that can adversely affect the performance of an assay and lead to an underestimation of shedding. Also, samples such as feces, saliva, and nasal swab are rich not only in host proteins and nucleic acids but also in the body’s natural flora and in circulating strains of viruses and bacteria from the environment. Thus, the assay conditions should be optimized to selectively analyze for the product under investigation. For that, the specificity of the reagents used in the assay should be assessed and the quality of the reagents should be controlled. Certified and contaminant-free reagents should be used in the analysis of clinical samples in a shedding assay.

임상 검체 매트릭스에 의한 간섭은 위음성 결과 또는 배출량의 과소평가를 일으킬 수 있다. 예를 들어 소변, 침, 대변 같은 임상 검체에는 PCR의 증폭 과정에 영향을 줄 수 있는 단백질분해효소, 핵산분해효소, 이온, 염이 풍부하며, 구체적으로 침·대변의 핵산분해효소는 주형 DNA를 분해할 수 있고 대변의 담즙산염이나 소변의 요소는 PCR 혼합액 내 열안정성 DNA 중합효소의 활성에 영향을 줄 수 있다. 임상 검체의 성분에 의한 간섭으로 PCR 저해가 의심되는 경우에는, 간섭 성분을 줄이기 위하여 임상 검체를 제한된 범위에서 희석할 수 있다. 임상 검체의 희석은 주형의 희석도 가져오므로, 각 시험 수행마다 PCR 시험법의 감도를 평가하여야 한다.

Interference from clinical sample matrix can lead to a false-negative result or an underestimation of the amount of shedding. For example, clinical samples like urine, saliva, and feces are rich in proteases, nucleases, ions and salts that can affect the amplification process in a PCR; specifically, nucleases in saliva/feces can degrade template DNA, bile salts in feces or urea in urine can affect the activity of thermostable DNA polymerases in the PCR mixture. When PCR inhibition is suspected due to interference from components in a clinical sample, the clinical sample can be diluted to a limited extent to reduce the interfering component. Since dilution of the clinical sample also leads to template dilution, the sensitivity of PCR assay should be assessed in each assay run.

이를 위하여 희석한 각 검체는 희석 전에 표준품 또는 양성 내부대조물질을 스파이킹한 검체와 병행하여 시험하여야 한다. 제한된 검체 희석으로 간섭을 줄일 수 없으면, 임상 검체의 간섭 성분을 제거하기 위한 대체 또는 추가 추출 절차를 고려하여야 한다.

For that, each diluted sample should be tested in parallel with one that is spiked with a reference standard or positive internal control prior to dilution. If interference cannot be decreased by limited sample dilution, alternative or additional extraction procedures should be considered to remove the interfering component(s) in the clinical sample.

보관, 취급·수송, 핵산 추출 과정에서 대변이나 침처럼 효소가 풍부한 임상 검체 안의 바이러스 또는 세균 핵산이 분해되어 배출 수준이 과소평가될 수도 있다. 이러한 영향을 고려하기 위하여, 모의 검체 또는 공여자 검체 종류에 채취 직후 표준품 또는 양성 내부대조물질을 스파이킹하고 표준품 또는 양성 내부대조물질의 회수율(%)을 1회 확인할 것을 권장한다. 검체 채취, 보관, 수송, 추출, 분석은 임상(시험) 검체에 계획된 것과 동일한 방법론으로 수행하여야 한다.

An underestimate of the level of shedding may also result due to degradation of viral or bacterial nucleic acids in enzyme-rich clinical samples such as feces and saliva during storage, handling/shipping and nucleic acid extraction. To account for such effects, we recommend that mock/donor sample types be spiked, soon after collection, with the reference standard or internal positive control and the percent recovery of the reference standard or internal positive control should be determined on a one-time basis. Sample collection, storage, shipping, extraction and analysis should be performed with the same methodology as that planned for the clinical (test) samples.

