I. 서론I. INTRODUCTION

II. 배경II. BACKGROUND

III. 규제 체계III. REGULATORY FRAMEWORK

• 허가된 ACTIMP의 역가 요구 사항: PHS법 351항에 따라 규제되는 제품의 생물의약품 허가신청(BLA)에는 무엇보다도 제품에 역가가 있고 제품의 역가가 지속적으로 보증됨을 입증하는 자료가 들어 있어야 한다.⁹ FDA 규정은 제품마다 적절한 역가 측정 방법을 정하는 데 상당한 유연성을 허용한다. 역가는 의도한 치료 효과를 달성하는 제품의 능력 또는 역량을 말하므로, 역가 측정 시험의 적합성은 제품 고유의 특성을 고려하여 사례별로 평가된다. 허가된 생물의약품의 로트 출하 시험에 사용하는 모든 역가 시험은 해당 생물의약품 규정과 CGMP(현행 우수 의약품 제조 및 품질관리 기준) 규정을 포함한 적용 규정을 준수하여야 한다.^{10, 11} 또한 그러한 시험은 밸리데이션되어야 한다.¹²

  Potency Expectations for Licensed ACTIMPs: Biologics license applications (BLAs) for products regulated under section 351 of the PHS Act must contain, among other things, data demonstrating that the product is potent, and that the continued potency of the product is assured.⁹ FDA regulations allow for considerable flexibility in determining the appropriate measurement(s) of potency for each product. Potency refers to the ability or capacity of the product to achieve the intended therapeutic effect; therefore, the suitability of assays to measure potency is evaluated on a case-by-case basis to account for product-specific attributes. All potency assays used for lot release testing of licensed biological products must comply with applicable regulations, including applicable Biological Product and Current Good Manufacturing Practice (CGMP) regulations.^{10, 11} Further, such assays must be validated.¹²

  역가 시험은 허가를 위한 제품 유효기간 설정에 쓰는 안정성 판정 시험의 일부로 사용하여야 한다.

  Potency assay(s) should be used as a part of the stability determining tests to establish product expiration date for licensure.

• 임상시험용 ACTIMP의 역가 요구 사항: 초기 임상시험에서는 위에 기술한 허가된 생물의약품에 대한 역가 요건을 모두 충족하지 못할 수 있다(참고문헌 8~10). 그렇더라도 의뢰자는 임상시험의 모든 단계에서 사용하는 제품의 확인, 품질, 순도, 함량 및 안정성을 보증하는 자료를 임상시험계획(IND)의 일부로 제출하여야 한다.¹³ “그러한 보증에 필요한 정보의 양은 임상시험의 단계, 제안된 임상시험 기간, 제형 및 달리 이용 가능한 정보의 양에 따라 달라진다.”¹⁴ ACTIMP 개발을 촉진하기 위해, 역가 보증과 역가 시험 개발에 단계적으로 반복하는 접근 방법을 권고한다.

  Potency Expectations for Investigational ACTIMPs: In early-phase clinical investigations, it may not be possible to meet all of the requirements for potency described above for licensed biological products (Refs. 8 - 10). Nonetheless, sponsors must submit as part of the Investigational New Drug Application (IND) data to assure the identity, quality, purity and strength, as well as stability, of products used during all phases of clinical study.¹³ “[T]he amount of information needed to make that assurance will vary with the phase of the investigation, the proposed duration of the investigation, the dosage form, and the amount of information otherwise available.”¹⁴. To facilitate the development of ACTIMPs, we recommend a progressively iterative approach to potency assurance and potency assay development.

  업계용 가이던스 「Potency Assurance for Cellular and Gene Therapy Products」는 최종 확정되면 그러한 접근 방법을 기술하게 되며, 최종본은 FDA의 현재 견해를 나타내게 된다. 이 권고된 역가 보증 접근 방법은 특히 초기 제품 개발 동안 상당한 유연성을 허용하지만, 제품 역가가 시험대상자에 대한 위험을 평가하기에 부적절하거나 시험대상자가 질병 또는 상해의 불합리하고 중대한 위험에 노출될 경우 임상시험은 임상 보류(clinical hold)될 수 있다.¹⁵ 역가 시험을 설계, 평가 및 밸리데이션할 때 CBER 심사팀¹⁶과 적시에 논의할 것을 권고한다(참고문헌 11).

  The guidance for industry Potency Assurance for Cellular and Gene Therapy Products, when finalized, will describe such an approach and, when final, will represent FDA’s current thinking. Though this recommended approach to potency assurance allows substantial flexibility, especially during early product development, investigations may be placed on clinical hold if product potency is inadequate to assess the risks to subjects or if subjects would be exposed to an unreasonable and significant risk of illness or injury.¹⁵ We recommend timely discussions with your CBER review team¹⁶ as you design, evaluate, and validate your potency assay(s) (Ref. 11).

IV. 능동 면역치료제 역가 시험에 관한 일반 권고 사항IV. GENERAL RECOMMENDATIONS ON POTENCY ASSAYS FOR ACTIVE IMMUNOTHERAPY PRODUCTS

A. ACTIMP의 역가 평가A. Assessing Potency of ACTIMPs

• ACTIMP의 유효성분과 작용기전(MOA)에 대한 충분한 이해를 바탕으로, 로트 출하, 안정성 및 비교동등성을 위해 측정하여야 하는 역가 관련 핵심품질특성(CQA)을 파악하여야 한다. MOA(예: 항원 특이적 T세포 반응의 자극)와 역가 관련 CQA(예: 에피토프 특성) 사이의 관계는 근거(예: FDA 전문가를 포함하여 해당 분야에서 과학적 훈련과 경험으로 자격을 갖춘 전문가들이 일반적으로 인정하는 공개된 의학·과학 정보, 제품 특성분석 시험, 비임상시험 또는 임상시험)로 뒷받침되어야 한다.¹⁷ ACTIMP를 투여받은 시험대상자의 면역반응을 모니터링하여 제품의 MOA와 CQA에 관한 추가 지식을 얻을 수도 있다.

