이 가이던스는 이 주제에 관한 FDA의 현재 견해를 나타낸다. 이 가이던스는 누구에게도 어떠한 권리를 설정하지 않으며, FDA나 일반 대중을 구속하지 않는다. 적용 법률과 규정의 요건을 충족한다면 다른 접근 방법을 사용할 수 있다. 다른 접근 방법을 논의하려면 표지에 적힌 이 가이던스 담당 FDA 직원에게 연락한다.

This guidance represents the current thinking of the Food and Drug Administration (FDA or Agency) on this topic. It does not establish any rights for any person and is not binding on FDA or the public. You can use an alternative approach if it satisfies the requirements of the applicable statutes and regulations. To discuss an alternative approach, contact the FDA staff responsible for this guidance as listed on the title page.

인체 유전자치료는 치료 목적으로 유전자의 발현을 변형하거나 조작하는 것, 또는 살아 있는 세포의 생물학적 특성을 바꾸는 것을 목표로 한다. FDA는 인체 유전자치료제 임상시험계획(IND)의 의뢰자에게 IND로 제출하는 화학, 제조 및 품질관리(chemistry, manufacturing, and control, CMC) 정보에 관한 권고사항을 제공한다. 이 가이던스의 목적은 임상시험용 제품의 안전성, 확인, 품질, 순도 및 함량(역가 포함)을 보증하는 데 필요한 충분한 CMC 정보를 제공하는 방법을 의뢰자에게 알리는 것이다(21 Code of Federal Regulations(CFR) 312.23(a)(7)(i)).

Human gene therapy seeks to modify or manipulate the expression of a gene or to alter the biological properties of living cells for therapeutic use. We, FDA, are providing you, sponsors of human gene therapy Investigational New Drug Applications (INDs), recommendations regarding chemistry, manufacturing, and control (CMC) information submitted in an IND. The purpose of this guidance is to inform sponsors how to provide sufficient CMC information required to assure product safety, identity, quality, purity, and strength (including potency) of the investigational product (21 Code of Federal Regulations (CFR) 312.23(a)(7)(i)).

이 가이던스는 인체 유전자치료제와, 인체 유전자치료제가 의약품 또는 의료기기와 결합된 복합제품¹에 적용된다.²

This guidance applies to human gene therapy products and to combination products¹ that contain a human gene therapy in combination with a drug or device.²

이 가이던스는 2018년 7월에 나온 같은 제목의 초안 가이던스를 최종 확정한 것이며, 2008년 4월 문서 「Guidance for FDA Reviewers and Sponsors: Content and Review of Chemistry, Manufacturing, and Control (CMC) Information for Human Gene Therapy Investigational New Drug Applications (INDs)」(2008년 4월 가이던스)를 대체한다. 2008년 4월 가이던스를 발행한 이후 유전자치료 분야는 빠르게 발전하였다. 따라서 FDA는 유전자치료제 IND의 CMC 내용에 관한 현재 FDA 권고사항을 제공하기 위해 그 가이던스를 개정한다.

This guidance finalizes the draft guidance of the same title dated July 2018 and supersedes the document entitled “Guidance for FDA Reviewers and Sponsors: Content and Review of Chemistry, Manufacturing, and Control (CMC) Information for Human Gene Therapy Investigational New Drug Applications (INDs),” dated April 2008 (April 2008 guidance). The field of gene therapy has progressed rapidly since we issued the April 2008 guidance. Therefore, we are updating that guidance to provide you with current FDA recommendations regarding the CMC content of a gene therapy IND.

이 가이던스는 국제공통기술문서(Common Technical Document, CTD)에 관한 FDA 가이던스의 구성을 따르도록 짜여 있다. CTD에 관한 정보는 FDA 업계 가이던스 「M4Q: The CTD – Quality」(참고문헌 1)에서 찾을 수 있다. 전자 CTD(eCTD) 제출에 관한 정보는 FDA 웹사이트 https://www.fda.gov/drugs/electronic-regulatory-submission-and-review/electronic-common-technical-document-ectd 를 참조한다.

This guidance is organized to follow the structure of the FDA guidance on the Common Technical Document (CTD). Information on the CTD can be found in FDA’s Guidance for Industry: “M4Q: The CTD – Quality,” (Ref. 1). For information on the submission of an electronic CTD (eCTD), please see the FDA website https://www.fda.gov/drugs/electronic-regulatory-submission-and-review/electronic-common-technical-document-ectd.

이 가이던스를 포함한 FDA 가이던스 문서는 법적 강제력이 있는 책임을 설정하지 않는다. 가이던스는 어떤 주제에 관한 FDA의 현재 견해를 설명하며, 특정 규제 또는 법적 요건을 인용한 경우가 아니면 권고사항으로만 보아야 한다. FDA 가이던스에서 should라는 단어는 어떤 것을 제안하거나 권고한다는 뜻이며, 요구한다는 뜻이 아니다.

FDA’s guidance documents, including this guidance, do not establish legally enforceable responsibilities. Instead, guidances describe the FDA’s current thinking on a topic and should be viewed only as recommendations, unless specific regulatory or statutory requirements are cited. The use of the word should in FDA’s guidance means that something is suggested or recommended, but not required.

FDA는 일반적으로 전달된 유전물질의 전사 또는 번역을 통해, 또는 숙주(인체) 유전자 서열을 특이적으로 변경하여 효과를 매개하는 모든 제품을 인체 유전자치료제에 포함하는 것으로 본다. 유전자치료제의 예로는 핵산(예: 플라스미드, 시험관내 전사 리보핵산(RNA)), 유전자 변형 미생물(예: 바이러스, 세균, 진균), 인체 유전체 편집에 쓰이는 조작된 부위 특이적 뉴클레아제(참고문헌 2), 그리고 생체외(ex vivo)에서 유전자가 변형된 인체 세포가 있다. 유전자치료제가 인체의 질병 또는 상태의 예방, 치료 또는 완치에 적용되는 경우, 그 제품은 공중보건서비스법(Public Health Service(PHS) Act) 351(i)항(42 U.S.C. 262(i))의 「생물의약품」 정의에 해당한다.³

FDA generally considers human gene therapy products to include all products that mediate their effects by transcription or translation of transferred genetic material or by specifically altering host (human) genetic sequences. Some examples of gene therapy products include nucleic acids (e.g., plasmids, in vitro transcribed ribonucleic acid (RNA)), genetically modified microorganisms (e.g., viruses, bacteria, fungi), engineered site-specific nucleases used for human genome editing (Ref. 2), and ex vivo genetically modified human cells. Gene therapy products meet the definition of “biological product” in section 351(i) of the Public Health Service (PHS) Act (42 U.S.C. 262(i)) when such products are applicable to the prevention, treatment, or cure of a disease or condition of human beings.³

FDA는 임상시험용 유전자치료제를 포함한 모든 임상시험용 신약 완제의약품(DP)의 의뢰자에게 원료의약품(DS)(21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(a))과 완제의약품(21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(b))의 CMC 정보를 기술하도록 요구한다. IND에 제안된 시험에서 시험대상자에 대한 위험을 평가하기에 충분한 CMC 정보가 없으면 FDA는 그 IND에 임상 보류(clinical hold)를 결정할 수 있다(21 CFR 312.42(b)(1)(iv)).

FDA requires all sponsors of investigational new drug products (DPs), including investigational gene therapy products, to describe the CMC information for the drug substance (DS) (21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(a)) and the DP (21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(b)). FDA may place the IND on clinical hold if the IND does not contain sufficient CMC information to assess the risks to subjects in the proposed studies (21 CFR 312.42(b)(1)(iv)).

IND로 제출한 CMC 정보는 임상시험용 제품을 기술된 대로 제조하고 시험하겠다는 의뢰자의 약속을 나타낸다. FDA는 제품 개발이 진행됨에 따라 제조 변경이 필요할 수 있음을 인정하며, 의뢰자는 CMC 공정에 관해 처음 제출한 정보를 보충하는 정보 변경(information amendment)을 제출하여야 한다(21 CFR 312.31(a)(1)). 초기 단계 임상시험을 위한 최초 IND로 제출하는 CMC 정보는 제한적일 수 있으므로, 제조 변경(경미한 변경이라도)이 제품 안전성과 품질에 미치는 영향이 충분히 이해되지 않을 수 있다. 따라서 제조 변경이 제품의 안전성, 확인, 품질, 순도, 역가 또는 안정성에 영향을 줄 수 있다면, 그 변경을 시행하기 전에 FDA 검토를 위해 제출하여야 한다.

The CMC information submitted in an IND describes the sponsor’s commitment to perform manufacturing and testing of the investigational product as stated. We acknowledge that manufacturing changes may be necessary as product development proceeds, and you should submit information amendments to supplement the initial information submitted for the CMC processes (21 CFR 312.31(a)(1)). The CMC information submitted in the original IND for an early phase study may be limited, and therefore, the effect of manufacturing changes, even minor changes, on product safety and quality may not be sufficiently understood. Thus, if a manufacturing change could affect product safety, identity, quality, purity, potency, or stability, you should submit the manufacturing change for FDA review prior to implementation.

FDA는 CTD 형식으로 된 특정 신청의 전자 제출을 다루는 가이던스 문서 「Providing Regulatory Submissions in Electronic Format – Certain Human Pharmaceutical Product Applications and Related Submissions Using the eCTD Specifications; Guidance for Industry」를 발행하였다(참고문헌 3). 2017년 5월 5일부터 모든 신약 허가신청(NDA), 제네릭의약품 허가신청(ANDA) 및 생물의약품 허가신청(BLA)은 eCTD로 제출하여야 하며, 상업용 IND 제출과 마스터 파일(Master File)⁴은 2018년 5월 5일부터 eCTD로 제출하여야 한다(참고문헌 3).⁵

We published a guidance document entitled “Providing Regulatory Submissions in Electronic Format – Certain Human Pharmaceutical Product Applications and Related Submissions Using the eCTD Specifications; Guidance for Industry,” addressing the electronic submission of certain applications in the CTD format (Ref. 3). As of May 5, 2017, all New Drug Applications (NDAs), Abbreviated New Drug Applications (ANDAs), and Biologics License Applications (BLAs) must be submitted in eCTD, and commercial IND submissions and Master Files⁴ must be submitted in eCTD beginning May 5, 2018 (Ref. 3).⁵

시험자 주도 IND와 확대 접근 IND(예: 응급 사용 IND, 치료용 IND)처럼 상업적 유통을 목적으로 하지 않는 제품은 eCTD 요건에서 제외된다. 체외진단 의료기기처럼 PHS법 351항에 따른 의료기기 IND도 eCTD 요건에서 제외된다. 그러나 유전자치료제 전달에 쓰이는 의료기기나 복합제품(예: 지지체(scaffold))은 제외되지 않으며, 이 가이던스의 권고사항을 따라야 한다. eCTD 요건 충족에 대비하여, 의뢰자는 CMC 정보를 CTD 형식에 따라 정리하고 분류하기 시작할 것을 권장한다.

Products that are not intended to be distributed commercially, such as in investigator-sponsored and expanded access INDs (e.g., emergency use INDs and treatment INDs), are excluded from the eCTD requirement. Also excluded from the eCTD requirement are INDs for devices under section 351 of the PHS Act, such as in vitro diagnostic devices. However, devices used in gene therapy product delivery or combination products (e.g., scaffolds) are not excluded, and should follow the recommendations in this guidance. In preparation for meeting the eCTD requirements, we recommend that sponsors begin to organize and categorize their CMC information according to the CTD format.

최초 IND 제출 시 CTD의 모든 항을 다 채울 필요는 없다. IND로 제출할 CMC 정보의 양은 임상시험 단계와 제안된 임상시험의 범위에 따라 달라진다(21 CFR 312.23(a)(7)). 모든 개발 단계에서 CMC 심사의 중점은 제품 안전성과 제조 관리이다. FDA는 임상 개발이 진행되고 제품 지식과 제조 경험이 더 쌓임에 따라 의뢰자가 이전에 제출한 정보를 수정하고 보완해야 할 수 있다고 예상한다(21 CFR 312.31).

You are not required to complete all CTD sections in your original IND submission. The amount of CMC information to be submitted in your IND depends on the phase of investigation and the scope of the clinical investigation proposed (21 CFR 312.23(a)(7)). The emphasis for CMC review in all phases of development is product safety and manufacturing controls. We expect that sponsors may need to make modifications and additions to previously submitted information as clinical development proceeds and additional product knowledge and manufacturing experience is collected (21 CFR 312.31).

FDA는 CTD 모듈 3에 CMC 정보를 제출하는 데 관한 상세 권고사항을 제공한다. 또한 CTD 제출자료의 모듈 1과 모듈 2에 들어가는 행정 정보와 품질 요약 정보에 관한 일반 권고사항도 각각 제공한다.

We are providing detailed recommendations for submitting CMC information in Module 3 of the CTD. We are also providing general recommendations regarding administrative and quality summary information for Modules 1 and 2, respectively, of the CTD submissions.