IX. 배출 데이터의 분석IX. ANALYSIS OF SHEDDING DATA

배출로 인한 투여받지 않은 사람에 대한 전파 가능성을 평가하기 위하여, VBGT 제품 또는 종양용해 제품의 배출 데이터 분석은 다음을 다루어야 한다.

In order to assess the potential of transmission to untreated individuals due to shedding, the analysis of shedding data for VBGT or oncolytic products should address the following:

A. 배출된 물질의 성질A. The Nature of the Shed Material

배출 시험법에서 임상 검체가 제품에 대하여 양성으로 판정된 경우, 이러한 검체의 후속 분석은 다음 질문에 대한 답을 제시하여야 한다.

When clinical samples are scored positive for product in a shedding assay, the subsequent analysis of these samples should provide answers to the following questions:

  • 1. 임상 검체가 감염성 바이러스 또는 세균의 존재를 시사하는 제품 특이적 핵산(전장 유전체)을 함유하는가, 아니면 감염성 바이러스 또는 세균이 없는 상태에서 발견되는 대부분 분해된 제품 특이적 핵산(유전체) 조각을 함유하는가? 감염성 바이러스의 존재를 시사하는 제품 특이적 핵산(전장·완전 유전체)을 함유한 임상 검체의 예는, 핵산분해효소 처리 후에 제품 특이적 핵산이 (PCR로) 증폭되는 검체이다. 이러한 조건에서 증폭될 수 있는 유전체는 감염성을 가질 수 있는 온전한 핵산분해효소 저항성 바이러스 입자 안에 보호된 전장·완전 유전체뿐이다. 핵산분해효소 처리가 가능하지 않은 경우에는 long PCR로 전장·완전 바이러스 유전체가 증폭되는 것이 감염성 바이러스 입자의 존재를 시사할 수 있다.

    Do the clinical samples contain product-specific nucleic acids (full-length genomes) suggestive of the presence of infectious viruses or bacteria or do the clinical samples contain mostly degraded product-specific nucleic acid (genome) fragments found in the absence of infectious viruses or bacteria? An example of a clinical sample containing product-specific nucleic acid (full-length/complete genomes) suggestive of the presence of infectious viruses is one in which product-specific nucleic acids are amplified (by PCR) after treatment with nucleases. Under such conditions, the only genomes that are amplifiable are the full-length/complete genomes protected within intact nuclease-resistant viral particles that may be infectious. When nuclease treatment is not feasible, amplification of full length/complete viral genome by long PCR may suggest the presence of infectious viral particles.

    작은 제품 특이적 핵산 조각만 증폭된다면 그 임상 검체에는 감염성 바이러스가 들어 있을 가능성이 낮다.

    If only small product-specific nucleic acid fragments are amplifiable, then the clinical sample is not likely to contain infectious viruses.

  • 2. 배출된 제품에 기인하는 바이러스 또는 세균의 성장을 임상 검체에서 검출할 수 있는가? 이상적으로는 배출 시험법이 감염성 바이러스와 비감염성 바이러스를, 또는 분열하는 세균과 분열하지 않는 세균을 구별할 수 있어야 한다. 배출 시험법에 관한 자세한 내용과 FDA의 권고는 이 가이던스 VIII항을 참조한다. 복제 가능 제품의 배출 분석에서 qPCR만을 사용하였거나 배출 시험법이 제품의 작은 유전체 조각을 검출하는 경우, FDA는 양성으로 판정된 검체의 배출된 물질이 감염성이라고 가정한다.

    Can viral or bacterial growth attributable to the shed product be detected in the clinical sample? Ideally, the shedding assay should be able to discern infectious from non-infectious viruses, or dividing from non-dividing bacteria. We refer you to section VIII. of this guidance for details on shedding assays and for our recommendations. If qPCR is the only assay you have relied on in your shedding analysis of replication competent products, or the shedding assay screens for small genome fragments of the product, then we will assume that the shed material in the positively scored samples is infectious.