  A thorough understanding of the ACTIMP’s active ingredient(s) and mechanism of action (MOA) should be used to identify potency-related critical quality attributes (CQAs) that should be measured for lot release, stability, and comparability. The relationship between MOA (e.g., stimulation of an antigen-specific T cell response) and potency-related CQAs (e.g., epitope properties) should be supported (e.g., by published medical or scientific information that is generally accepted by experts qualified by scientific training and experience in the relevant field including FDA experts, product characterization studies, nonclinical studies, or clinical studies.)¹⁷ Additional knowledge about the product’s MOA and CQAs can also be gained through monitoring immune responses in study subjects who have received the ACTIMP.

• 역가 시험은 정량적이어야 하며, 의도한 치료 효과를 달성하기에 충분한 활성을 가진 제품과 활성이 불충분한 제품을 신뢰성 있게 구별하여 역가 미달 로트를 식별하고 불합격 처리할 수 있을 만큼 정밀도가 적절하여야 한다.

  Potency assays should be quantitative and should have adequate precision to reliably discriminate between a product that is sufficiently active to achieve its intended therapeutic effect and a product that has insufficient activity, to identify sub-potent lots and allow for their rejection.

• ACTIMP의 역가 시험은 의도한 치료 효과를 달성하도록 면역반응을 매개하는 제품의 능력 또는 역량을 직접 또는 간접적으로 측정하여야 한다.

  For ACTIMPs, potency assays should directly or indirectly measure the ability or capacity of the product to mediate immune responses to achieve the intended therapeutic effect.

• 제품의 역가 관련 CQA는 로트 출하 시험에서 측정하여야 하며, ACTIMP 로트의 일관된 성능을 보장하도록 적절한 허용기준을 설정하여야 한다. 공정 설계나 관리전략의 다른 측면이 특정 역가 관련 CQA가 허용 한계 안에 머무를 것을 적절히 보장함을 입증하면, 그 CQA에 대한 로트 출하 시험은 필요하지 않을 수 있다.

  The potency-related CQAs of the product should be measured during lot release testing, and appropriate acceptance criteria should be established to ensure consistent performance of ACTIMP lots. If you demonstrate that other aspects of the process design or control strategy adequately ensure that a particular potency-related CQA will remain within acceptable limits, then a lot release assay for that CQA may not be needed.

• 일부 ACTIMP는 제품의 역가에 기여할 것으로 예상되어 역가 관련 CQA로 고려하여야 하는 항원을 많이 함유할 수 있다. 다른 ACTIMP는 확인되지 않은 항원을 가질 수 있다(종양 용해물 등). 두 경우 모두 각 항원이 제품 역가에 기여하는 정도를 완전히 평가하는 것이 가능하지 않을 수 있다. 이러한 상황에 대해 다음을 권고한다:

  Some ACTIMPs may contain many antigens that are expected to contribute to the potency of the product and thus should be considered potency-related CQAs. Other ACTIMPs may have unidentified antigens (such as in tumor lysates). In both cases, it may not be feasible to fully assess the contribution of each antigen to product potency. We have the following recommendations for these situations:

• - ACTIMP가 세포 또는 세포 용해물로 구성되고, 각 항원이 제품 전체 활성에 기여하는 정도를 알 수 없거나 제품의 다른 구성 요소의 기여에 의존하는 경우에는, 단일 역가 시험이 제품의 역가 평가에 적절할 수 있다.

  - When an ACTIMP consists of cells or cell lysates and the contribution of each antigen to the overall activity of the product is either unknown or is dependent upon the contribution of other components in the product, then a single potency assay may be appropriate to assess potency of the product.

• - ACTIMP가 서로 다른 펩타이드 또는 단백질의 정해진 조합으로 구성된 경우에는, 제품의 면역학적 잠재력을 측정하는 단일 역가 시험이 적절할 수 있다. 그러나 ACTIMP 역가를 종합적으로 평가하기 위해, 그러한 시험은 개별 펩타이드 또는 단백질의 양 측정과 함께 수행하여야 한다.

  - When an ACTIMP consists of a defined combination of different peptides or proteins, a single potency assay that measures the immunological potential of the product may be appropriate. However, such assays should also be combined with measurement of the quantities of individual peptides or proteins to ensure a comprehensive assessment of the ACTIMP’s potency.

• 역가 시험에 필요한 모든 시험 시약은 임상 개발 초기에 제조하거나 공급원을 확보하여야 한다. 초기 시험 개발을 촉진하고 시험의 일관성을 보장하기 위해, 이러한 시약은 의도한 목적에 적합한 것으로 적격성 평가를 하여야 한다.
• 의뢰자는 역가 시험 개발 과정의 일부로, 자신의 임상시험계획(IND)에 배정된 CBER 심사팀과 역가 보증 전략 및 역가 시험 개발 계획을 논의하여야 한다(참고문헌 11).
• 일부 ACTIMP는 과학 문헌에서 흔히 면역증강제(adjuvant)라고 부르는 물질을 하나 이상 함유할 수 있다. 면역증강제가 제품의 안전성이나 역가에 나쁜 영향을 미치지 않는다는 만족스러운 증거가 없으면 허가된 제품에 면역증강제를 넣어서는 안 된다.¹⁸ ACTIMP에 면역증강제를 사용하는 경우, 의뢰자는 전체 역가 보증 전략의 일부로서 면역증강제에 대한 적절한 관리전략에 관해 CBER 심사팀과 협의할 것을 권고한다.