행정 문서(예: Form FDA 1571 같은 신청서, 제출 공문(cover letter), 심사자 안내서(reviewer guide), 교차 참조 허가 서신), 범주적 제외(categorical exclusion) 주장, 표시기재(labeling) 정보는 CTD 제출자료의 모듈 1에 포함하여야 한다. 제출 공문에는 제출 자료와 그 내용에 대한 간단한 설명을 포함하여야 한다. 제조 변경에 관한 IND 변경(amendment)을 제출할 때에는 제출 공문에 변경 제출의 목적을 명확히 기술하고 제안된 변경사항을 강조하여야 한다.

Administrative documents (e.g., application forms, such as Form FDA 1571, cover letters, reviewer guides, and cross-reference authorization letters), claims of categorical exclusion, and labeling information should be included in Module 1 of the CTD submissions. The cover letter for your submission should include a brief explanation of your submission and its contents. When amendments are submitted to the IND for manufacturing changes, your cover letter should clearly describe the purpose of the amendment and highlight proposed changes.

변경이 많거나 중대한 변경(예: 제조공정, 핵심품질특성(CQA) 시험법, 새 제조소 또는 제조업자 등)을 담은 변경 제출에는 FDA 「eCTD Technical Conformance Guide: Technical Specifications Document」(참고문헌 4)에 기술된 「심사자 안내서(Reviewer’s Guide)」 또는 모든 변경사항을 추적 표시한 문서를 포함하고, 임상시험용 물질의 새 로트를 출하하기 전에 FDA가 검토할 수 있도록 충분한 시간(예: 30일)을 둘 것을 권장한다.

For amendments containing numerous or significant changes (e.g., manufacturing process, assays for critical quality attributes (CQAs), new manufacturing site or manufacturer, etc.), we recommend that you include a “Reviewer’s Guide,” as described in FDA’s “eCTD Technical Conformance Guide: Technical Specifications Document,” (Ref. 4) or a document with all changes tracked, and that you allow sufficient lead time (e.g., 30 days) for FDA review before release of a new lot of clinical trial material.

IND에는 임상시험의 각 시험자에게 제공될 모든 표시(label)와 표시기재(labeling)의 사본이 포함되어야 한다(21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(d)). CTD 모듈 1에 견본 또는 모형(mock-up) 표시를 포함할 것을 권장한다. IND 제품에는 「Caution: New Drug―Limited by Federal (or United States) law to investigational use」(주의: 신약 ― 연방(또는 미국) 법에 따라 임상시험용으로만 사용이 제한됨)라는 문구가 있는 표시를 붙여야 한다는 점에 유의한다(21 CFR 312.6).

Your IND must contain a copy of all labels and labeling to be provided to each investigator in the clinical study (21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(d)). We recommend that you include sample or mock-up labels in Module 1 of the CTD. Please note that IND products must bear a label with the statement, “Caution: New Drug―Limited by Federal (or United States) law to investigational use” (21 CFR 312.6).

자가 공여자에서 유래한 제품, 그리고 21 CFR 1271.90(a)에 기술되어 공여자 적격성 판정이 요구되지 않는 그 밖의 경우에는, 해당되는 대로 21 CFR 1271.90(c)에서 요구하는 표시기재를 포함하여야 한다. 예를 들어 자가 사용 목적의 세포에는 「FOR AUTOLOGOUS USE ONLY」(자가 사용 전용)(21 CFR 1271.90(c)(1))라고 표시하여야 하며, 공여자 시험과 선별을 하지 않은 경우에는 「NOT EVALUATED FOR INFECTIOUS SUBSTANCES」(감염성 물질 평가 안 됨)라고도 표시하여야 한다(21 CFR 1271.90(c)(2)).

For products derived from autologous donors and other situations described in 21 CFR 1271.90(a) for which a donor eligibility determination is not required, you must include the required labeling in 21 CFR 1271.90(c), as applicable. For example, for cells intended for autologous use, you must label the product “FOR AUTOLOGOUS USE ONLY” (21 CFR 1271.90(c)(1)) and “NOT EVALUATED FOR INFECTIOUS SUBSTANCES” if donor testing and screening is not performed (21 CFR 1271.90(c)(2)).

IND에는 환경 분석 또는 범주적 제외 주장 중 하나가 포함되어야 한다(21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(e)). 통상적인 상황에서 대부분의 IND는 21 CFR 25.31(e)에 따른 범주적 제외 대상이 된다는 점에 유의한다(참고문헌 5). 이 정보는 CTD 모듈 1에 제출할 수 있다.

Your IND must contain either an environmental analysis or a claim for categorical exclusion (21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(e)). Please note that, under ordinary circumstances, most INDs are eligible for categorical exclusion under 21 CFR 25.31(e) (Ref. 5). This information can be submitted in Module 1 of the CTD.

IND의 경우 이전에 FDA에 제출한 정보는 일반적으로 다시 제출할 필요가 없으며, 그 정보를 참조로 인용할 수 있다. 이전에 제출한 정보를 적절히 특정하는 서면 진술을 IND에 제출할 수 있으며(21 CFR 312.23(b)), 보통 IND 또는 생물의약품 마스터 파일의 제출 추적 번호(STN)를 제공하는 방식으로 한다. 참조하는 정보를 기술하고 그 정보가 이전에 제출한 파일의 어디에 있는지 특정할 것을 권장한다.

For INDs, you generally are not required to resubmit information that you have previously submitted to the Agency, and you may incorporate such information by reference. You may submit a written statement in your IND that appropriately identifies information you have previously submitted (21 CFR 312.23(b)), usually by providing a submission tracking number (STN), for the IND or biologics Master File. We recommend that you describe the information you are referencing and identify where that information is located in the previously submitted file.

적절한 허가를 받았다면 다른 사람이 이전에 제출한 정보도 참조할 수 있다. 적절한 허가는 그 정보를 제출한 사람이 발행한 참조 허가서(Letter of Authorization, LOA)로 받을 수 있다(21 CFR 312.23(b)). LOA에는 교차 참조하는 정보에 대한 설명(예: 시약, 용기, 벡터 제조공정)을 포함하고 그 정보가 있는 위치(예: 파일 이름, 참조 번호, 권, 쪽 번호)를 특정할 것을 권장한다. 이 LOA는 LOA에 명시되고 LOA 작성자가 제출한 정보에 대해서만 교차 참조를 허용한다는 점에 유의한다. LOA는 다른 사람이 제출하고 LOA 작성자가 교차 참조한 정보를 교차 참조할 권한을 주지 않는다. 다시 말해, LOA 작성자가 교차 참조한 정보는 교차 참조할 수 없다.

You may also reference information previously submitted by another individual if proper authorization has been granted. Proper authorization may be granted with a Letter of Authorization (LOA) from the individual who submitted the information (21 CFR 312.23(b)). We recommend that the LOA include a description of the information being cross-referenced (e.g., reagent, container, vector manufacturing process) and identify where that information is located (e.g., file name, reference number, volume, page number). Please note that this LOA only allows you to cross-reference the information outlined in the LOA and submitted by the author of the LOA. The LOA does not provide you permission to cross-reference information that was submitted by another individual and cross-referenced by the author of the LOA. In other words, you may not cross-reference information that is cross-referenced by the author of the LOA.

다른 사람이 제출한 모든 정보에 대해 LOA를 제출하여야 한다(21 CFR 312.23(b)).

You are required to submit a LOA for all information submitted by another individual (21 CFR 312.23(b)).

LOA를 CTD 모듈 1에 포함하는 것에 더해, 각 IND 제출 시 IND 표지(즉 Form FDA 1571)에 이 파일들을 기재하여야 한다. LOA가 없거나 부적절한 경우, 또는 교차 참조 파일의 정보가 인용 목적에 부적절한 경우, FDA는 교차 참조 파일의 정보가 IND를 뒷받침하기에 충분하지 않다고 통보할 것이다. 교차 참조한 IND가 임상 보류되거나 철회된 경우, 교차 참조한 핵심 정보를 더 이상 이용할 수 없거나 적절하지 않으면 해당 IND도 임상 보류될 수 있다.

In addition to including LOAs in Module 1 of the CTD, you should list these files in the IND cover sheet (i.e., Form FDA 1571) of each IND submission. If the LOA is absent or inadequate or the information in the cross-referenced file is inadequate for the purpose cited, we intend to notify you that the information in the cross-referenced file is not sufficient to support your IND. In the event a cross-referenced IND is placed on clinical hold or is withdrawn, your IND may also be placed on clinical hold if critical cross-referenced information is no longer available or adequate.

IND에는 개발 중인 유전자치료제에 대한 일반 소개를 포함하여야 하며, 여기에는 유효성분, 작용 방식 및 제안된 임상 용도에 대한 설명이 포함된다. 이 요약은 CTD 모듈 2의 품질 종합 요약(Quality Overall Summary, QOS)에 제공할 것을 권장한다(참고문헌 1). QOS의 정보는 CTD 모듈 3에 제공된 품질 관련 자료와 정보를 압축한 요약이다. QOS는 또한 심사자가 신청을 더 효과적으로 평가하고, 제시된 품질 정보를 이해하며, 이 정보를 환자에 대한 잠재적 위험과 연결하는 데 도움이 될 수 있다. 이 요약에는 제조공정 개요, 제품 품질을 보증하기 위해 갖춘 관리, 구성 요소와 출발물질의 적격성 평가에 관한 일반 정보를 포함하여야 한다.

Your IND should contain a general introduction to the gene therapy product under investigation, including a description of its active ingredient(s), mode of action, and proposed clinical use. We recommend that you provide this summary in the Quality Overall Summary (QOS), located in Module 2 of the CTD (Ref. 1). The information in the QOS is a condensed summary of the quality-related data and information provided in Module 3 of the CTD. It can also serve to help reviewers more effectively assess applications, understand the quality information presented, and relate this information to potential patient risks. This summary should include an overview of the manufacturing process, controls in place to ensure product quality, and general information regarding the qualification of components and starting materials.

아래 각 항에 기술된 대로 원료의약품과 완제의약품의 조성, 유전자치료제가 복합제품인지 여부, 투여 전 임상시험 실시기관에서 유전자치료제를 어떻게 취급할지를 기술하여야 한다.

You should describe the composition of the DS and DP, whether the gene therapy is a combination product, and how your gene therapy will be handled at the clinical site prior to administration, as described in the sections below.

요약에는 제출 시점에 이해되고 있는 범위에서 제품의 안전성과 생물학적 활성에 관련된 잠재적 CQA에 대한 설명도 포함하여야 한다. CQA는 원하는 제품 품질을 보증하기 위해 적절한 한도, 범위 또는 분포 내에 있어야 하는 물리적, 화학적, 생물학적 또는 미생물학적 성질이나 특성이다(참고문헌 6). FDA는 아직 제품에 관한 정보를 얻고 있는 초기 개발 단계에는 한도가 더 넓을 수 있음을 인정한다. 또한 제품 개발이 진행되면서 제품에 관한 지식이 늘어남에 따라 잠재적 CQA 목록이 수정될 수 있다.

Your summary should also include a description of potential CQAs that are relevant to the safety and biological activity of the product as they are understood at the time of submission. A CQA is a physical, chemical, biological, or microbiological property or characteristic that should be within an appropriate limit, range, or distribution to ensure the desired product quality (Ref. 6). We acknowledge that limits may be broader during early development when you are still gaining information about your product. In addition, as your product progresses through development the list of potential CQAs may be revised as your knowledge of the product increases.

FDA는 또한 제품 안전성과 품질이 충분히 이해되지 않은 제품 개발 초기 단계에는 유전자치료제의 임상 성능과 관련된 제품 특성을 이해하고 정의하기 어려울 수 있음을 인정한다. 따라서 CQA를 파악하고 이해하는 데 도움이 되도록 초기 임상 개발 중에 여러 제품 특성을 평가할 것을 권장한다. 이는 개발이 진행됨에 따라 제조공정 관리, 제조 일관성 및 안정성을 평가할 수 있는 역량을 확보하는 데에도 도움이 된다. 이는 신속 개발 프로그램을 추진하는 유전자치료제 의뢰자에게 특히 중요하다(참고문헌 7).

We further acknowledge that understanding and defining product characteristics that are relevant to the clinical performance of the gene therapy may be challenging during early stages of product development, when product safety and quality may not be sufficiently understood. Therefore, we recommend that you evaluate a number of product characteristics during early clinical development to help you identify and understand CQAs. This will also help ensure your ability to assess manufacturing process controls, manufacturing consistency, and stability as development advances. This is especially important for sponsors of gene therapy products who are pursuing expedited development programs (Ref. 7).