B. 배출의 정도B. The Extent of Shedding

배출 데이터의 분석에서는 시간, 용량(투여한 제품의 양), 투여 요법(투여 횟수)에 따른 검체 종류별 배출 정도를 시험에서 모니터링한 모든 환자에 대하여 보고하여야 한다. 배출 보고서의 원시 데이터에는 다음을 기술하는 포괄적인 분석이 함께 제시되어야 한다.

In the analysis of shedding data, the extent of shedding noted for each sample type as a factor of time, dose (amount of product administered) and regimen (number of doses) should be reported for all the patients monitored in the study. Raw data in the shedding report should be accompanied by a corresponding analysis that is comprehensive and describes the following:

  • 1. 시험에서 검토한 검체 종류별, 용량별, 투여 요법별로 전체 환자 중 배출을 보인 환자 수의 비율.
  • 2. 배출 첫날과 마지막 날을 포함한 배출 기간, 그리고 검체 종류별 배출 정점 기간. 시험에서 대부분의 환자에게 배출이 멈추는 시기도 명확히 제시하여야 한다.
  • 3. 배출이 일관되게 확인된 임상 검체(종류와 시점), 그리고 시험의 모든 환자에서 일관되게 음성이었던 검체.
  • 4. 임상 검체에서 배출된 제품의 양. 배출량은 임상 검체의 최종 용량·질량을 고려하여 보고하여야 한다(예: 소변 mL당 바이러스 10 PFU, 소변 mL당 세균 10 CFU, 대변 마이크로그램당 유전체 사본 10개). 배출량을 평가할 때에는 임상 검체 내 제품의 안정성과, 검체 보관·취급·수송 중의 손실로 배출 수준이 과소평가될 수 있는지를 고려하여야 한다(자세한 내용은 이 가이던스 VIII항 참조).
  • The number of patients that are shedding as a percentage of the total patients in the study for each sample type, dose and regimen studied.
  • The duration of shedding, including the first and last day of shedding, and the peak period(s) of shedding in each sample type. The period when shedding stops in most patients in the study also should be clearly identified.
  • The clinical sample(s) where shedding was consistently noted (type and time point) and samples that were consistently negative for all the patients in the study.
  • The quantity of product shed in a clinical sample. The amount shed should be reported taking into account the final volume/mass of the clinical sample, (e.g., 10 PFU of virus per mL of urine, or 10 CFU of bacteria per mL of urine, or 10 genome copies per microgram of stool). When assessing the quantity of shedding, you should factor in the stability of the product in the clinical sample, and whether there could be an underestimate of the level of shedding because of loss during sample storage, handling and shipping (for details, please refer to section VIII. of this guidance).

배출 데이터의 분석에는 특정 적응증으로 치료받은 환자에서 제품의 배출 양상 요약이 함께 제시되어야 한다는 점에 유의한다. VBGT 제품과 종양용해 제품의 임상 개발에서 하나의 제품을 여러 시험에서 서로 다른 적응증으로 연구하는 것이 일반적이지만, 배출 양상은 시험집단마다 다를 수 있다. 특정 적응증의 배출 시험 결과를 다른 적응증에 일반화할 수 없을 수 있으므로, 동일한 제품을 서로 다른 적응증으로 연구한 여러 시험의 배출 데이터를 통합하지 않을 것을 권장한다.

Note that your analysis of shedding data should be accompanied by a summary of the shedding profile of the product in patients treated for a specific indication. While it is common practice in clinical development of VBGT and oncolytic products to study a product for different indications in multiple trials, the shedding pattern may be distinct in each study population. We recommend against pooling shedding data from multiple trials in which the same product is studied for different indications because results from a shedding study in a given indication may not be generalizable to other indications.

마지막으로, 배출 데이터는 다음 항에 기술한 형식으로 제출할 것을 권장한다.

Finally, we recommend that the shedding data be submitted in a format as described in the next section.