• All assay reagents necessary for potency assays should be generated or a source for their supply identified early in clinical development. These reagents should be qualified as suitable for their intended purposes, to facilitate early assay development and ensure assay consistency.
• As a part of the potency assay development process sponsors should discuss their potency assurance strategy and potency assay development plans with the CBER review team assigned to their Investigational New Drug (IND) application (Ref. 11).
• Some ACTIMPs may contain one or more substances commonly referred to in the scientific literature as an adjuvant. An adjuvant must not be introduced into a licensed product unless there is satisfactory evidence that it does not adversely affect the safety or the potency of the product.¹⁸ If an adjuvant is used in an ACTIMP, we recommend that sponsors consult with their CBER review team for guidance on the appropriate control strategy for the adjuvant as a part of the overall potency assurance strategy.

B. ACTIMP의 역가 관련 CQA 설정B. Establishing Potency-Related CQAs for ACTIMPs

• 제품이 치료 효과를 매개하는 방식을 이해하는 것은 제품의 역가 관련 CQA를 파악하는 데 중요하다. 의뢰자는 전임상 또는 개념 증명 자료(시험관내 또는 생체내), 이전 사람 임상시험 경험(사전 지식), 시험관내 세포 또는 생화학적 특성분석 시험 등 다양한 출처의 자료를 평가할 것을 권고한다.
• 역가 관련 CQA는 다음을 고려하여 제품마다 파악하여야 한다:

• An understanding of how the product mediates a therapeutic effect is important for identifying the product’s potency-related CQAs. We recommend that sponsors evaluate data from various sources, including preclinical or proof-of-concept data (in vitro or in vivo), previous human clinical trial experience (your prior knowledge), and in vitro cellular or biochemical characterization studies.
• Potency-related CQAs should be identified for each product by considering the following:

• - ACTIMP의 MOA에 관한 지식

  - Knowledge of the ACTIMP’s MOA;

• - 제품 특성분석 자료

  - Product characterization data;

• - CQA가 제품의 생물학적 활성에 미치는 영향, 즉 후보 역가 관련 CQA와 의도한 면역반응을 달성하는 제품의 능력 또는 역량 사이의 관계 평가

  - How the CQA(s) affect the product’s biological activity i.e., by assessing the relationship between candidate potency-related CQAs and the product’s ability or capacity to achieve the intended immune response; and

• - 후보 역가 관련 CQA에 관한 시험 자료

  - Data from studies of candidate potency-related CQAs.

C. ACTIMP의 역가 측정 접근 방법C. Approaches for Potency Measurement of ACTIMPs

• 생물학적 시험법(bioassay): ACTIMP 역가를 가장 직접적으로 평가하는 방법은 살아 있는 세포, 조직 또는 동물을 사용하여 제품이 면역계에 미치는 효과를 측정하는 정량적 생물학적 시험법이다. 생물학적 시험법은 이화학 시험만으로는 충분히 다루지 못할 수 있는 제품 역가에 대한 위험을 줄이는 데 도움이 될 수 있다. 생물학적 시험법은 시험관내 시험이나 생체내 시험 또는 이들 방법의 조합일 수 있다. 가능하면 언제나 동물 사용을 대체하거나 줄이는 방법을 권장한다.¹⁹ ACTIMP 역가 측정과 관련된 시험관내 생물학적 시험법의 예로는 증식, 사이토카인 생성 또는 세포독성 같은 항원 특이적 T세포 반응을 자극하는 ACTIMP의 능력을 정량하는 세포배양 기반 시험이 있으며, 이에 한정되지 않는다.

  Bioassays: The most direct assessment of ACTIMP potency is a quantitative bioassay that measures the product’s effect on the immune system using living cells, tissues, or animals. Bioassays can help mitigate risks to a product’s potency that may not be fully addressed through physicochemical assays alone. Bioassays may be either in vitro or in vivo assays or a combination of these methods. We encourage methods that replace or reduce the use of animals whenever possible.¹⁹ Examples of in vitro bioassays relevant for measuring ACTIMP potency include, but are not limited to, cell culture-based assays that quantitate the ability of the ACTIMP to stimulate antigen-specific T cell responses such as proliferation, cytokine production, or cytotoxicity.

  생체내 시험의 예로는 적절한 동물 모델에서 항원 특이적 면역반응을 유도하고, 동물에서 검체를 채취하여, 테트라머 염색, 세포내 사이토카인 염색, 효소결합 면역점 시험(ELISPOT) 또는 항체 반응 같이 제안된 MOA를 반영하는 측정을 하는 것이 있다.

  Examples of in vivo assays include induction of an antigen-specific immune response in appropriate animal models, collection of samples from animals, and measurements that reflect the proposed MOA, such as tetramer staining, intracellular cytokine staining, Enzyme-Linked Immunospot (ELISPOT), or antibody responses.

• 이화학 시험: 생물학적 시험법 없이도 ACTIMP의 역가를 적절히 보증할 수 있음을 입증한 경우에는, 이화학 시험만으로 역가 관련 CQA의 로트 출하 시험을 할 수 있다. 이화학 시험은 역가와 관련된 제품의 면역화학적, 생화학적 및/또는 분자적 특성을 평가하는 데 사용할 수 있다.