CQA는 후기 임상시험 또는 BLA를 위한 기준 및 시험방법을 포함하되 이에 한정되지 않는, 원료의약품과 완제의약품의 핵심 특성을 규정하는 데 사용할 수 있다. 잘 확립된 CQA는 일반적으로 분석적 방법으로 제품의 비교동등성을 입증하는 데 필요하므로, 특히 제품 개발 중에 제조 변경을 계획하는 경우에는 가능한 한 일찍 CQA를 확립하는 것이 매우 중요할 수 있다. CQA 확립에 관한 추가 정보는 FDA 업계 가이던스 「Q8(R2) Pharmaceutical Development」(참고문헌 6)와 「Q11 Development and Manufacture of Drug Substances」(참고문헌 8)를 참조한다.

CQAs may be used to specify key characteristics of the DS and DP including, but not limited to, their specifications for a later phase clinical study or BLA. It may be crucial to establish CQAs as early as possible particularly when you plan to make manufacturing changes during product development because well-established CQAs are generally necessary for demonstrating product comparability by analytical methods. For additional information regarding establishing CQAs, please see FDA’s Guidance for Industry: “Q8(R2) Pharmaceutical Development” (Ref. 6), and “Q11 Development and Manufacture of Drug Substances” (Ref. 8).

CQA를 뒷받침하는 정보와 특정 연구 또는 공개 문헌의 결과는 그 특성이 원료의약품에 해당하는지 완제의약품에 해당하는지에 따라 CTD 모듈 3의 「제조공정 개발(3.2.S.2.6)」 항 또는 「제제 개발(3.2.P.2)」 항에 포함할 수 있다(참고문헌 1 참조). 정보는 CTD 신청자료의 관련 비임상 또는 임상 항에 연결할 수도 있다.

Information to support a CQA and results from specific studies or published literature may be included in Module 3 of the CTD in the “Manufacturing Process Development (3.2.S.2.6)” section or the “Pharmaceutical Development (3.2.P.2)” section (see Ref. 1) depending on whether the attribute pertains to a DS or a DP. Information may also be linked to the relevant nonclinical or clinical sections of the application in the CTD.

IND에는 원료의약품(21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(a))과 완제의약품(21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(b))에 대한 설명이 포함되어야 하며, 여기에는 원료의약품과 완제의약품이 확인, 함량(역가), 품질 및 순도에 대한 허용 한도를 충족함을 보증하기 위한 물리적, 화학적 또는 생물학적 특성, 제조 관리 및 시험 정보가 포함된다.

Your IND must contain a description of the DS (21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(a)) and DP (21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(b)), including the physical, chemical, or biological characteristics, manufacturing controls, and testing information, to ensure the DS and DP meet acceptable limits for identity, strength (potency), quality, and purity.

벌크 원료의약품은 「원료의약품 유효성분(active pharmaceutical ingredient)」과 같은 뜻이며(21 CFR 207.3; 21 CFR 207.1도 참조), 이는 완제의약품에 혼입될 목적으로 하고, 질병의 진단, 완치, 경감, 치료 또는 예방에서 약리학적 활성이나 그 밖의 직접적 효과를 제공하거나 인체의 구조 또는 기능에 영향을 줄 목적으로 하는 모든 물질로 더 자세히 설명된다(21 CFR 207.1). 유효성분은 질병의 진단, 완치, 경감, 치료 또는 예방에서 약리학적 활성이나 그 밖의 직접적 효과를 제공하거나 사람 또는 그 밖의 동물의 신체 구조나 기능에 영향을 줄 목적으로 하는 모든 구성 요소로 정의된다.

A bulk DS means the same as “active pharmaceutical ingredient” (21 CFR 207.3; see also 21 CFR 207.1), which is further described as any substance that is intended for incorporation into a finished DP and is intended to furnish pharmacological activity or other direct effect in the diagnosis, cure, mitigation, treatment, or prevention of disease, or to affect the structure or any function of the human body (21 CFR 207.1). An active ingredient is defined as any component that is intended to furnish pharmacological activity or other direct effect in the diagnosis, cure, mitigation, treatment, or prevention of disease, or to affect the structure or any function in the human body of man or other animals.

이 용어에는 완제의약품 제조 중에 화학적 변화를 겪어 특정 활성이나 효과를 제공하도록 의도된 변형된 형태로 완제의약품에 존재할 수 있는 구성 요소도 포함된다(21 CFR 210.3(b)(7)). 이러한 제품의 경우, 생체외에서 세포를 형질도입하는 데 쓰이고 질병 치료를 위한 약리학적 활성을 제공하는 벡터⁶는 핵심 구성 요소가 된다. 벡터가 없으면 결과물인 세포 제품은 같은 약리학적 활성을 갖지 못할 것이다.

The term includes those components that may undergo chemical change in the manufacture of the DP and be present in the DP in a modified form intended to furnish the specified activity or effect (21 CFR 210.3(b)(7)). For these products, it follows that a vector⁶ used to transduce cells ex vivo and which furnishes a pharmacological activity for the treatment of disease is a critical component. Without the vector, the resulting cell product would not have the same pharmacological activity.

마찬가지로, 유전물질 투여를 위한 최종 제형 상태의 벡터는 일반적으로 완제의약품으로 본다. 완제의약품은 「유효성분을 함유하고, 반드시 그런 것은 아니지만 일반적으로 비활성 성분과 함께 있는 최종 제형(예: 정제, 캡슐, 액제 등). 이 용어에는 유효성분을 함유하지 않지만 위약으로 사용하도록 의도된 최종 제형도 포함된다」로 정의된다(21 CFR 210.3(b)(4)). 또한 유전물질 투여에 사용되는 최종 제형 상태의 벡터는 제조공정과 최종 제형의 조제에 따라 유효성분이 될 수도 있다.

Similarly, a vector in its final formulation for administration of the genetic material is generally considered a DP. A DP is defined as “a finished dosage form, for example, tablet, capsule, solution, etc., that contains an active drug ingredient generally, but not necessarily, in association with inactive ingredients. The term also includes a finished dosage form that does not contain an active ingredient but is intended to be used as a placebo” (21 CFR 210.3(b)(4)). Additionally, a vector in its final formulation used for administration of the genetic material may also be an active ingredient, depending upon the manufacturing process and formulation of the finished dosage form.

FDA는 일부 유전자치료제의 경우 제조공정이 복잡하여 원료의약품과 완제의약품을 구분하기 어려울 수 있음을 인지하고 있다. 어떤 유전자치료제는 구분되는 원료의약품이 없을 수 있다. 또 어떤 제품은 결합하여 완제의약품을 만드는 둘 이상의 서로 다른 원료의약품으로 구성될 수 있다. 이 가이던스는 의뢰자가 원료의약품과 완제의약품을 어떻게 구분하여야 하는지를 권고하지 않는다. 다만 CTD 제출자료 모듈 2의 요약 정보에 해당 제품의 원료의약품/완제의약품 정의를 뒷받침하는 설명을 제공하고, CTD 모듈 3에 제시된 대로 각 원료의약품과 완제의약품에 대해 요구되는 정보를 제출할 것을 권장한다(참고문헌 1). 생체외 세포 변형에 쓰이는 벡터에 대해서는 별도의 원료의약품 항을 제공하여야 한다.

We recognize that distinguishing a DS from a DP may be difficult for some gene therapy products due to the complex nature of the manufacturing processes. Some gene therapy products may not have a distinct DS. Others may consist of two or more different DSs that are combined to make the DP. This guidance does not recommend how sponsors should distinguish the DS and DP. However, we do recommend that you provide an explanation to support the definition of DS/DP for your product in the summary information in Module 2 of CTD submissions and that you submit the required information for each DS and DP, as outlined in Module 3 of the CTD (Ref. 1). A separate DS section should be provided for vectors used for ex vivo modification of cells.

제조공정에 둘 이상의 원료의약품이 포함되는 경우, 최종 제품의 유효성분마다 별도의 원료의약품 항을 제공할 것을 권장한다. CTD 원료의약품 항은 FDA 업계 가이던스 「M4Q: The CTD – Quality」(참고문헌 1)의 모듈 3에 권고된 형식과 번호 체계를 따라야 하며, 각 항은 제목에 원료의약품 이름과 제조업자를 넣어 서로 구분하여야 한다(예: General Information, 3.2.S.1 [원료의약품 이름, 제조업자]).

When the manufacturing process includes more than one DS, we recommend that you provide separate DS sections for each active ingredient of the final product. The CTD DS sections should follow the format and numbering scheme recommended in Module 3 of FDA’s Guidance for Industry: “M4Q: The CTD – Quality” (Ref. 1), and the sections should be distinguished from one another by including the DS name and manufacturer in the heading (e.g., General Information, 3.2.S.1 [DS name, manufacturer]).

원료의약품과 완제의약품에 대해 확보된 안정성 자료, 권장 보관 조건, 그리고 해당되는 경우 유효기간의 요약도 각 원료의약품 및 완제의약품 항에 포함하여야 한다. 안정성 시험 계획서와 안정성 자료에 관한 정보는 CTD 모듈 3의 해당 항에 포함하여야 한다(참고문헌 1).

A summary of the available stability data for the DS and the DP, recommended storage conditions, and shelf life, if applicable, should also be included in each DS and DP section. Information on stability protocols and stability data should be included in the appropriate sections of Module 3 of the CTD (Ref. 1).

유전자치료제가 21 CFR 3.2(e)에 정의된 복합제품의 구성 요소인 제출자료의 경우, 요약에 복합제품을 간략히 기술하고 각 구성 요소의 규제상 지위를 간략히 밝힐 것을 권장한다. 복합제품의 서로 다른 구성 요소를 명확히 구분하기 위해, FDA 「eCTD Technical Conformance Guide: Technical Specifications Document」(참고문헌 4)에 기술된 대로 유전자치료제와 의약품 또는 의료기기의 제조 및 공학 정보를 CTD 제출자료의 별도 항목에 포함하여야 한다.

For submissions in which the gene therapy is a component of a combination product, as defined in 21 CFR 3.2(e), we recommend that you briefly describe the combination product in the summary and briefly state the regulatory status of each component. To clearly delineate the different components of a combination product, you should include manufacturing and engineering information for the gene therapy and drug or device in separate entries of the CTD submission, as described in the FDA “eCTD Technical Conformance Guide: Technical Specifications Document” (Ref. 4).

완제의약품을 적절히 관리하는 것은 임상시험에 매우 중요하다. 따라서 IND에는 안전성, 제품 품질 및 안정성을 보증하기 위해 제품을 임상시험 실시기관으로 어떻게 운송하고, 실시기관에서 어떻게 인수하고 취급하는지에 대한 설명을 포함하여야 한다. IND에는 또한 CTD 요약 정보에 운송 조건, 보관 조건, 사용기한/시각(해당되는 경우), 그리고 제조업자에서 투여 장소까지의 관리 연속성(chain of custody)에 관한 정보를 포함하여야 한다. 모듈 2의 요약에는 투여 전 임상시험 실시기관에서의 제품 취급 정보(해동, 희석제 또는 면역증강제 첨가, 전달 기구에 충전, 병상까지의 운반 등)와 투여 전과 투여 중의 제품 안정성에 관한 요약 정보(예: 기구 내 보관 시간과 온도)도 포함하여야 한다.

Proper control of the finished DP is critical to your investigational studies. Therefore, your IND should include a description of how the product will be shipped to, received, and handled at the clinical site to ensure safety, product quality, and stability. Your IND should also include information on shipping conditions, storage conditions, expiration date/time (if applicable), and chain of custody from the manufacturer to the site of administration in the summary information of the CTD. Your summary in Module 2 should also include information for product handling at the clinical site prior to administration (such as thawing, the addition of diluent or adjuvant, loading into a delivery device, and transport to the bedside) and summary information on product stability prior to and during administration (e.g., in-device hold times and temperatures).

전달을 위해 조제한 후의 제품 안정성과 전달 기구 적합성 자료의 세부사항은 CTD 모듈 3(각각 3.2.P.8항과 3.2.P.2.6항)에 포함하여야 한다(참고문헌 1). 임상시험 실시기관에서의 의약품 취급과 투여 준비 지침(예: 약국 매뉴얼(Pharmacy Manual), 사용 설명서(Instructions for Use), 임상시험자 자료집(Investigator’s Brochure))은 IND의 해당 항(CTD 모듈 5)에 제공하고 모듈 2의 QOS에 하이퍼링크로 연결하여야 한다. 전달 기구에 관한 상세 정보는 CTD의 「지역 정보(3.2.R)」 항에 포함할 수 있다(참고문헌 1).

Details regarding product stability after preparation for delivery and delivery device compatibility data should be included in Module 3 (sections 3.2.P.8 and 3.2.P.2.6, respectively) of the CTD (Ref. 1). Instructions for drug handing and preparation for administration at the clinical site (e.g., Pharmacy Manual, Instructions for Use, Investigator’s Brochure) should be provided in the appropriate section of your IND (Module 5 of the CTD) and hyperlinked to the QOS in Module 2. Detailed information about the delivery device may be included in the “Regional Information (3.2.R)” section of the CTD (Ref. 1).

아래 제목과 본문에는 참고를 위해 괄호 안에 CTD 항 번호를 적었다(참고문헌 1).