X. 임상 배출 시험 보고서에 포함할 내용X. WHAT TO INCLUDE IN A CLINICAL SHEDDING STUDY REPORT

환자로부터 VBGT 제품 또는 종양용해 제품이 배출되어 투여받지 않은 사람에게 전파될 가능성을 다루기 위하여, BLA에 완전한 배출 보고서를 제출하여야 한다.6 보고서에는 다음을 제시하여야 한다.

In order to address the potential for transmission to untreated individuals due to shedding of VBGT or oncolytic products from the patient, a full shedding report should be provided in the BLA.6 The following should be provided in the report:

6 가이던스를 원하는 경우, 중간 데이터와 시험 보고서를 FDA 검토를 위하여 IND 연차 보고에 제출할 수 있다.

6 Interim data and study reports can be submitted in your IND annual report, for FDA review, if guidance is desir ed.

  • A. 다음을 포함하는 대상 환자집단에서의 제품에 대한 포괄적인 배출 양상. 1. 제품에 관한 배경 정보: 유래 이력, 모바이러스 또는 모균주의 생물학적 특성, 모균주의 전파 경로, 복제 능력, 약독화, 제품의 친화성.
  • 2. 동물모델에서의 체내분포 양상 요약과, 비임상 배출 시험을 수행한 경우 그 결과.
  • 3. 임상 배출 시험 설계(즉, 임상 검체의 선택, 채취·보관의 빈도와 절차)와 배출 평가를 위하여 선택한 분석법의 근거.
  • 4. 데이터 수집·검체 채취 계획과 제품의 보관·수송·취급 절차.
  • 5. 다음을 포함하는 시험법 기술: (a) 희석 배수와 검체당 추출한 핵산의 양을 포함한 시험 검체 전처리 또는 핵산 추출 절차.
  • (b) qPCR 시험법을 사용하는 경우, 각 시험법의 검체 용량, 반응당 핵산량, 사이클 수, 프라이머, 증폭된 DNA의 크기를 제시한다.
  • (c) 감염성·성장 기반 시험법을 사용하는 경우, 허용 세포주·성장배지, 흡착과 감염 또는 성장의 조건, 판독의 성질(TCID50, FFU, PFU 또는 CFU, qPCR 판독 시험법의 경우 사이클 역치(Ct))을 제시한다.
  • (d) 시험법 적격성 평가, 대조와 감도: 적격성 평가 시험, 표준품, 스파이크, 대조, 반복 수, 시험법 변동성과 감도(해당하는 경우 LOD 및 LOQ)에 관한 기술.
  • A comprehensive shedding profile of the product in the target patient population(s) which includes the following: Background information on the product: Derivation history; biological characteristics of parent viral or bacterial strain; route of transmission of parent strain; replication competence; attenuation; and tropism of the product.
  • A summary of the biodistribution profile in animal models and the findings from preclinical shedding studies, if conducted.
  • The rationale for both the clinical shedding study design (i.e., choice of clinical samples, frequency and procedures of collection and storage), and the analytical method selected to assess shedding.
  • Your data collection/sampling plan and your procedures for storage, shipping, and handling of the product.
  • An assay description that includes the following: Test sample preparation or nucleic acid extraction procedures including the dilution factor and amount of nucleic acid extracted per sample.
  • If you use qPCR assays, provide for each assay the sample volume, amount of nucleic acid per reaction, cycle numbers, primers, and size of the amplified DNA.
  • If you use infectivity/growth-based assays, provide the permissive cell line/growth media, the conditions for adsorption and infection or growth, and the nature of the read-out (TCID50, FFU, PFU or CFU; or Cycle threshold (Ct) for assays with qPCR read-out).
  • Assay qualification, controls and sensitivity: Description of the qualification studies, standards, spikes, controls, number of replicates, assay variability and sensitivity (LOD and LOQ, if applicable).

  • 6. 배출 데이터의 분석:

    Analysis of shedding data:

    • (a) 배출 데이터의 표 및/또는 그래프 표시.
    • (b) 데이터의 분석과 시험 결과의 요약.
    • Tabulation and/or graphical representation of the shedding data.
    • Analysis of the data and summary of the findings from the study.