  Physicochemical assays: If you have established that the potency of an ACTIMP can be adequately assured without a bioassay, you can perform lot release testing of potency-related CQAs using physicochemical assays alone. Physicochemical assays may be used to assess immunochemical, biochemical, and/or molecular attributes of the product that are related to potency.

• 복수 측정: 단일 시험으로 적절히 평가할 수 없는 역가 관련 CQA가 여럿인 제품은 제품의 기능과 관련된 특성을 측정하는 상호 보완적인 시험을 여러 개 개발하여야 한다. 이 전략에는 서로 다른 생물학적 시험법 및/또는 이화학 시험의 조합이 포함될 수 있다.

  Multiple measures: For products that have multiple potency-related CQAs that cannot be adequately evaluated using a single assay, you should develop multiple complementary assays that measure attributes associated with the product’s function. This strategy may include a combination of different bioassays and/or physicochemical tests.

V. 능동 면역치료제 유형별 역가 시험V. POTENCY ASSAYS FOR SPECIFIC TYPES OF ACTIVE IMMUNOTHERAPY PRODUCTS

A. 비개인 맞춤형²⁰ 펩타이드·단백질 기반 ACTIMPA. Non-personalized²⁰ Peptide- and Protein-based ACTIMPs

• 각 제품 배치에 동일한 펩타이드, 펩타이드 연쇄체(concatemer), 정제 단백질, 단백질 접합체 또는 재조합 단백질이 들어 있는 ACTIMP의 경우, 제품 수명주기 전반에 걸쳐 시험의 일관성을 보장하도록 역가 시험과 필요한 시험 특이 시약(예: 시험 특이 세포주, 항체, 테트라머)을 초기 제품 개발 동안 개발하고 적격성 평가를 할 것을 권고한다.

  In the case of ACTIMPs where each product batch contains the same peptide(s), peptide concatemers, purified proteins, protein conjugates, or recombinant protein(s), we recommend that the potency assay and the necessary assay-specific reagents (e.g., assay specific cell lines, antibodies, tetramers) be developed and qualified during early product development to ensure assay consistency throughout the product life cycle.

• 비개인 맞춤형 단백질 또는 펩타이드 제품의 이화학적 특성이 의도한 면역반응을 달성하는 제품의 능력 또는 역량을 평가하기에 충분하다고 확립된 경우에는, 로트 출하 시험과 안정성시험에서 이화학적 특성만으로 제품 역가를 평가할 수 있다.

  When the physicochemical attributes of a non-personalized protein or peptide product have been established as sufficient to assess the product’s ability or capacity to achieve the intended immunological response, the physicochemical attributes alone may be used to evaluate the product’s potency for lot release testing and stability studies.

• 이화학 시험만으로 의도한 면역반응을 달성하는 제품의 능력 또는 역량을 규정하기에 충분하지 않은 경우에는, 제품의 면역학적 활성을 보증하기 위해 생물학적 시험법이 필요할 수 있다. 예를 들어 제품이 이화학 시험만으로 적절히 정량할 수 없는 여러 단백질로 구성되어 있거나, 항원 처리 또는 에피토프 제시에 영향을 줄 수 있는 화학적·구조적 변화에 취약하고 이러한 변화를 이화학 시험으로 신뢰성 있게 정량할 수 없는 경우, 역가 평가에 생물학적 시험법이 필요할 수 있다.

  When physicochemical tests alone are not sufficient to define the product’s ability or capacity to achieve the intended immunological response, a bioassay may be needed to assure the product’s immunological activity. For example, a bioassay may be needed to assess potency if the product consists of multiple proteins that cannot be adequately quantitated through physicochemical assays alone, or if the product is susceptible to chemical or structural changes that may affect antigen processing or epitope presentation and these changes cannot be reliably quantitated using physicochemical tests.

• 여러 단백질 또는 단일 폴리펩타이드 사슬로 연결된 여러 항원 에피토프로 구성된 제품에 대한 생물학적 시험법을 설계하는 경우, 생물학적 시험법은 모든 에피토프를 평가하기보다 제품 또는 연쇄체의 개별 항원 에피토프 하나 이상의 활성을 정량하는 것으로 충분할 수 있다.

  If you are designing a bioassay for a product that consists of multiple proteins or multiple antigenic epitopes concatemerized into a single polypeptide chain, it may be sufficient for the bioassay to quantitate the activity of one or more individual antigenic epitopes in the product or concatemer, rather than assessing all of the epitopes.

• o 제품 또는 연쇄체에 들어 있는 제한된 수의 항원 활성을 바탕으로 생물학적 시험법으로 역가를 정하는 경우에는, 폴리펩타이드 사슬의 서열 동일성을 확인하고 단백질 농도를 정량하기 위한 이화학 시험도 추가로 수행하여야 한다.

  o When a bioassay is used to determine potency based on the activity of a limited number of antigens in a product or concatemer, additional physicochemical tests should also be performed to confirm sequence identity of the polypeptide chain and to quantitate the protein(s) concentration.

• 일부 비개인 맞춤형 펩타이드·단백질 기반 ACTIMP는 완제의약품(DP)을 여러 바이알로 공급하며, 각 바이알은 ACTIMP의 DP 펩타이드/단백질 중 일부를 함유하도록 제형화된다(예: ACTIMP가 침전이나 응집을 막기 위해 따로 제형화한 여러 합성 펩타이드 에피토프로 구성되고, 사용 전에 임상 현장에서 적절한 면역증강제와 함께 혼합하는 경우). 그러한 제품은 DP의 바이알별 구성분마다 역가 출하 시험을 따로 수행하여야 한다.