The headings and text below include CTD section numbers in parentheses for reference (Ref. 1).

원료의약품의 이름을 제공하여야 한다. 임상 개발 중에 원료의약품의 이름이 바뀌었다면 모든 개발 단계에서 원료의약품을 식별하는 데 쓰인 이름을 제공하여야 한다. 미국 일반명(USAN) 위원회가 일반명을 부여하였다면 여기에 제공할 수 있다.

You should provide the name of the DS(s). If the name of the DS has changed during clinical development, you should provide the names used to identify the DS at all stages of development. If the United States Adopted Name (USAN) Council has given it a nonproprietary name, you may provide it here.

원료의약품의 분자 구조(해당되는 경우 유전자 서열 포함) 및/또는 세포 구성 요소에 관한 정보를 제출하여야 한다. 유전자 서열은 관련 조절 요소(예: 프로모터/인핸서, 인트론, poly(A) 신호), 제한효소(RE) 부위, 기능성 구성 요소(예: 전이유전자, 선별 표지)의 지도를 포함한 모식도로 나타낼 수 있다. 서열 분석 정보와 주석을 단 서열 자료도 IND에 제출하여야 한다는 점에 유의한다. 벡터의 유전적 안정성을 뒷받침하기 위해 수집한 서열 자료를 포함한 서열 자료는 CTD의 「지역 정보(3.2.R)」 항에 제출할 것을 권장한다. 서열 분석에 관한 권고사항은 이 가이던스 V.A.2.c.iii항 「원자재 관리(3.2.S.2.3)」에 기술되어 있다.

You should submit information on the molecular structure (including genetic sequence, if applicable) and/or cellular components of the DS. The genetic sequence can be represented in a schematic diagram that includes a map of relevant regulatory elements (e.g., promoter/enhancer, introns, poly(A) signal), restriction enzyme (RE) sites, and functional components (e.g., transgene, selection markers). Please note that you should also submit information on your sequence analysis and the annotated sequence data in your IND. We recommend that your sequence data, including any sequence data collected to support the genetic stability of your vector, be submitted in the “Regional Information (3.2.R)” section of the CTD. Recommendations for sequence analysis are described in section V.A.2.c.iii., “Control of Materials (3.2.S.2.3)” of this guidance.

서로 다른 유전자치료제의 구조와 구조 요소에 관한 몇 가지 구체적인 예는 아래와 같다.

Some specific examples of structure and structural elements of different gene therapy products are outlined below:

IND에 생물학적 활성과 제안된 작용 기전을 포함하여 원료의약품의 조성과 특성을 기술하는 항을 두어야 한다.

You should provide a section in the IND that describes the composition and properties of the DS, including the biological activity and proposed mechanisms of action.

원료의약품의 제조, 시험 및 보관에 관여하는 각 제조업자(위탁 제조업자 포함)의 이름과 주소를 제공하여야 한다(21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(a)). 각 제조업자의 책임을 밝혀야 한다. 공정을 의뢰자가 직접 수행하든 위탁 제조 기관(CMO)이 수행하든 IND에는 원료의약품 제조업자에 관한 완전한 정보가 포함되어야 한다. IND 의뢰자는 임상시험 시험대상자의 안전에 대해 최종 책임을 지므로(21 CFR 312.3), 의뢰자와 CMO가 제품 품질 보증에 관한 각자의 책임을 이해하고 문서화할 것을 권장한다. 품질 협약서에 관한 추가 정보는 「Contract Manufacturing Arrangements for Drugs: Quality Agreements; Guidance for Industry」(참고문헌 10)에서 찾을 수 있다.

You must provide the name and address of each manufacturer, including contract manufacturer(s), involved in the manufacture, testing, and storage of the DS (21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(a)). You should indicate the responsibility of each manufacturer. Your IND should contain complete information on the DS manufacturer, regardless of whether the process is performed by you or by a contract manufacturing organization (CMO). As the sponsor of the IND, you are ultimately responsible for the safety of subjects in the clinical investigation (21 CFR 312.3); therefore, we recommend that you and the CMO understand and document your respective responsibilities for ensuring product quality. Additional information on quality agreements can be found in “Contract Manufacturing Arrangements for Drugs: Quality Agreements; Guidance for Industry” (Ref. 10).

원료의약품 제조공정 및 공정 관리에 대한 설명에는 해당되는 대로 세포 배양, 형질도입, 세포 증식, 회수, 정제, 충전, 보관 및 운송 조건을 포함하여야 한다. 설명은 또한 공정과 공정 관리를 정확히 나타내야 한다(참고문헌 16). FDA는 개발 초기에는 공정 관리에 관한 정보가 제한적일 수 있음을 인정하며, 의뢰자가 제품 개발이 진행됨에 따라 추가 정보와 갱신 내용을 제공할 것을 권장한다. 이 가이던스 II항에 기술한 대로, 원료의약품 제조공정과 공정 관리 정보의 변경 및 갱신은 임상시험에 임상시험용으로 적용하기 전에 IND 변경으로 제출하여야 한다(21 CFR 312.31(a)(1)).

Your description of the DS manufacturing process and process controls should include the following, as applicable: cell culture; transduction; cell expansion; harvest(s); purification; filling; and storage and shipping conditions. Your description should also accurately represent your process and process controls (Ref 16). We acknowledge that information on process controls may be limited early in development and recommend that sponsors provide additional information and updates as product development proceeds. Changes and updates to the DS manufacturing process and process controls information should be submitted as an amendment to the IND (21 CFR 312.31(a)(1)) prior to implementation for investigational use in clinical studies, as indicated in section II. of this guidance.

각 제조 회차(즉 배치, 로트, 기타)를 어떻게 정의하는지에 대한 설명을 배치(또는 로트⁷) 번호 체계에 대한 설명과 함께 제출하여야 한다. 제조 중에 회수액이나 중간체를 합치는(pooling) 일이 있는지 명확히 밝혀야 한다. 생산 중 합치기가 필요하다면, 각 풀(pool)의 보관 조건(예: 시간, 온도, 용기마개 시스템)을 관리하고 각 풀의 품질을 보증하기 위해 합치기 전에 수행하는 시험을 기술할 것을 권장한다.

A description of how you define each manufacturing run (i.e., batch, lot, other) should be submitted with an explanation of the batch (or lot⁷) numbering system. You should clearly state whether any pooling of harvests or intermediates occurs during manufacturing. If pooling is necessary during production, we recommend that you control the storage conditions (e.g., time, temperature, container closure system) for each pool and that you describe the testing performed prior to pooling to ensure the quality of each pool.

심사를 쉽게 하고 제조공정을 더 잘 이해할 수 있도록, 배치 규모를 어떻게 정의하는지(예: 바이오리액터 부피, 세포 처리 용량)와 원료의약품을 어떻게 정량하는지(예: 벡터 유전체, 형질도입 단위, 감염성 입자, 질량, 유전자 변형 세포 수)에 대한 설명도 제공할 것을 권장한다. 알고 있다면 배치당 예상 수율을 포함한다.

We also recommend that you provide an explanation for how the batch scale is defined (e.g., bioreactor volume, cell processing capacity) and how the DS is quantified (e.g., vector genomes, transducing units, infectious particles, mass, number of gene modified cells) to facilitate review and allow a better understanding of the manufacturing process. When known, please include the yield expected per batch.

제조공정에 대한 설명에는 공정 흐름도와 상세한 서술을 포함하여야 한다. 설명에는 공정 관리와 공정 중 시험(예: 역가(titer), 바이오버든, 생존율, 불순물), 그리고 허용 운전 변수(예: 공정 시간, 온도 범위, 세포 계대 수, pH, CO2, 용존 O2, 포도당 농도)를 명확히 밝혀야 한다. FDA는 이 정보가 제품 개발 과정에서 수집될 수 있으며 단계에 맞게 제출될 수 있음을 인정한다.

The description of your manufacturing process should include a process flow diagram(s) and a detailed narrative. Your description should clearly identify any process controls and in-process testing (e.g., titer, bioburden, viability, impurities) as well as acceptable operating parameters (e.g., process times, temperature ranges, cell passage number, pH, CO2, dissolved O2, glucose level). We acknowledge that this information may be gathered over the course of product development and may be submitted in a stage-appropriate manner.

공정 일관성을 위해 공정 성능 변수를 모니터링할 것을 권장한다. 공정 경향 분석과 공정 변수 및 원자재 평가는 공정 관리 전략을 정하고 확립하는 데 도움이 된다. 제조공정 전반에서 교차오염을 방지하기 위해 갖춘 세척 및 제품 전환(change over) 관리, 그리고 추적 및 분리 절차를 명확히 기술하여야 한다(이 가이던스 V.C.1항 「부록 – 시설 및 설비(3.2.A.1)」도 참조).

We recommend that you monitor process performance parameters for process consistency. Process trend analysis and evaluation of process parameters and materials will help to determine and establish process control strategies. You should clearly describe any controls for cleaning and change over as well as tracking and segregation procedures that are in place to prevent cross-contamination throughout the manufacturing process (see also section V.C.1., “Appendices – Facilities and Equipment (3.2.A.1),” of this guidance).

모든 세포 배양 조건에 대한 설명은 해당되는 공정 단계, 공정 시기, 배양 조건, 보관 시간과 이송 단계, 사용 원자재(예: 배지 성분, 백/플라스크)를 이해할 수 있도록 충분히 상세하여야 한다. 세포 배양 시스템이 개방형인지 밀폐형인지와 무균 공정 단계를 기술하여야 한다. 장기간 배양이 필요하다면 세포 품질을 모니터링하기 위해 갖춘 공정 중 관리(예: 생존율, 바이오버든, pH, 용존 O2)를 개략적으로 기술하여야 한다. 배지 성분과 세포은행 적격성 평가에 관한 기대 사항은 이 가이던스 V.A.2.c항 「원자재 관리(3.2.S.2.3)」에 기술되어 있다.

The description of all cell culture conditions should contain sufficient detail to make understandable any of the process steps that apply, process timing, culture conditions, hold times and transfer steps, and materials used (e.g., media components, bags/flasks). You should describe whether the cell culture system is open or closed and any aseptic processing steps. If extensive culture times are needed, you should outline the in-process controls you have in place to monitor cell quality (e.g., viability, bioburden, pH, dissolved O2). Expectations for media components and cell bank qualification are outlined in section V.A.2.c., “Control of Materials (3.2.S.2.3),” of this guidance.

유전자치료 벡터(예: 바이러스, 세균, 플라스미드)의 제조에 대해서는 모든 생산 및 정제 절차를 기술하여야 한다. 생산 절차에는 세포 배양 및 증식 단계, 형질주입 또는 감염 절차, 회수 단계, 보관 시간, 벡터 정제(예: 밀도 구배 원심분리, 컬럼 정제), 농축 또는 완충액 교환 단계, 그리고 이 공정에서 쓰이는 시약/구성 요소를 포함하여야 한다. 해당되는 대로 벡터 품질을 보증하기 위한 공정 중 시험(예: 역가, 불순물)을 개략적으로 기술하여야 한다.

For the manufacture of gene therapy vectors (e.g., virus, bacteria, plasmids), you should provide a description of all production and purification procedures. Production procedures should include the cell culture and expansion steps, transfection or infection procedures, harvest steps, hold times, vector purification (e.g., density gradient centrifugation, column purification), concentration or buffer exchange steps, and the reagents/components used during these processes. You should outline any in-process testing to ensure vector quality as appropriate (e.g., titer, impurities).

벡터 원료의약품이 유전물질 투여를 위한 완제의약품으로 조제될 것인지(이 가이던스 V.B.3.b항 「배치 조성(3.2.P.3.2)」), 아니면 세포의 생체외 유전자 변형을 위한 벌크 원료의약품으로 조제될 것인지(이 가이던스 IV.B항 「원료의약품과 완제의약품」에 제시된 대로)를 기술하여야 한다. 원료의약품 유효성분으로서 각 원료의약품에는 적절한 수준의 관리를 적용하여야 하며, 각 원료의약품은 개발 단계에 맞는 CGMP(현행 우수 의약품 제조 및 품질관리 기준) 조건에서 제조하여야 한다(참고문헌 11). 품질 조직(Quality Unit)에 관한 정보는 이 가이던스 V.C.1항 「부록 – 시설 및 설비(3.2.A.1)」에 기술되어 있다.

You should describe whether the vector DS will be formulated into the DP for administration of the genetic material (section V.B.3.b., “Batch Formula (3.2.P.3.2),” of this guidance) or whether it will be formulated as a bulk DS for ex vivo genetic modification of cells (as outlined in section IV.B., “Drug Substance and Drug Product,” of this guidance). As an active pharmaceutical ingredient, an appropriate level of control should be applied to each DS, and each DS should be manufactured under current good manufacturing practice (CGMP) conditions that are appropriate for the stage of development (Ref. 11). Information on Quality Unit is outlined in section V.C.1., “Appendices – Facilities and Equipment (3.2.A.1),” of this guidance.