  • 7. 제품이 투여받지 않은 사람에게 전파될 가능성에 대한 추정.

    Your estimate of the potential for transmission to untreated individuals of the product.

    • 이 가이던스에서 분석법의 종류와 조건에 관한 논의는 VIII항, 임상 검체 채취에 관한 논의는 VII.B항, 배출 데이터의 분석은 IX항, 배출로 인한 투여받지 않은 사람에 대한 전파 가능성 평가에 관한 자세한 내용은 XI항을 참조한다.

    In this guidance, see section VIII. for a discussion of analytical assay types and conditions, section VII.B. for a discussion of clinical sample collection, section IX. for analysis of shedding data, and section XI. for details on assessing the potential for transmission to untreated individuals due to shedding.

  • B. 필요한 경우, 대상 환자집단에서 투여받지 않은 사람에 대한 전파를 임상적으로 모니터링한 데이터와 그 분석(추가 정보는 이 가이던스 XI.B항 참조).

    As needed, data and analysis of clinical monitoring for transmission to untreated individuals in the target patient population (refer to section XI.B. of this guidance for additional information).

  • C. VBGT 제품 또는 종양용해 제품, 또는 그 모균주·관련 바이러스나 세균 균주가 사람을 감염시키고 질병을 일으킬 수 있는 능력에 관한 기타 관련 정보. 사람에게 질병을 일으킬 가능성이 있는 경우에는 다음을 논의하여야 한다.

    Other relevant information on the ability of the VBGT or oncolytic product, or its parental/related strain of viruses or bacteria to potentially infect humans and cause disease. When there is the potential to cause disease in humans, the following should be discussed:

    • 1. 비전형적 발현 또는 무증상 배출의 발생을 포함한, 모균주가 일으키는 질병 증상의 범위.
    • 2. 지역사회에서 유행하는 모바이러스 또는 모균주와 비교한 제품의 약독화 정도.
    • 3. 배출된 제품에 의한 감염을 막아 줄 수 있는 일반 인구의 자연 면역 또는 획득 면역.
    • 4. 배출된 제품이 투여받지 않은 사람에게 전파된 경우 감염·질병을 치료할 수 있는 치료 선택지.
    • 5. 제3자, 특히 면역이 저하된 성인, 신생아, 고령자의 노출을 최소화하기 위하여 배출된 제품이 투여받은 사람을 넘어 퍼지는 것을 제한할 수 있는 예방·차단 조치. 배출의 시작 시점과 기간에 관하여 수집한 데이터가 적절한 예방·차단 조치를 정하는 데 참고가 될 수 있다는 점에 유의한다. 예를 들어 환자가 보건의료 환경에서 모니터링되는 치료 직후에 배출 정점이 일어난다면, 전파 가능성은 주로 보건의료 전문가(HCP)와 환자와 밀접하게 접촉하는 사람에 국한된다. 배출이 길게 이어지거나 환자가 보건의료 환경에서 퇴원한 이후 며칠 내에 두 번째 배출 정점이 있다면, 보건의료 환경과 가정 환경을 넘어서는 접촉자에게 전파될 가능성이 있다.
    • The spectrum of disease symptoms caused by the parental strain, including atypical presentation of the disease, or occurrence of asymptomatic shedding;
    • The attenuation of the product compared to the parent strain of the virus or bacterium circulating in the community;
    • The natural or acquired immunity of the general population that could potentially protect against infection from the shed product;
    • The therapeutic options to treat the infection/disease in case of transmission to untreated individuals of the shed product; and
    • Preventive/containment measures that can limit spread of the shed product beyond the treated individual to minimize exposure of third parties, particularly, immune-compromised adults, neonates and seniors. Note that the data you collect on onset and duration of shedding can inform appropriate preventive/containment measures. For example, if peak shedding occurs soon after treatment when the patient is monitored in a health-care setting, then the possibility of transmission is mainly confined to health care professionals (HCP) and individuals that come into close contact with the patient. If shedding is prolonged or if there is a second peak of shedding in the days following discharge of a patient from a health care setting, there is the possibility of transmission to contacts beyond the health care and home setting.