• Some non-personalized peptide- and protein-based ACTIMPs are supplied in multiple vials for the drug product (DP) that are each formulated to contain a subset of the DP peptides/proteins in the ACTIMP (e.g., when an ACTIMP consists of multiple synthetic peptide epitopes that are formulated separately in order to prevent precipitation or aggregation and are mixed together with a suitable adjuvant at the clinical site prior to use). For such products, potency release testing should be performed separately for each vialed subset of the DP.

B. 비개인 맞춤형 벡터 기반 ACTIMPB. Non-personalized Vectored ACTIMPs

• 바이러스 벡터, 세균 벡터, DNA 또는 RNA 기반 ACTIMP를 포함한 벡터 기반 ACTIMP는 의도한 효과를 유도하기 위해 두 가지 생물학적 활성, 즉 유전 서열을 세포에 전달하는 능력과 발현된 유전자 서열의 의도한 생물학적 효과에 의존한다. 따라서 이러한 유형의 ACTIMP에 대한 역가 시험에는 단백질 발현 시험(발현된 단백질의 양과 그 면역학적 활성 사이의 직접적 관계에 대한 증거로 타당성이 입증된 경우)이나, 발현된 단백질에 대한 면역반응을 측정하는 생물학적 시험법(예: 벡터로 형질도입한 APC가 표적 항원 특이적 T세포를 활성화하는 능력)을 통한 정량적 역가 생물학적 시험법이 포함되어야 한다.
• 표적 외 면역반응 유도에 관한 우려와 항원 경쟁 및 치료 효과 감소 가능성 때문에, 개념 증명 시험에서 치료적 이익을 주는 기능적 역할이 입증되지 않은 한 벡터에 리포터 유전자나 무관한 에피토프를 도입하여 사용하는 것은 권고하지 않는다.²¹

• Vectored ACTIMPs, including those based on viral vectors, bacterial vectors, DNA, or RNA, depend on two biological activities to induce their intended effect: the ability to transfer a genetic sequence to a cell, and the intended biological effect of the expressed gene sequence. Therefore, potency assays for these types of ACTIMPs should incorporate a quantitative potency bioassay either through a protein expression assay (when justified by evidence of a direct relationship between the level of expressed protein and its immunological activity), or through a bioassay that measures immune responses to the expressed protein (for example, the ability of vector-transduced APCs to activate target antigen-specific T cells).
• Because of concerns related to induction of off-target immune responses and the possibility of antigenic competition and reduction of the therapeutic effect, we do not recommend the introduction and use of reporter genes or irrelevant epitopes in the vector, unless their functional role in rendering a therapeutic benefit has been demonstrated in proof-of-concept studies.²¹

C. 개인 맞춤형 펩타이드·단백질 기반 ACTIMPC. Personalized Peptide- and Protein-based ACTIMPs

• 1상 임상시험에서는 생물정보학 파이프라인의 과학적 타당성 입증으로 뒷받침되는 서열 확인을 바탕으로 신생항원 펩타이드/단백질의 역가를 추정할 수 있다. 과학적 타당성 입증은 in silico 시험 자료와, 관련 에피토프를 예측하는 능력에 관한 기존 사전 지식(전임상시험과, 해당 분야에서 과학적 훈련과 경험으로 자격을 갖춘 전문가들이 일반적으로 인정하는 동료 심사를 거친 공개 의학·과학 문헌에서 얻은 것)을 근거로 할 수 있다.

• For Phase 1 clinical studies, potency of the neoantigen peptides/proteins may be inferred based on sequence confirmation, supported by scientific justification of the bioinformatics pipeline. The scientific justification may be based on data from in silico studies and existing prior knowledge (from preclinical studies and from published, peer reviewed medical and scientific literature that is generally accepted by experts qualified by scientific training and experience in the relevant fields) about the ability to predict relevant epitopes.

• o 후기 단계 임상시험에서, 타당성이 입증된 생물정보학 파이프라인 사용을 포함하여 적격성 평가를 한 제조공정으로 신생항원 에피토프를 제조하는 경우에는, 개인 맞춤형 ACTIMP 로트마다 역가 관련 생물학적 시험법을 개발할 필요 없이 이화학 시험에 근거한 신생항원 에피토프의 역가 관련 CQA 측정으로 로트 출하를 위한 제품 역가 확인에 충분할 수 있다.

  o For later phase studies, when the neoantigen epitopes are manufactured using a qualified manufacturing process, including use of a justified bioinformatics pipeline, measurements of potency-related CQAs of the neoantigenic epitopes based on physicochemical testing may be sufficient to confirm product potency for lot release, without the need to develop potency-related bioassays for each personalized ACTIMP lot.

• 생물정보학 파이프라인²⁵이나 제조공정의 다른 측면에 예측 에피토프 또는 역가 관련 CQA를 변화시킬 수 있는 변경을 하는 경우, 그 변경이 제품의 안전성 및 유효성과 관련된 제품 역가에 나쁜 영향을 미치지 않음을 보장하기 위해 추가 시험이 필요할 수 있다. 생물정보학 파이프라인의 변경은 제품의 안전성과 유효성에 영향을 줄 수 있으며, FDA에 보고하여야 하는 필수 정보에 대한 보고 요건의 적용을 받는다는 점에 유의한다.^{26, 27} 생물정보학 파이프라인 변경을 포함한 제조 변경을 도입하기 위해 제품 역가의 비교동등성을 포함한 추가 평가가 필요한지는 종합적인 위해성 평가를 바탕으로 정하여야 한다. 제조공정 변경의 관리와 제조 변경 후 비교동등성 판단은 이 가이던스의 범위를 벗어난다.²⁸