유전자치료제가 유전자 변형 세포로 구성된다면, 세포 처리 설명은 해당되는 다음 공정 단계를 이해할 수 있도록 충분히 상세하여야 한다: 원천 물질(예: 자가 또는 동종 세포, 해당되는 경우 공여자 적격성), 세포 원천 물질의 채취(예: 백혈구성분채집술, 생검), 채취 장소에서의 보관, 제조 시설로의 운송과 제조 시설에서의 취급, 세포 선별·분리 또는 농축 단계(방법, 기구, 시약 포함), 세포 증식 조건, 보관 시간과 이송 단계, 세포 회수와 정제(있는 경우), 그리고 사용 원자재.

If your gene therapy product consists of genetically modified cells, your cell processing description should contain sufficient detail to make understandable any of the following process steps that apply: source material (e.g., autologous or allogeneic cells; donor eligibility when applicable); collection of cellular source material (e.g., leukapheresis, biopsy); storage at the collection site; shipping to and handling at the manufacturing facility; cell selection, isolation, or enrichment steps (including methods, devices, reagents); cell expansion conditions; hold times and transfer steps; cell harvest and purification, if any, and materials used.

또한 유전자 변형에 쓰이는 모든 절차(벡터 또는 유전체 편집 구성 요소의 형질주입, 감염 또는 전기천공 등)와 변형 후의 추가 배양, 세포 선별 또는 처리를 완전하게 기술하여야 한다. 사용하는 벡터는 위에 제시한 대로 상세히 기술하여야 한다.

You should also provide a complete description of all procedures used for gene modification (such as transfection, infection or electroporation of vectors, or genome editing components) and any additional culture, cell selection, or treatments after modification. The vector used should be described in detail as indicated above.

제품이 방사선 조사 세포를 함유하거나 방사선 조사 세포와 함께 처리된다면, 조사기 선원에 관한 정보와 조사기 선원의 교정 문서를 제공하고, 조사된 세포가 원하는 특성은 유지하면서 증식 불능 상태가 되었음을 입증하는 뒷받침 자료를 제공하여야 한다.

If your product contains or is processed with irradiated cells, you should provide information on the irradiator source, documentation for the calibration of the irradiator source and provide supporting data to demonstrate that the irradiated cells are rendered replication-incompetent, while still maintaining their desired characteristics.

해당되는 경우, 원료의약품의 조제, 충전, 보관 및 운송에 대해 상세히 기술하고 관련 공정 관리를 밝혀야 한다. 원료의약품의 보관과 운송에 쓰이는 용기마개 시스템도 기술하여야 한다. 용기마개 시스템에 관한 정보는 이 가이던스 V.A.6항 「용기마개 시스템(3.2.S.6)」에 기술되어 있다. 적절한 보관과 수송(필요에 따라)을 보증하기 위해 갖춘 절차를 기술할 것을 권장한다.

You should provide a detailed description and identify any associated process controls for formulation, filling, storage, and shipping of the DS, if applicable. You should also describe the container closure system used for storage and shipping of the DS. Information on container closure systems is outlined in section V.A.6., “Container Closure System (3.2.S.6),” of this guidance. We recommend that you describe procedures that are in place to ensure appropriate storage and transport (as needed).

제조에 쓰이는 모든 원자재의 목록과 그 원자재의 품질 또는 등급에 대한 설명을 제공하여야 한다(21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(b)). 표 형식으로 제공할 수 있는 이 정보에는 원자재의 정체, 공급업체, 품질(예: 임상 등급, FDA 허가 제품), 원자재의 기원(예: 동물, 사람, 곤충), 그리고 제조공정에서 각 원자재가 쓰이는 단계(예: 배양 배지, 벡터 정제)가 포함된다. 여기에는 아래에 더 자세히 기술한 세포, 세포 및 바이러스 은행 시스템, 시약 같은 구성 요소에 관한 정보가 포함되며, 배양 백, 배양 플라스크, 크로마토그래피 매트릭스, 튜브처럼 제품과 접촉하는 원자재와 설비도 포함된다.

You must provide a list of all materials used in manufacturing and a description of the quality or grade of these materials (21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(b)). This information which may be provided in tabular format, includes the identity of the material, the supplier, the quality (e.g., clinical-grade, FDA-licensed), the source of material (e.g., animal, human, insect), and the stage at which each material is used in the manufacturing process (e.g., culture media, vector purification). This includes information on components, such as cells, cell and viral banking systems, and reagents, as described in more detail below; it also includes raw materials and equipment that come into contact with the product, such as culture bags, culture flasks, chromatography matrices, and tubing.

적격성 평가 프로그램을 확립하고, 제조에 쓰이는 원자재가 의도된 용도에 맞는 기준을 충족한다는 문서(예: 시험 결과, 시험성적서(COA), 첨부문서)를 제공하여야 한다. 원자재 COA는 견본 또는 대표 COA로 제출할 수 있으며, CTD의 「부록 - 외래성 인자 안전성 평가(3.2.A.2)」 항에 제공하고 IND의 관련 항에 하이퍼링크로 연결할 수 있다. FDA가 허가, 승인 또는 인증(cleared)한 원자재나 그 밖의 임상 등급 원자재를 구할 수 있다면 그것을 사용할 것을 권장한다. 원자재가 FDA 허가, 승인 또는 인증을 받지 않은 경우(또는 인정된 기준이 없는 경우)에는 그 원자재의 안전성과 품질을 평가하기 위해 제조 및/또는 시험에 관한 추가 정보가 필요할 수 있다.

You should establish a qualification program and provide documentation that the materials used for manufacturing meet standards appropriate for their intended use (e.g., test results, certificates of analysis (COAs), package inserts). COAs for materials may consist of sample or representative COAs and can be provided in the “Appendices - Adventitious Agents Safety Evaluation (3.2.A.2)” section of the CTD and hyperlinked to relevant sections of your IND. We recommend that you use FDA-licensed, approved, or cleared materials, or other clinical-grade materials, when they are available. If the material is not FDA-licensed, approved, or cleared (or in the absence of recognized standards), additional information on the manufacturing and/or testing may be needed to evaluate the safety and quality of the material.

아래에 제시한 대로, 권장되는 시험의 범위는 특정 원자재와 그 원자재가 제조공정에서 쓰이는 방식에 따라 달라진다.

As outlined below, the extent of recommended testing will depend on the specific material and the manner in which it is used in the manufacturing process.

이 가이던스에서 시약(또는 보조 원료(ancillary materials))은 제조(예: 세포 증식, 분화, 선별, 정제 또는 그 밖의 핵심 제조 단계)에 쓰이지만 최종 제품의 일부가 될 목적이 아닌 원자재를 말한다. 예로는 소태아혈청, 소화 효소(예: 트립신, 콜라게나제, DNase/RNase, 제한 엔도뉴클레아제), 성장인자, 사이토카인, 단클론항체, 항체 코팅 비드, 항생제, 배지, 배지 성분, 계면활성제가 있다. 이러한 시약은 특히 외래성 인자나 그 밖의 불순물을 유입시킴으로써 최종 제품의 안전성, 역가 및 순도에 영향을 줄 수 있다.

For purpose of this guidance, reagents (or ancillary materials) are those materials used for manufacturing (e.g., cell growth, differentiation, selection, purification, or other critical manufacturing steps) that are not intended to be part of the final product. Examples include fetal bovine serum, digestive enzymes (e.g., trypsin, collagenase, DNase/RNase, restriction endonucleases), growth factors, cytokines, monoclonal antibodies, antibody-coated beads, antibiotics, media, media components, and detergents. These reagents can affect the safety, potency, and purity of the final product, especially by introducing adventitious agents or other impurities.

사람, 소, 돼지 유래 원자재를 포함한 생물 유래 시약에 대해서는 FDA 업계 가이던스 「Characterization and Qualification of Cell Substrates and Other Biological Materials Used in the Production of Viral Vaccines for Infectious Disease Indications」(참고문헌 12)도 참조할 것을 권장한다. 동물 유래 원자재는 외래성 인자 유입 위험을 높인다. 혈청 같은 일부 동물 유래 원자재는 표준화하기 어려운 복잡한 혼합물이며, 배치 간 편차가 커서 제조공정의 재현성이나 최종 제품의 품질에 영향을 줄 수 있다. 가능하다면 비동물 유래 시약(예: 무혈청 조직 배양 배지, 재조합 단백질분해효소)의 사용을 고려할 것을 권장한다.

For biologically sourced reagents, including human, bovine, and porcine-derived materials, we recommend that you also refer to FDA’s Guidance for Industry: “Characterization and Qualification of Cell Substrates and Other Biological Materials Used in the Production of Viral Vaccines for Infectious Disease Indications” (Ref. 12). Animal-derived materials increase the risk of introducing adventitious agents. Certain animal-derived materials, such as sera, are complex mixtures that are difficult to standardize, and such materials may have significant batch-to-batch variations that may affect the reproducibility of your manufacturing process or the quality of your final product. We recommend that you consider using non-animal-derived reagents if possible (e.g., serum-free tissue culture media and recombinant proteases).

제조에 쓰이는 소 유래 원자재에 관한 정보를 제공할 것을 권장하며, 여기에는 원자재의 기원, 소 떼가 태어나고 사육되고 도축된 장소에 관한 정보, 그리고 전염성 해면상 뇌증(TSE) 위험과 관련된 그 밖의 정보가 포함된다. 혈청을 사용한다면 외래성 인자 위험을 줄이기 위해 γ선 조사한 혈청을 사용할 것을 권장한다. 이 정보는 공급업체가 제공하는 COA와 원산지 증명서(COO)에 포함될 수 있다.

We recommend that you provide information on any bovine material used in manufacturing, including the source of the material; information on the location where the herd was born, raised, and slaughtered; and any other information relevant to the risk of transmissible spongiform encephalopathy (TSE). If serum is used, we recommend that it be γ-irradiated to reduce the risk of adventitious agents. This information may be included on the COA and Certificate of Origin (COO) provided from the supplier.

제품 제조에 쓰이는 시약을 생산하는 데 사용된 소 유래 원자재도 밝혀야 하며, 그 소 유래 원자재의 기원과 적격성 평가를 문서화하여야 한다.

Bovine materials used in production of reagents, which are, in turn, used in manufacturing a product, should also be identified, and the source and qualification of bovine material should be documented.

9 CFR 113.53에 따라, 제조와 세포 및 바이러스 은행 구축에 쓰인 모든 소 유래 원자재 로트에 대해 견본 COA와 COO를 제공하여야 한다(CTD 3.2.A.2항).

You should provide sample COAs and COOs (in section 3.2.A.2 of the CTD) for all bovine material lots used in the manufacture and establishment of cell and virus banks consistent with 9 CFR 113.53.

9 CFR 113.53에 따라, 제조와 세포 및 바이러스 은행 구축에 쓰인 모든 돼지 유래 원자재 로트에 대해 견본 COA를 제공하여야 한다(CTD 3.2.A.2항). 또한 돼지 유래 시약은 해당되는 대로 돼지 써코바이러스(porcine circovirus) 1형 및 2형, 돼지 파보바이러스(porcine parvovirus) 및 그 밖의 인수공통 바이러스에 대해 시험할 것을 권장한다.

You should provide sample COAs (in section 3.2.A.2 of the CTD) for all porcine material lots used in manufacture and establishment of cell and virus banks consistent with 9 CFR 113.53. In addition, we recommend porcine reagents be tested for porcine circovirus 1 and 2, porcine parvovirus and other zoonotic viruses, as appropriate.

제조에 쓰이고 제품과 접촉하는 단클론항체는 FDA 「Points to Consider in the Manufacture and Testing of Monoclonal Antibody Products for Human Use」(참고문헌 13)에 기술된 권고사항에 따라 시험하여야 한다. 또는 이 가이던스 III.D항에 기술한 대로, 다른 규제 제출자료(IND 또는 MF)에 있는 이 정보를 교차 참조하기 위한 LOA를 제공할 것을 권장한다. 유전자치료제 제조에 쓰이는 많은 단클론항체와 재조합 단백질(사이토카인 등)이 생쥐 하이브리도마에서 생산된 항체를 이용한 친화 크로마토그래피로 정제될 수 있다는 점도 고려하여야 한다. 이는 설치류 유래 외래성 인자에 의한 오염 위험을 일으킬 수 있으며, 이 위험은 공급업체가 관리하여야 한다.

Monoclonal antibodies used in manufacturing that have product contact should be tested as per the recommendations described in FDA’s “Points to Consider in the Manufacture and Testing of Monoclonal Antibody Products for Human Use” (Ref. 13). Alternatively, as described in section III.D. of this guidance, we recommend you provide a LOA to cross-reference this information in a different regulatory submission (IND or MF). You should also consider that many monoclonal antibodies and recombinant proteins (such as cytokines) used during the manufacture of gene therapy products may be purified by affinity chromatography using antibodies generated from mouse hybridomas. This may introduce the risk of contamination with adventitious agents from rodents, which should be controlled for by the supplier.