    • XI. 배출로 인한 투여받지 않은 사람에 대한 전파 가능성의 평가XI. ASSESSING THE POTENTIAL FOR TRANSMISSION TO UNTREATED INDIVIDUALS DUE TO SHEDDING

    FDA의 현재 이해로는, 모바이러스 균주 또는 모균주와 비교하여 제품을 약독화하도록 설계된 유래 방법 및/또는 변형 때문에 VBGT 제품 또는 종양용해 제품이 배출되더라도 대부분의 경우 투여받지 않은 사람에 대한 전파 가능성은 매우 낮다. 그럼에도 임상시험에서 수집한 배출 데이터의 분석에 근거하여 아래에 기술한 요인을 고려하여 전파 가능성을 논의하여야 한다.

    Our current understanding is that in most cases, the potential for transmission to untreated individuals is extremely low when VBGT or oncolytic products are shed because of the derivation methods and/or modifications that are designed to attenuate the product when compared to the parent strain of virus or bacterium. Nevertheless, you should discuss the potential for transmission based on the analysis of the shedding data collected in the clinical studies and taking into consideration the factors described below.

    A. 배출 데이터 중 어떤 정보를 투여받지 않은 사람에 대한 전파 가능성 평가에 사용할 수 있는가A. What Information in the Shedding Data Can be Used to Assess Potential for Transmission to Untreated Individuals?

    • VBGT 제품 또는 종양용해 제품이 배출되었는지.
    • 배출된 제품이 감염성이 있다고 판정되었는지.
    • 임상 검체 속 감염성의 양이 제3자에게 감염을 일으키는 데 필요한 양과 비슷한지. 예를 들어 아데노바이러스의 감염 용량은 비강 투여 시 150 PFU 초과로 보고되며(참고문헌 4), 에어로졸화하면 더 낮다(참고문헌 5). 사람에 대한 최소 감염 용량은 바이러스나 세균이 다른 경로로 투여·획득될 때 또는 균주에 따라 다를 수 있으나, 질병을 일으키는 많은 바이러스와 세균에서는 사람에 대한 최소 감염 용량이 정의되어 있지 않을 수 있다.
    • 배출된 제품을 담은 임상 검체가 자연 전파 경로를 나타내는지. 예를 들어 대변으로 배출된 호흡기 바이러스는 비인두 분비물로 배출된 경우에 비해 감염성과 전파력이 낮을 수 있다.
    • Whether the VBGT or oncolytic product was shed.
    • Whether the shed product was determined to be infectious.
    • Whether the amount of infectivity in the clinical samples was comparable to that needed to initiate infection in a third party. For example, adenovirus infective dose is reportedly >150 PFU when given intra-nasally (Ref. 4) or lower when aerosolized (Ref. 5). The minimum infectious human dose may vary when viruses or bacteria are administered or acquired through different routes, or among different strains, but for many disease-causing viruses and bacteria, the minimum infectious dose in humans may be undefined.
    • Whether the clinical sample containing the shed product represents the natural route of transmission. For example, a respiratory virus that is shed in feces may not be as infectious and transmissible when compared to that shed in nasopharyngeal secretions.

    B. 투여받지 않은 사람에 대한 전파 모니터링B. Monitoring Untreated Individuals for Transmission

    투여받지 않은 사람에게 전파되는 일은 가능성이 매우 낮은 사건이므로, 제품의 임상 개발 동안 그러한 사람의 전파 여부를 모니터링하는 것은 보통 요구되지 않는다. 그러나 전파 가능성이 있으면 그 가능성을 평가하기 위한 추가 데이터가 필요하며, 이 경우 의뢰자는 모니터링 계획 수립과 관련하여 OCTGT와 협의할 것을 권장한다.