• If changes are made to the bioinformatics pipeline²⁵ or to other aspects of the manufacturing process that may lead to changes in the predicted epitopes or potency-related CQAs, then additional studies may be necessary to ensure that the changes do not adversely affect the potency of the product relating to the safety and effectiveness of the product. Note that a change to the bioinformatics pipeline can affect a product’s safety and efficacy, and is subject to reporting requirements for essential information that must be reported to the Agency.^{26, 27} The need for additional assessments, including comparability of product potency, to support introduction of manufacturing changes, including changes to the bioinformatics pipeline, should be determined based on a comprehensive risk assessment. Managing changes to the manufacturing process and determining comparability following manufacturing changes are beyond the scope of this guidance.²⁸

D. 개인 맞춤형 벡터 기반 ACTIMPD. Personalized Vectored ACTIMPs

• 개인 맞춤형 벡터 기반 ACTIMP는 생물학적 시험법으로 벡터의 역가 관련 CQA를 평가할 것을 권고한다(이 가이던스의 IV. B항). 생물정보학 파이프라인으로 도출되어 벡터가 발현하는 개인 맞춤형 표적 에피토프의 활성은 개인 맞춤형 펩타이드/단백질 기반 ACTIMP에 대해 기술한 것과 비슷한 전략으로 평가할 수 있다(이 가이던스의 IV.C항).

  For personalized vectored ACTIMPs, we recommend that you evaluate potency-related CQAs of the vector using a bioassay (section IV. B of this guidance). The activity of the vector expressed personalized target epitopes derived using a bioinformatics pipeline may be assessed using a similar strategy as that described for personalized peptide/protein-based ACTIMP (section IV.C of this guidance).

• 특정 생물정보학 파이프라인의 타당성 입증을 포함하여 전체 제조공정의 적격성 평가가 끝나면(이 가이던스의 V.C항), ACTIMP 로트에 포함된 개인 맞춤형 표적 에피토프의 활성을 보증하는 데 이화학 시험(벡터 서열 확인 등)으로 충분할 수 있다. 그러나 생물정보학 파이프라인이나 제조공정이 변경되면, 제품 역가를 보증하기 위해 새 공정으로 생산한 로트를 사용한 추가 적격성 평가 시험이 필요할 수 있다.

  Once the entire manufacturing process has been qualified including justification for a specific bioinformatics pipeline (section V.C of this guidance), physicochemical testing (such as confirmation of vector sequence) may be sufficient to assure the activity of personalized target epitopes included in the ACTIMP lots. However, if the bioinformatics pipeline or manufacturing process is changed, additional qualification studies using lots generated by the new process may be needed to assure product potency.

• 벡터로 전달할 암호화 서열을 만들기 위해 여러 환자 특이적 표적 에피토프를 하나의 해독틀(reading frame)에 결합하는 경우, 암호화 서열 내 에피토프 순서(반복되는 에피토프 서열 포함)의 영향을 평가하고 타당성을 입증하여야 한다. 서로 다른 환자 특이적 제품 로트의 역가 수준이 비슷하다는 보증을 위해, 암호화 서열에서 에피토프를 배열하는 순서의 근거를 가능한 한 일정하게 유지할 것을 권고한다.

  When multiple patient specific target epitopes are combined in a single reading frame to generate the coding sequence for delivery by a vector, the effect of the order of epitopes (including any repeated epitope sequences) in the coding sequence should be evaluated and justified. To provide assurance of similar levels of potency for different patient specific product lots, we recommend that the rationale for the order in which the epitopes are arranged in the coding sequence be kept constant to the extent feasible.

• 비환자 특이적 벡터 기반 ACTIMP와 마찬가지로, 개념 증명 시험에서 치료적 이익을 주는 기능적 역할이 입증되지 않은 한 벡터에 리포터 유전자나 무관한 에피토프를 도입하여 사용하는 것은 권고하지 않는다.

  As with non-patient specific vectored ACTIMPs, we do not recommend the introduction and use of reporter genes or irrelevant epitopes in the vector, unless their functional role in rendering a therapeutic benefit has been demonstrated in proof-of-concept studies.

E. 세포 기반 ACTIMPE. Cell-based ACTIMPs

• 살아 있는 세포 기반 ACTIMP의 역가 시험은 의도한 대로 작용하는 능력을 평가하는 데 쓸 수 있는 세포 제품의 활성을 측정하여야 한다.
• 알려진 항원 및/또는 면역조절 분자(예: 사이토카인)를 발현하는 세포 기반 ACTIMP의 역가는 발현된 항원 및/또는 면역조절 분자 같은 역가 관련 CQA와 함께 세포의 추가 역가 관련 CQA(예: 세포의 공동자극 분자 발현 평가)를 평가하여 평가하여야 한다.
• 세포 생존율은 중요한 역가 관련 CQA이며 전체 역가 평가의 일부가 되어야 한다.
• 서로 다른 세포 유형으로 구성된 ACTIMP에서 각 세포 유형이 ACTIMP 활성에 기여하는 정도를 알 수 없거나 제품 내 다른 세포 유형과 상호 의존적인 경우, 제품 전체에 대해 역가를 평가하는 것이 적절할 수 있다.
• 둘 이상의 세포 집단이 같은 MOA로 제품 기능에 기여하는 경우(예: 두 종류의 APC 또는 두 가지 자가 세포 용해물을 함유한 제품), 전체 생물학적 활성을 측정하는 통합 역가 시험으로 충분할 수 있다.
• 둘 이상의 세포 집단이 서로 다르고 독립적인 MOA로 제품 활성에 기여하도록 의도된 경우, 각 세포 집단이 제품 역가에 기여하는 정도를 독립적으로 평가하거나, 서로 다르고 독립적인 기여를 모두 측정할 수 있는 통합 시험으로 평가하여야 한다.