사람 알부민을 사용한다면 FDA 허가 제품을 사용하고, 제품의 제조 또는 조제 중에 회수된 로트가 쓰이지 않았음을 보증하는 절차를 갖추어야 한다.

If human albumin is used, you should use FDA-licensed products and have procedures in place to ensure that no recalled lots were used during manufacture or preparation of the product.

사람 AB 혈청을 사용한다면(예: 생체외 유전자 변형 세포에), 그 혈청이 FDA 허가 시설에서 채취한 혈액 또는 혈장으로 처리된 것임을 보증하여야 한다. 사람 AB 혈청을 만드는 데 흔히 쓰이는 원료혈장(Source Plasma)은 21 CFR Part 640, Subpart G에 기술된 대로 채취하여야 한다. 원료혈장은 수혈용 혈액 제제만큼 광범위하게 시험되지 않으므로, 제조에 쓰는 AB 혈청이 감염병을 전파할 가능성이 없음을 보증할 것을 권장한다. 예를 들어 혈청이 다수 공여자의 혈장을 합친 것일 수 있는 원료혈장에서 유래했다면, 관련 수혈 전파 감염에 대한 추가 시험을 수행하여 감염병 위험을 줄일 수 있다. 또는 원료혈장에서 AB 혈청을 생산할 때 바이러스 불활화 또는 제거 단계를 포함하는 것도 허용될 수 있다.

If human AB serum is used (e.g., for ex vivo genetically modified cells), you should ensure the serum is processed from blood or plasma collected at FDA licensed facilities. Source Plasma, which is often used to make human AB serum, must be collected as described in 21 CFR Part 640, Subpart G. Source Plasma is not tested as extensively as blood products intended for infusion, and we recommend that you ensure the AB serum used in your manufacturing does not have the potential to transmit infectious disease. For example, if your serum is derived from Source Plasma, which may be pooled from a large number of donors, you may reduce the risk of infectious disease by conducting additional testing for relevant transfusion-transmitted infections. Alternatively, it may be acceptable to include viral inactivation or clearance steps in the production of AB serum from Source Plasma.

그 밖의 모든 사람 유래 시약에 대해서는 그 시약이 허가 제품(예: HSA, IL-2)인지 임상 등급 또는 연구 등급인지를 밝히고, COA 또는 공여자나 시약의 시험에 관한 정보를 제공하여야 한다.

For all other reagents that are human-derived, you should identify whether the reagent is a licensed product (e.g., HSA, IL-2) or is clinical or research grade and provide a COA or information regarding testing of the donor or reagent.

자가 또는 동종 세포나 조직에 대해서는 세포 원천, 채취 절차, 그리고 제조에 사용하기 전에 수행하는 관련 취급, 배양, 처리, 보관, 운송 및 시험을 기술하여야 한다. 설명에는 다음 정보를 포함하여야 한다.

For autologous or allogeneic cells or tissue, you should provide a description of the cell source, the collection procedure, and any related handling, culturing, processing, storage, shipping, and testing that is performed prior to use in manufacture. Your description should include the following information:

예를 들어 백혈구성분채집술로 채취한 세포의 경우, 채취 기구의 요약 설명, 운전 변수, 채취할 부피 또는 세포 수, 그리고 채취한 물질을 어떻게 표시·보관·추적하고 제조 시설까지 수송하는지를 제공하여야 한다. 출발물질과 공정 중 물질을 다루고 취급하는 데 잘 설계된 공정 관리와 표준작업절차(SOP)를 확립하면 제조공정의 편차, 나아가 원료의약품과 완제의약품의 편차를 줄이는 데 도움이 될 수 있다.

As an example, for cells collected by leukapheresis: you should provide a summary description of the collection device(s); operating parameters; volumes or number of cells to be collected; and how the collected material is labeled, stored, tracked, and transported to the manufacturing facility. Establishing well-designed process controls and standard operating procedures (SOPs) for manipulating and handling starting and in-process materials can help reduce variability in the manufacturing process and ultimately in the DS and DP.

이는 다기관 임상시험에서 특히 중요한데, 모든 채취 장소에 걸쳐 세포 채취와 취급에 관한 표준화된 절차를 확립하는 것이 최종 제품의 품질과 안전성을 보증하고 제조공정의 관리를 확보하는 데 매우 중요하기 때문이다. IND에는 채취 장소 목록, 각 장소의 FDA 시설 식별 번호(FDA Establishment Identifier), 그리고 해당되는 경우 확립된 기준 준수에 대한 인증(예: Foundation for the Accreditation of Cellular Therapy(FACT))을 포함하여야 한다.

This is especially important for multi-center clinical trials, where establishing standardized procedures for cell collection and handling across all collection sites is critical to assuring the quality and safety of the final product as well as ensuring control of the manufacturing process. In your IND, you should include a list of collection sites, their FDA Establishment Identifier, and any accreditations for compliance with established standards (e.g., Foundation for the Accreditation of Cellular Therapy (FACT)), if applicable.

자가 세포나 조직에 대해서는 공여자 적격성 판정이나 공여자 선별을 할 필요가 없다(21 CFR 1271.90(a)(1)). 그러나 해당되는 경우, 공여자 정보를 바탕으로 제조 절차가 공여자에게 있을 수 있는 병원성 인자를 더 증식시켜 환자에 대한 위험을 높이는지를 판단하여야 한다. 또한 자가 수여자 이외의 사람에게 바이러스나 그 밖의 외래성 인자가 퍼지는 것을 방지하기 위한 예방 조치를 기술하여야 한다(참고문헌 14).

You are not required to make a donor eligibility determination or to perform donor screening on autologous cells or tissues (21 CFR 1271.90(a)(1)). However, you should determine based on donor information whether your manufacturing procedures increase the risk to the patient by further propagation of pathogenic agents that may be present in the donor, as applicable. You should also describe precautions to prevent the spread of viruses or other adventitious agents to persons other than the autologous recipient (Ref. 14).

동종 세포나 조직에 대해서는 21 CFR 1271.90(a)의 예외에 해당하는 세포와 조직을 제외하고, 21 CFR Part 1271, Subpart C에서 요구하는 대로 공여자 선별과 시험을 수행하여야 한다. 모든 종류의 세포와 조직의 공여자는 관련 전염성 질병 인자와 질병의 위험 요인 및 임상적 증거에 대해 선별하여야 하며, 여기에는 사람 면역결핍 바이러스(HIV), B형 간염 바이러스(HBV), C형 간염 바이러스(HCV), 크로이츠펠트-야콥병(CJD)과 변종 CJD(vCJD)를 포함한 사람 TSE, 그리고 Treponema pallidum(매독)이 포함된다(21 CFR 1271.75). 또한 생존 백혈구가 풍부한 세포나 조직의 공여자는 사람 T세포 림프친화 바이러스(HTLV)에 대해 선별하여야 한다.

For allogeneic cells or tissues, you must perform donor screening and testing, as required in 21 CFR Part 1271, Subpart C, except for those cells and tissues that meet the exceptions in 21 CFR 1271.90(a). Donors of all types of cells and tissues must be screened for risk factors and clinical evidence of relevant communicable disease agents and diseases, including: human immunodeficiency virus (HIV); hepatitis B virus (HBV); hepatitis C virus (HCV); human TSE, including Creutzfeldt-Jakob disease (CJD) and variant CJD (vCJD); and Treponema pallidum (syphilis) (21 CFR 1271.75). In addition, donors of viable leukocyte-rich cells or tissues should be screened for human T-lymphotropic virus (HTLV).

또한 공여자 세포나 조직 검체를 관련 전염성 질병 인자에 의한 감염 증거에 대해 시험하여야 하며, 여기에는 HIV-1, HIV-2, HBV, HCV, 매독, 그리고 백혈구가 풍부한 세포나 조직인 경우 HTLV-1, HTLV-2 및 거대세포바이러스가 포함된다(21 CFR 1271.85). 공여자 적격성 시험에는 적절한 FDA 허가, 승인 또는 인증 공여자 선별 시험을 사용하여야 한다(21 CFR 1271.80(c)).

You must also test a specimen of donor cells or tissue for evidence of infection due to relevant communicable disease agents, including: HIV-1; HIV-2; HBV; HCV; syphilis; and if the material is leukocyte-rich cells or tissue, HTLV-1, HTLV-2, and cytomegalovirus (21 CFR 1271.85). For donor eligibility testing, you must use appropriate FDA-licensed, approved, or cleared donor screening tests (21 CFR 1271.80(c)).

아울러 요구되는 시험은 1988년 임상검사실 개선법(Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988)(42 U.S.C. 263a)과 42 CFR Part 493에 따라 인체 검체에 대한 해당 시험 수행 인증을 받았거나, 메디케어·메디케이드 서비스 센터(Centers for Medicare and Medicaid Services)가 판단한 동등한 요건을 충족한 검사실에서 수행하여야 한다(21 CFR 1271.80(c)). 새로 대두되는 관련 전염성 질병 인자와 질병(예: 웨스트나일 바이러스(WNV), 지카 바이러스)에 대한 시험에 관한 추가 정보는 공여자 적격성에 관한 생물의약품평가연구센터(CBER)의 최근 가이던스 문서도 참조하여야 한다.

Moreover, the required testing must be performed by a laboratory that either is certified to perform such testing on human specimens under the Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988 (42 U.S.C. 263a) and 42 CFR Part 493 or has met equivalent requirements as determined by the Centers for Medicare and Medicaid Services (21 CFR 1271.80(c)). You should also refer to recent Center for Biologics Evaluation and Research guidance documents on donor eligibility for additional information on testing for emerging relevant communicable disease agents and diseases (e.g., West Nile virus (WNV), Zika virus).

제대혈이나 그 밖의 모체 유래 조직을 사용한다면 21 CFR 1271.80(a)에 기술된 대로 출산한 어머니에 대해 선별과 시험을 수행하여야 한다.

If cord blood or other maternally-derived tissue is used, you must perform screening and testing on the birth mothers, as described in 21 CFR 1271.80(a).

단일 공여자 또는 원천 조직에서 얻은 동종 세포는 제조의 일관성과 관리를 높이기 위해 증식시켜 보관하기도 한다. 이러한 경우, 이 시험에 충분한 물질이 있다면 일반적으로 동종 마스터세포은행과 제조용세포은행을 바이러스 벡터 생산에 쓰이는 세포은행과 같은 방식으로 적격성 평가할 것을 권장한다(아래 V.A.2.c.iii항 「은행 시스템」 참조). 이러한 경우 FDA는 은행 제조 과정에서, 특히 사람·소·돼지 유래 원자재, 동물 영양세포(feeder cell), 그 밖의 동물 유래 시약 또는 사람 AB 혈청(사용하는 경우)으로부터 외래성 인자(예: 바이러스, 세균, 마이코플라스마)가 유입되는 것을 우려한다.

Allogeneic cells from a single donor or source tissue may sometimes be expanded and stored for greater consistency and control in manufacturing. In these situations, we generally recommend that you qualify allogeneic master and working cell banks in the same way as cell banks used for production of viral vectors (see section V.A.2.c.iii., “Banking Systems,” below), provided that you have sufficient material for this testing. In these situations, we are concerned about the introduction of adventitious agents (e.g., viruses, bacteria, mycoplasma) during the bank manufacturing process, especially from human, bovine or porcine materials, animal feeder cells, other animal-derived reagents, or human AB serum, if used.

동종 세포은행의 규모가 작다면, 소규모 동종 세포은행의 적절한 적격성 평가에 관한 정보는 해당 파일의 품질 심사자(Quality Reviewer)와 협의한다.

If your allogeneic cell bank is small, please consult with the Quality Reviewer of your file for more information on appropriate qualification of small scale allogeneic cell banks.

은행 시스템은 많은 생물의약품의 제조에서 관리와 일관성을 높인다. 은행화는 예상되는 생산 기간 전체에 걸쳐 동등하고 특성이 잘 분석된 물질을 충분히 공급할 수 있게 해 준다. 이러한 이유로 은행화된 물질은 많은 일상 생산에서 흔히 쓰이는 출발점이다. 아래에 바이러스 벡터 생산용 세포기질 은행, 세균/미생물 세포 은행, 동종 공여자 세포은행, 바이러스 벡터 은행 등 여러 은행 시스템의 적격성 평가에 관한 FDA의 현재 견해를 제시한다. 이 항에는 시험 요약을, CTD 3.2.A.2항에는 COA를 제공할 것을 권장한다. 은행 적격성 평가와 외래성 인자 시험에 관한 정보는 CTD의 종합적인 「외래성 인자 안전성 평가(3.2.A.2)」 항에도 포함하여야 한다.