    Because transmission to untreated individuals is an extremely low probability event, monitoring such individuals for transmission is usually not required during the clinical development of a product. However, if there is a potential for transmission, additional data will be needed to assess that possibility; in which case, we recommend that sponsors consult with OCTGT in connection with developing a monitoring plan.

    XII. 참고문헌XII. REFERENCES

    1. ICH Considerations: General principles to address virus and vector shedding, June 2009. Available at http://www.ich.org/fileadmin/Public_Web_Site/ICH_Products/Guidelines/Multidisciplinary/M6/Concept_Paper/Considerations_on_Viral_Vector_Shedding.pdf.
    2. Simon, A. et al., Viral infections in paediatric patients receiving conventional cancer chemotherapy. Arch Dis Child. 93:880-889 (2008).
    3. Schenk-Braat, E. et al., An inventory of shedding data from clinical gene therapy trials. J Gene Med. 9: 910-921 (2007).
    4. Health Canada, 2001. Material data safety sheet – infectious substances. Available at http://www.phac-aspc.gc.ca/lab-bio/res/psds-ftss/msds3e-eng.php.
    5. Couch, R.B. et al., The minimal infectious dose of adenovirus type 4; the case for natural transmission by viral aerosol. Trans Am Clin Climatol Assoc. 80: 205-211 (1969).

    자주 묻는 질문

    배출(shedding) 시험은 체내분포 시험과 어떻게 다른가요?

    체내분포는 제품이 투여 부위에서 환자 몸 안으로 어떻게 퍼지는지를 보는 것이고, 배출은 제품이 환자 몸에서 대변·소변·침·비인두액이나 피부의 농포·궤양·상처를 통하여 어떻게 밖으로 나오는지를 보는 것입니다. 배출은 투여받은 환자에게서 밀접 접촉자나 보건의료 전문가처럼 투여받지 않은 사람에게 제품이 전파될 가능성과 이어집니다.

    배출 데이터는 임상 몇 상부터 모아야 하나요?

    복제 가능 제품은 제1상 시험부터 수집할 것을 권장하며, 용량과 투여 요법이 정해진 뒤 제2상·제3상에서도 계속 수집해야 할 수 있습니다. 복제 불능 또는 복제 결핍 VBGT 제품은 용량과 투여 요법이 정해진 이후 개발 후반(예: 제2상)에 수집할 것을 권장합니다.

    검체는 언제까지 채취해야 하나요?

    투여 직후부터 시작해 초기 몇 주는 자주 채취하며(예: 1일, 3일, 7일, 10일 이후 매주), 배출 시험법의 검출한계(LOD) 이하인 데이터 점이 연속 3회 얻어질 때까지 분석을 계속합니다. LOD에 도달하지 않더라도 계속 감소하는 추세라면 연속 3회 이상 평탄역에 도달했음이 확인될 때까지 채취를 계속합니다.

    배출 분석을 qPCR 하나로만 해도 되나요?

    복제 불능·복제 결핍 제품은 qPCR이 주된 시험법으로 충분할 수 있습니다. 복제 가능 제품이나 조건부 복제 제품은 핵산 검출에 이어 감염성 시험 또는 성장 기반 시험을 수행하여야 하며, qPCR과 감염성·성장 시험의 상관성이 확립되고 qPCR 신호가 그 시험법의 LOD 이하인 경우, 또는 감염성 시험의 세포배양 단계가 배설물처럼 복잡한 검체에 적합하지 않음이 입증된 경우에만 qPCR로 한정하는 것이 타당할 수 있습니다.

    배출 시험법도 밸리데이션해야 하나요?

    FDA는 배출 시험법의 밸리데이션을 요구하지는 않습니다. 다만 시험법이 특이성·감도·재현성·정확성을 갖추었음을 입증하고, 최소한의 성능 능력을 충족하여 의도된 목적에 적합하도록 적격성 평가를 하여야 합니다.