• Potency assays for live cell-based ACTIMPs should measure an activity of the cellular product that can be used to evaluate its ability to perform as intended.
• The potency of cell-based ACTIMPs that express known antigens and/or immunomodulatory molecules (e.g., cytokines) should be assessed by evaluating potency-related CQAs such as the expressed antigen and/or immunomodulator along with additional potency-related CQAs of the cells (e.g., assessment of co-stimulatory molecule expression by the cell).
• Cell viability is an important potency-related CQA and should be a part of the overall potency assessment.
• For ACTIMPs consisting of different cell types, where the contributions of each cell type to the activity of the ACTIMP are either unknown or are interdependent with other cell types in the product, it may be appropriate to assess potency on the product as a whole.
• When two or more cell populations contribute to product function via the same MOA (e.g., two types of APCs or a product containing two autologous cell lysates), a combined potency assay that measures the total biological activity may be sufficient.
• When two or more cell populations are intended to contribute to product activity via distinct and independent MOAs, the contribution of each cell population to the potency of the product should be evaluated independently or in a combined assay that can measure all distinct and independent contributions.

항원을 펄스한 APC 기반 ACTIMPAntigen-pulsed APC-based ACTIMP

• APC에 하나 이상의 항원을 펄스하는 경우, APC 펄스에 사용하는 항원의 품질은 제품 활성에 핵심적이다. 항원을 펄스한 APC의 역가 평가에 대해 다음을 권고한다:

• When an APC is pulsed with an antigen or multiple antigens, the quality of the antigen(s) used to pulse APC is critical to the activity of the product. We have the following recommendations for assessing potency of an antigen-pulsed APC:

• - 항원을 펄스한 APC의 역가는 APC의 역가 관련 CQA를 측정하여 평가하여야 한다. 이 예에서 역가 관련 CQA에는 세포 생존율, APC 표면의 HLA 또는 기타 활성화 표지자의 발현 증가, 사이토카인 생성 또는 관련 생물학적 활성(예: T세포를 활성화하는 능력)의 평가가 포함될 수 있다. 따라서 제품의 관련 역가 관련 CQA를 종합적으로 평가하기 위해, APC 기능을 적절히 판정할 수 있도록 직교(orthogonal) 방법을 사용할 것을 권고한다.

  - Potency of antigen-pulsed APCs should be assessed by measuring potency-related CQAs of the APC. In this example, the potency-related CQAs may include assessments of cell viability, upregulation of HLA or other activation markers on the APC surface, cytokine production, or a relevant biological activity (e.g., the ability to activate T cells). Therefore, to ensure a comprehensive assessment of the relevant potency-related CQAs of the product, we recommend the use of orthogonal methods to adequately determine APC function.

• − APC 펄스에 사용하는 개별 펩타이드와 종양 용해물의 핵심 특성은 핵심 물질에 대한 관리전략의 일부로 평가하여야 하며, 이러한 특성에 대한 기준은 전체 역가 보증 전략에 포함되어야 한다. 항원의 품질은 공급업체 적격성 평가, 물질 허용기준 및 안정성의 일부로 평가하여야 한다.²⁹ 이러한 물질 품질 측정의 일부에는 물질의 활성과도 관련될 수 있는 생물학적 시험법이나 이화학 시험이 포함될 수 있다.

  − The critical attributes of the individual peptides and tumor lysates used to pulse APCs should be assessed as part of the control strategy for critical materials, and specifications for these attributes should be included in the overall potency assurance strategy. The quality of the antigen(s) should be assessed as part of vendor qualification, material acceptance criteria, and stability.²⁹ Some of these material quality measures might include bioassays or physicochemical testing that could also relate to the activity of the material.

방사선 조사 종양세포 기반 ACTIMPIrradiated tumor cell-based ACTIMPs

• 방사선 조사 종양세포에는 자가 종양 유래 일차 세포, 동종 일차 세포, 짧은 기간 체외(ex vivo) 배양한 종양 유래 세포(이질적 세포) 또는 균질한 종양 세포주가 포함된다. 이러한 세포는 면역조절 단백질(예: 사람 과립구 대식세포 집락자극인자[GM-CSF] 같은 사이토카인)을 발현하도록 유전자 변형되기도 한다. 세포는 면역 자극 단백질과 항원 전체를 발현하는 능력은 유지하면서 생체내 증식은 막기 위해 방사선을 조사한다. 방사선 조사 세포는 생물학적 효과를 내기 위해 생체내에서 짧은 기간 생존할 것으로 예상된다. 생물학적 활성 수준은 방사선 조사 정도와 세포가 아직 살아 있는지에 따라 달라질 수 있다. 따라서 제품 역가가 세포막이 온전한 세포의 존재에 의존하지 않는 경우가 아니라면, 살아 있는 세포(세포막이 온전한 세포)의 비율을 측정할 것을 권고한다. 방사선 조사 세포 제품의 유형에 따라 추가 유형의 역가 시험이 적절할 수 있다. 제품 품질 보증에 도움이 되는 적합한 역가 시험을 정하기 위해 위험 기반 접근 방법을 권고한다. 아래 예는 설명을 위한 것일 뿐이다.