A banking system improves control and consistency in the manufacturing of many biologics. Banking assures an adequate supply of equivalent, well-characterized material for production over the expected lifetime of production. For these reasons, banked materials are a common starting point for many routine production applications. We outline our current thinking for the qualification of different banking systems below, including banks of cell substrates for production of viral vectors, banks of bacterial/microbial cells, allogeneic donor cell banks, and banks of viral vectors. We recommend that you provide a summary of the testing in this section, and COAs in section 3.2.A.2 of the CTD. Information on bank qualification and adventitious agent testing should also be included in your comprehensive “Adventitious Agents Safety Evaluation (3.2.A.2)” section of the CTD.

바이러스 벡터 제조용 세포주를 선정하기 전에 최종 제품의 안전성에 영향을 줄 수 있는 세포 특성(종양원성 서열의 존재 등)을 신중히 고려하여야 한다. 이는 아데노부속바이러스(AAV)처럼 바이러스 벡터가 벡터 외 서열을 함께 패키징하는 경우에 특히 중요하다(이 가이던스 V.A.3.b항 「불순물(3.2.S.3.2)」 참조). 또한 세포은행을 만들기 전에 생산 능력에 영향을 줄 수 있는 세포 특성(예: 증식 특성, 벡터 생산 능력)을 고려할 것을 권장한다.

Prior to selecting a cell line for viral vector manufacturing, you should carefully consider characteristics of the cells that may impact the safety of the final product (such as presence of tumorigenic sequences). This is especially important when the viral vector co-packages non-vector sequences, such as adeno-associated virus (AAV) (see section V.A.3.b., “Impurities (3.2.S.3.2),” of this guidance). We also recommend that you consider cell attributes that can affect production capacity (e.g., growth characteristics, vector production capacity), prior to generation of a cell bank.

IND에는 세포은행 원천 물질의 이력과 상세한 유래를 기술하여야 한다. 설명에는 세포 원천(기원 동물종 포함), 은행을 만든 방법(예: 단일 콜로니 분리 또는 한계 희석법), 은행의 특성분석을 위해 수행한 시험, 그리고 해당되는 경우 원천 물질의 유전자 변형에 쓰인 원자재(예: 패키징 세포주)에 관한 정보를 포함하여야 한다.

In your IND, you should provide a description of the history and detailed derivation of the source material for the cell bank. Your description should include information on cell source (including species of origin); how the bank was generated (e.g., from a single colony isolate or through limiting dilution); testing performed to characterize the bank; and if applicable, materials used to genetically modify the source material (e.g., packaging cell line).

세포기질에 유전자 변형을 가한 경우(예: 바이러스 복제나 패키징이 가능하도록 바이러스 단백질을 공급하기 위해), 유전자 변형에 쓰인 원자재를 기술하여야 하며, 여기에는 유전적 변화를 도입하는 데 쓰인 원자재(예: 플라스미드, 바이러스, 유전자 편집 구성 요소)의 품질에 관한 정보가 포함된다. 바이러스 벡터 생산용 세포기질을 만드는 데 쓰인 원자재는 최종 유전자치료제의 안전성과 순도를 보증할 수 있도록 충분히 특성분석되어야 한다.

When a cell substrate has been genetically modified (e.g., to provide viral proteins to allow virus replication or packaging), you should provide a description of the materials used for the genetic modification, including information on the quality of the materials (e.g., plasmids, viruses, gene editing components) used to introduce the genetic changes. Materials used to generate cell substrates for production of viral vectors should be sufficiently characterized to ensure safety and purity of the final gene therapy product

또한 세포은행을 어떻게 보관하고 유지하는지에 관한 정보와 함께, 제조공정에 쓰이는 세포의 안전성, 확인, 순도 및 안정성을 적절히 확립하기 위한 적격성 평가에 관한 상세 정보를 제공할 것을 권장한다.

In addition, we recommend that you provide information on how the cell banks are stored and maintained as well as detailed information on qualification to adequately establish the safety, identity, purity, and stability of the cells used in your manufacturing process.

세포기질의 적격성 평가에 관한 추가 정보는 FDA 가이던스 「Q5D Quality of Biotechnological/Biological Products: Derivation and Characterization of Cell Substrates Used for Production of Biotechnological/Biological Products」(참고문헌 15)와 FDA 업계 가이던스 「Characterization and Qualification of Cell Substrates and Other Biological Materials Used in the Production of Viral Vaccines for Infectious Disease Indications」(참고문헌 11)에서 찾을 수 있다.

Additional sources of information regarding qualification of cell substrates can be found in FDA’s Guidance “Q5D Quality of Biotechnological/Biological Products: Derivation and Characterization of Cell Substrates Used for Production of Biotechnological/Biological Products” (Ref. 15) and FDA’s Guidance for Industry: “Characterization and Qualification of Cell Substrates and Other Biological Materials Used in the Production of Viral Vaccines for Infectious Disease Indications.” (Ref. 11).

세포은행 적격성 평가에는 다음을 위한 시험이 포함되어야 한다.

Cell bank qualification should include tests to:

제조용세포은행(WCB)은 MCB의 바이알 하나 이상에서 유래할 수 있다. WCB의 적격성 평가와 특성분석을 문서화하는 정보는 일반적으로 MCB보다 덜 광범위하다. WCB 시험에는 무균, 마이코플라스마, 확인, 시험관내 외래성 인자 시험이 포함되어야 하며, 이에 한정되지 않는다. WCB 적격성 평가에 쓰이는 분석 방법에 관한 추가 정보는 이 가이던스 V.A.4.b항 「분석절차(3.2.S.4.2)」를 참조한다.

A Working Cell Bank (WCB) may be derived from one or more vials of the MCB. The information to document qualification and characterization for a WCB is generally less extensive than that for the MCB. WCB testing should include, but is not limited to, sterility, mycoplasma, identity, and in vitro adventitious agent tests. For additional information on analytical methods used for WCB qualification, please see section V.A.4.b., “Analytical Procedures (3.2.S.4.2),” of this guidance.

세균 MCB는 플라스미드 DNA를 만드는 출발물질로 흔히 쓰이며, 이 플라스미드 DNA는 유전자치료 원료의약품으로 쓰이거나, AAV 또는 렌티바이러스 벡터 같은 다른 유전자치료제의 원료의약품을 만드는 제조 중간체로 쓰일 수 있다. 세균 MCB는 유전자치료용 미생물 벡터를 만드는 데 쓰일 수도 있다(참고문헌 9).

Bacterial MCBs are frequently used as the starting material to generate plasmid DNA, which can be used as a gene therapy DS or used as a manufacturing intermediate to generate a DS for other gene therapy products, such as AAV or lentiviral vectors. Bacterial MCBs also may be used to generate a microbial vector for gene therapy (Ref. 9).

세균 MCB는 플라스미드나 미생물 벡터 제조에 일관된 출발물질을 제공할 수 있으므로 일반적으로 그 구축을 권장한다. 그러나 플라스미드 중간체가 적절히 적격성 평가되었다면 모든 제조 상황에서 MCB가 필요하지는 않을 수 있다(예: 플라스미드를 생체외 세포 변형용 벡터를 만드는 데 쓰는 초기 단계 임상시험). FDA는 세균 MCB의 용도가 다양함을 인지하고 있으며, 용도와 관계없이 은행을 적절히 적격성 평가하고 은행화된 물질의 적격성 평가에 관한 충분히 상세한 정보를 제출할 것을 권장한다.

We generally recommend the establishment of a bacterial MCB, as it can provide a consistent starting material for the manufacture of plasmids or microbial vectors. However, MCBs may not be necessary for all manufacturing situations if the plasmid intermediate is appropriately qualified (e.g., for early phase studies when the plasmid is used to make a vector for ex vivo modification of cells). We recognize the diversity of uses for bacterial MCBs, and recommend that you appropriately qualify the bank, and submit sufficient detailed information for the qualification of the banked material regardless of use.

세포은행을 만드는 데 쓰인 물질의 이력과 유래를 기술하여야 하며, 여기에는 플라스미드 벡터를 어떻게 설계하고 구축했는지에 관한 정보가 포함된다. 은행 물질 자체에 대해서는 미생물 세포의 유전자형과 기원을 기술하고, 그 물질을 어떻게 만들었는지, 은행을 어떻게 보관하고 유지하는지에 관한 정보와 함께, 제조공정에 쓰이는 미생물 세포 조제물의 안전성, 확인, 순도 및 안정성을 적절히 확립하기 위한 은행의 적격성 평가 정보(세포은행 COA 포함)를 제공하여야 한다.

You should provide a description of the history and derivation of the materials used to generate the cell bank, including information on how plasmid vectors were designed and constructed. For the bank material, itself, you should describe the genotype and source of the microbial cells, provide information on how the material was generated, and how the bank is stored and maintained as well as information on the qualification of the bank (including cell bank COAs) to adequately establish the safety, identity, purity, and stability of the microbial cell preparation used in the manufacturing process.

DNA 플라스미드 제조에 쓰이는 세균 세포은행에 대해서는 다음 시험을 포함할 것을 권장한다.

For bacterial cell banks used to manufacture a DNA plasmid, we recommend the testing include:

미생물 벡터 제조에 쓰이는 미생물 세포은행에 대한 MCB 시험 권고사항은 FDA 「Recommendations for Microbial Vectors used for Gene Therapy, Guidance for Industry」(참고문헌 9)에 제시되어 있다.

For microbial cell banks used to manufacture microbial vectors, our recommendations for MCB testing are outlined in FDA’s “Recommendations for Microbial Vectors used for Gene Therapy, Guidance for Industry” (Ref. 9).

바이러스 은행은 바이러스 벡터 원료의약품(예: 헤르페스바이러스 기반 벡터, 아데노바이러스 기반 벡터)을 제조하기 위해 증식시키거나, 비복제 벡터(예: AAV, 거틀리스(gutless) 아데노바이러스) 제조용 헬퍼 바이러스를 만드는 데 쓰일 수 있다. FDA는 바이러스 은행의 용도가 다양함을 인정하며, 용도와 관계없이 은행화된 물질의 적격성 평가에 대해 같은 수준의 상세 정보를 제출할 것을 권장한다. 이 은행의 원천 또는 시드 물질의 이력과 유래를 상세히 기술하여야 한다.

Viral banks may be expanded to manufacture a viral vector DS (e.g., herpesvirus-based vectors, adenovirus-based vectors), or they may be used to generate helper viruses for manufacturing non-replicating vectors (e.g., AAV, gutless adenovirus). We acknowledge the diversity of uses of viral banks, and we recommend the same level of detail be submitted for the qualification of banked material, regardless of use. You should provide a detailed description of the history and derivation of the source or seed materials for these banks.

시드 원료(seed stock)를 어떻게 만들었는지, 유래 과정에서 어떤 세포와 동물 유래 물질을 사용했는지 기술하여야 한다.

You should describe how the seed stock was generated and what cells and animal-derived materials were used in the derivation process.

재조합 바이러스 벡터의 이력과 유래를 기술할 때에는 최종 벡터와 벡터 중간체의 유전자 지도가 유용하다. 시드 물질을 플라크 정제했는지, 한계 희석으로 정제했는지, DNA 또는 RNA 클론에서 구제(rescue)했는지, 그리고 증식 중에 몇 번 계대했는지 밝힐 것을 권장한다.

A gene map of the final vector and vector intermediates is useful when describing the history and derivation of recombinant viral vectors. We recommend that you state whether the seed material was plaque-purified, purified by limiting dilution, or rescued from DNA or RNA clones and how many times it was passaged, during expansion.

은행화된 물질에 대해서는 제조공정과 그 물질을 만든 조건(예: 연구실 또는 GMP 시설)을 기술하여야 한다. 은행 제조에 사용한 동물 유래 물질 목록을 제출하고, 마스터 바이러스 은행(MVB)이 단일 클론을 나타낼 것으로 예상되는지 아니면 바이러스 변이체 또는 서열의 분포를 나타낼 것으로 예상되는지 밝혀야 한다.

For the banked material, you should describe the manufacturing process and the conditions under which the banked material was generated, for example, in a research laboratory or a good manufacturing practice facility. You should provide a list of animal-derived materials used in the generation of the bank and state whether the master virus bank (MVB) is expected to represent a single clone or a distribution of viral variants or sequences.

또한 은행을 어떻게 보관하고 유지하는지에 관한 정보와 함께, 제조공정에 쓰이는 바이러스 조제물의 안전성, 확인, 순도 및 안정성을 적절히 확립하기 위한 은행의 적격성 평가에 관한 상세 정보를 제공할 것을 권장한다. COA 가 있으면 IND 에 제출하여야 한다(CTD 3.2.A.2항). MVB 적격성 평가에 쓰는 분석방법에 관한 추가 정보는 이 가이던스 V.A.4.b항 「분석절차(3.2.S.4.2)」를 참조한다.

We also recommend that you provide information on how the bank is stored and maintained as well as detailed information on the qualification of the bank to adequately establish the safety, identity, purity, and stability of the virus preparation used in the manufacturing process. If a COA is available, it should be submitted to the IND (section 3.2.A.2 of the CTD). For additional information on analytical methods used for MVB qualification, please see “Analytical Procedures (3.2.S.4.2)” section V.A.4.b. of this guidance.