• Irradiated tumor cells include autologous tumor-derived primary cells, allogeneic primary cells, tumor-derived cells that are cultured ex vivo for a short period of time (heterogenous cells), or homogenous tumor cell lines. These cells are sometimes genetically modified to express an immunomodulatory protein (e.g., a cytokine such as the human granulocyte macrophage colony stimulating factor [GM-CSF]). The cells are irradiated to prevent growth in vivo while preserving their ability to express the full spectrum of immune-stimulating proteins and antigens. Irradiated cells are expected to survive for a short period of time in vivo to provide their biological effect. The level of biological activity may vary depending on the extent of irradiation and whether the cells are still viable. We therefore recommend that you determine the percentage of live cells (membrane-intact cells), unless the potency of the product does not depend on the presence of membrane-intact cells. Depending on the type of irradiated cell product, additional types of potency assays may be appropriate. We recommend a risk-based approach to determine suitable potency assays to help assure product quality. The examples below are for illustrative purposes only.

• − 예 1: 방사선 조사 세포 제품이 유전자 변형되지 않았고 제품의 활성이 세포 단백질의 지속적 생산에 의존하지 않는 경우, 관련 역가 관련 CQA(예: 항원의 양 또는 특정 단백질 패턴)에 대한 이화학 시험으로 역가를 평가하는 것으로 충분할 수 있다.

  − Example 1: If the irradiated cellular product is not genetically modified and the product’s activity is not dependent on the continued production of a cellular protein, it may be sufficient to assess potency using physicochemical assays for relevant potency-related CQAs (e.g., amount of antigen or specific protein patterns).

• − 예 2: 방사선 조사 세포가 GM-CSF 같은 면역조절 분자를 지속적으로 생산할 수 있도록 유전자 변형된 경우, GM-CSF 단백질 발현과 그 생물학적 기능을 정량적으로 측정하는 시험을 역가 시험으로 포함하여야 한다.

  − Example 2: If the irradiated cell is genetically modified in such a way to enable continued production of an immunomodulatory molecule, such as GM-CSF, an assay that provides a quantitative measure of GM-CSF protein expression and its biological function should be included as a potency assay.

종양 용해물 기반 ACTIMPTumor lysate-based ACTIMPs

• 종양 용해물은 자가 또는 동종 일차 종양이나 종양 유래 세포주에서 얻을 수 있다. 제조공정 중, 보관 중 또는 제조 변경 후 필수 항원의 손실이나 분해는 제품 역가를 크게 떨어뜨릴 수 있다. 제조공정에서 생기는 변동성과 종양 분리물마다의 변동성을 줄이기 위해, 특성분석 시험에서 용해물 내 관련 단백질의 양을 측정하고 이 정보를 사용하여 로트 간 일관성을 보장하는 로트 출하 허용기준을 설정할 것을 권고한다.

• Tumor lysates may be derived from autologous or allogeneic primary tumors or from tumor-derived cell lines. Loss or degradation of essential antigens during the manufacturing process, during storage, or after a manufacturing change could significantly reduce product potency. In order to reduce variability arising from the manufacturing process and the variability in each tumor isolate, we recommend that you determine the quantity or quantities of relevant protein or proteins in the lysate(s) during characterization studies and use this information to develop lot release acceptance criteria to ensure lot-to-lot consistency.

VI. 참고문헌VI. REFERENCES

1. Potency Assurance for Cellular and Gene Therapy Products (Draft, December 2023) Available at: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/potency-assurance-cellular-and-gene-therapy-products.
2. Application of Current Statutory Authorities to Human Somatic Cell Therapy Products and Gene Therapy Products. October 14, 1993; 58 FR 53248. Available at: http://www.fda.gov/downloads/BiologicsBloodVaccines/SafetyAvailability/UCM148113.pdf.
3. International Conference on Harmonisation: Guidance for Industry: Q9(R1) Quality Risk Management (2023). Available at: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/q9r1-quality-risk-management.
4. International Conference on Harmonisation: Guidance for Industry: Q5E Comparability of Biotechnological/Biological Products Subject to Changes in Their Manufacturing Process. (June 2005). Available at: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/q5e-comparability-biotechnologicalbiological-products-subject-changes-their-manufacturing-process.
5. Manufacturing Changes and Comparability for Human Cellular and Gene Therapy Products Guidance for Industry (Draft, July 2023). Available at: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/manufacturing-changes-and-comparability-human-cellular-and-gene-therapy-products.
6. International Conference on Harmonisation: Final Guidelines on Stability Testing of Biotechnological/Biological Products (ICH Q5C). 61 FR 36466, July 10, 1996. Available at: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/q5c-quality-biotechnological-products-stability-testing-biotechnologicalbiological-products.
7. International Conference on Harmonisation: Guidance on Specifications: Test Procedures and Acceptance Criteria for Biotechnological/Biological Products (ICH Q6B). 64 FR 44928, August 18, 1999. Available at: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/q6b-specifications-test-procedures-and-acceptance-criteria-biotechnologicalbiological-products.
8. Guidance for Industry: Chemistry, Manufacturing, and Control (CMC) Information for Human Gene Therapy Investigational New Drug Applications (INDs) (January 2020). Available at: https://www.fda.gov/media/113760/download.
9. Guidance for Reviewers: Instructions and Template for Chemistry, Manufacturing, and Control (CMC) Reviewers of Human Somatic Cell Therapy Investigational New Drug Applications (INDs). (April 2008). Available at: Guidance for Human Somatic Cell Therapy and Gene Therapy | FDA.
10. Guidance for Industry: CGMP for Phase 1 Investigational Drugs. (July 2008). Available at: https://www.fda.gov/media/70975/download.
11. Guidance for Industry: Formal Meetings Between the FDA and Sponsors or Applicants of PDUFA Products (Draft, September 2023). Available at: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/formal-meetings-between-fda-and-sponsors-or-applicants-pdufa-products.