바이러스 벡터 은행의 적격성 평가에는 다음을 위한 시험을 포함할 것을 권장한다.

We recommend viral vector bank qualification includes tests to:

제조용 바이러스 은행(WVB)은 MVB 바이알 하나 이상에서 유래할 수 있으며, WVB 의 적격성 평가와 특성분석을 문서화하는 정보는 MVB 에 필요한 것보다 덜 광범위하다. WVB 를 만드는 데 사용한 공정과 동물 유래 물질 사용 여부를 기술하여야 한다. WVB 시험에는 무균, 마이코플라스마, 확인, 시험관내 외래성 인자 시험이 포함되어야 하며, 이에 한정되지 않는다. WCB 적격성 평가에 쓰는 분석방법에 관한 추가 정보는 이 가이던스 V.A.4.b항 「분석절차(3.2.S.4.2)」를 참조한다.

A working viral bank (WVB) may be derived from one or more vials of the MVB, and the information to document qualification and characterization of the WVB is less extensive than that needed for the MVB. You should describe the process used to generate the WVB and whether animal-derived materials were used. Testing for WVB should include, but is not limited to, sterility, mycoplasma, identity, and in vitro adventitious agent tests. For additional information on the analytical methods used for WCB qualification, please see section V.A.4.b., “Analytical Procedures (3.2.S.4.2),” of this guidance.

제조공정의 중요 단계와 중간체 관리를 기술하여야 한다. 중요 관리 단계에는 이 가이던스 V.A.2.b항 「제조공정 및 공정 관리에 대한 설명(3.2.S.2.2)」에 제시한 단계가 포함된다. 허용기준이 있는 공정 중 시험을 수행하는 단계도 중요 관리 단계로 고려할 것을 권장한다. FDA는 개발 초기에는 이 정보가 제한적일 수 있음을 인정하며, 의뢰자가 제품 개발이 진행됨에 따라 추가 정보와 갱신 내용을 제공할 것을 권장한다.

You should describe the control of critical steps and intermediates in the manufacturing process. Critical control steps include those outlined in section V.A.2.b., “Description of Manufacturing Process and Process Controls (3.2.S.2.2),” of this guidance. We recommend that you also consider any steps in which in-process tests with acceptance criteria are performed as critical control steps. The Agency acknowledges that this information may be limited in the early phases of development and recommends that sponsors provide additional information and updates as product development proceeds.

제조 중간체를 정의하고 중간체의 품질과 관리에 관한 정보를 제공하여야 한다. 중간체에는 벌크 회수액의 임시 보관, 농축 단계, 정제 중간체(예: 컬럼 분획 또는 용출액)처럼 채취 또는 보관(hold) 단계에서 나온 물질이 포함될 수 있다. 공정 한계 설정을 쉽게 하고, 향후 품목허가 신청을 뒷받침하기 위해 제안된 한계 안에서 각 단계와 보관 시간을 밸리데이션할 수 있도록, 생산 단계의 소요 시간과 보관 시간을 관리하고 기록하여야 한다.

You should define manufacturing intermediates and provide information on the quality and control of intermediates. Intermediates may include material from collection or hold steps, such as temporary storage of bulk harvest, concentration steps, or purification intermediates (e.g., column fractions or eluate). The duration of production steps and hold times should be controlled and recorded to facilitate the establishment of process limits and to allow for future validation of each step and hold time within the proposed limits in support of a license application.

유전자치료제 제조의 중간체에는 AAV 또는 렌티바이러스 벡터처럼 다른 유전자치료제 제조에 쓰이는 DNA 플라스미드도 포함될 수 있다. 위에서, 그리고 이 가이던스 V.A.2.c항 「원자재 관리(3.2.S.2.3)」에서 더 자세히 기술한 대로, DNA 플라스미드 중간체는 적격성 평가를 거친 은행에서 유래할 것을 권장한다. 또한 플라스미드를 IND 의뢰자가 만들었는지 위탁 제조업자가 만들었는지와 관계없이, 플라스미드 제조 절차, 시약, 사용을 위한 플라스미드 기준에 관한 정보를 제공할 것을 권장한다. 일반적으로 이 시험에는 최종 제품의 확인, 순도, 역가 및 안전성을 보증하는 시험을 포함할 것을 권장한다.

Intermediates in gene therapy manufacturing may also include DNA plasmids that are used in the manufacture of other gene therapy products, such as AAV or lentiviral vectors. We recommend that DNA plasmid intermediates be derived from qualified banks, as described in more detail above and in section V.A.2.c., “Control of Materials (3.2.S.2.3),” of this guidance. In addition, we recommend that you provide information on the plasmid manufacturing procedures, reagents, and plasmid specifications for use, regardless of whether they were made by the IND sponsor or a contract manufacturer. In general, we recommend that this testing include assays to ensure the identity, purity, potency, and safety of the final product.

DNA 플라스미드의 경우 무균, 엔도톡신, 순도(초나선형 비율과 잔류 세포 DNA, RNA 및 단백질 수준 포함), 확인 시험(제한효소 절단, 그리고 세균 은행에서 염기서열 분석을 수행하지 않았다면 염기서열 분석)이 포함될 수 있다. 플라스미드 품질 시험을 문서화한 COA 를 IND 에 포함하여야 한다(CTD 3.2.A.2항).

For a DNA plasmid, this may include sterility, endotoxin, purity (including percent of supercoiled form and residual cell DNA, RNA, and protein levels), and identity testing (restriction digest and sequencing if sequencing was not performed on the bacterial bank). A COA documenting plasmid quality testing should be included in the IND (section 3.2.A.2 of the CTD).

초기 단계 제조에는 공정 밸리데이션 시험이 일반적으로 또는 보통 요구되지 않으므로, 대부분의 최초 IND 제출에는 공정 성능 적격성 평가가 포함되지 않는다. 초기 단계 제조 경험을 활용하여 공정 개선 필요성을 평가하고 향후 공정 밸리데이션 시험을 뒷받침할 것을 권장한다. 공정 밸리데이션에 관한 추가 정보는 FDA 가이던스 「Process Validation: General Principles and Practices」(참고문헌 17)에서 볼 수 있다.

Process validation studies are generally or typically not required for early stage manufacturing, and thus, most original IND submissions will not include process performance qualification. We recommend that you use early stage manufacturing experience to evaluate the need for process improvements and to support process validation studies in the future. Additional information on process validation can be found in FDA’s Guidance for Industry: “Process Validation: General Principles and Practices” (Ref. 17).

일반적으로 모든 개발 단계의 IND 는 적절한 제조 관리와 감독을 보증하기 위해 문서화된 표준작업절차서(SOP)를 갖추고 있을 것을 권장한다. 제조 감독은 보통 전담 품질 부서(Quality Unit)가 수행하며, 그 업무에는 미생물 오염, 교차오염, 제품 혼동을 방지하는 절차의 시행이 포함된다. 품질 부서는 로트 부적합, 기준일탈 결과를 조사하는 절차와 시정조치를 시행하는 방법을 갖추어야 한다. IND 에는 품질관리 시험과 감독을 제조 부서와 분리하는 방식을 포함하여 품질 부서에 대한 설명 또는 요약을 포함할 것을 권장한다. 자세한 내용은 이 가이던스 V.C.1항 「부록 – 시설 및 설비(3.2.A.1)」를 참조한다.

In general, we recommend that INDs at all stages of development should have established written SOPs to ensure proper manufacturing control and oversight. Manufacturing oversight is usually performed by a dedicated Quality Unit, the duties of which include implementing procedures to prevent microbial contamination, cross-contamination, and product mix-ups. Your Quality Unit should have procedures in place to investigate lot failures, out-of-specification results, and ways to implement corrective actions. We recommend that your IND include a description or summary of your Quality Unit, including the manner in which quality control testing and oversight are separated from the manufacturing unit. For more information see section V.C.1., “Appendices – Facilities and Equipment (3.2.A.1),” of this guidance.

CTD 「제조공정 및 공정 관리에 대한 설명(3.2.S.2.2)」 항에 기술한 제조공정의 개발 이력에 대한 설명과 논의를 제출하여야 한다.

You should provide a description and discussion of the developmental history of the manufacturing process as described in the “Description of Manufacturing Process and Process Controls (3.2.S.2.2)” section of the CTD.

초기 단계 IND 에서는 독성시험 로트와 임상시험에 사용할 계획인 물질 사이에 제조 및 시험상의 차이가 있을 수 있다. 후기 단계 IND 에서는 공정 개발, 최적화의 일환으로 제조공정이 변경되거나, 특정 조건에서 재처리 단계가 있을 수 있다. 두 경우 모두 제조상의 차이가 제품 안전성과 활성에 어떤 영향을 줄 것으로 예상되는지 기술하고, CTD 「배치 분석(3.2.S.4.4)」 항에 배치 분석 정보를 제공할 것을 권장한다.

For early stage INDs, there may be differences between the manufacturing and testing of the toxicology lots and the material you plan to use in the clinical studies. For later stage INDs, there may be changes to the manufacturing process as part of process development, optimization, or under certain conditions there may be reprocessing step(s). In both situations, we recommend that you describe how manufacturing differences are expected to impact product safety and activity and to provide batch analysis information in the “Batch Analysis (3.2.S.4.4)” section of the CTD.

제조를 크게 변경하면 그 변경이 제품의 확인, 순도, 역가 및 안전성에 미치는 영향을 판단하기 위해 비교동등성 시험이 필요할 수 있다. 비교동등성 시험의 범위는 제조 변경 내용, 분석방법이 제품 변화를 검출하는 능력, 임상 개발 단계에 따라 달라진다. 최초 인체 적용 시험에서는 독성시험 로트와 임상 로트 사이의 차이가 제품 안전성에 미치는 영향을 평가하여야 한다. 후기 단계 시험, 특히 제품 유효성을 측정하도록 설계된 시험에서는 임상 로트 간 차이가 제품 안전성과 활성에 미치는 영향을 평가하여야 한다.

If you make significant manufacturing changes, then comparability studies may be necessary to determine the impact of these changes on the identity, purity, potency, and safety of the product. The extent of comparability testing would depend on the manufacturing change, the ability of analytical methods to detect changes in the product, and the stage of clinical development. For first-in-human studies, any differences between toxicology lots and clinical lots should be assessed for their impact on product safety. For later phase studies, especially those designed to measure product efficacy, differences in clinical lots should be assessed for their impact on product safety and activity.

향후 제품 개발 중 또는 임상시험용 완제의약품의 품목허가 후에 비교동등성 시험을 요청받을 경우에 대비하여, 가능한 경우 원료의약품과 제조 중간체의 검체를 보관하는 것이 중요하다는 점에 유의한다.

Please note that it is important to retain samples of the DS and manufacturing intermediates, when possible, in the event that comparability studies are requested during future product development or after licensure of the investigational DP.

최초 IND 제출에는 벡터의 주석 서열 분석을, 이후 제출에는 제품 개발 과정에서 수집한 추가 서열 정보를 포함할 것을 권장한다. 원시 서열 데이터는 CTD 「지역 정보(3.2.R)」 항에 포함할 수 있다. 또한 CTD 「구조(3.2.S.1.2)」 항에서 아직 기술하지 않았다면, 원료의약품의 1차, 2차 또는 고차 구조, 번역 후 변형, 및/또는 세포 유형 분포를 확인하는 추가 정보를 제공할 것을 권장한다.

We recommend that you include annotated sequence analysis for your vector in the original IND submission and any additional sequence information gathered during the course of product development in subsequent submissions. Raw sequence data may be included in the “Regional Information (3.2.R)” section of the CTD. In addition, we recommend that you provide any further information confirming the primary, secondary, or higher order structure; post-translational modifications; and/or distribution of cell types for the DS if it has not already been described in the “Structure” (3.2.S.1.2)” section of the CTD.

제조공정은 공정 관련 불순물과 제품 관련 불순물을 제거하도록 설계하고, 잔류 불순물 수준을 측정하는 시험을 갖출 것을 권장한다. IND 에 시험 절차를 기술하고 적절한 한도를 설정하여야 한다. 허용 한도를 포함한 불순물에 대한 초기 기준은 제조 경험이 쌓이면서 다듬을 수 있다. 제품 개발 전 과정에서 불순물을 측정할 것을 권장하는데, 이는 제품 안전성 보증에 도움이 되고, 제조공정 이해에 기여하며, 필요한 경우 제조 변경 후 제품 품질을 비교하는 기준선이 되기 때문이다.

We recommend that your manufacturing process be designed to remove process- and product-related impurities and that you have tests in place to measure levels of residual impurities. You should describe your test procedures in the IND and set appropriate limits. Your initial specification, including acceptance limits, for impurities may be refined with additional manufacturing experience. We recommend that you measure impurities throughout product development, as this will help ensure product safety, contribute to your understanding of the manufacturing process, and provide a baseline for comparing product quality after manufacturing changes, if needed.

공정 관련 불순물에 대한 시험을 권장한다. 여기에는 잔류 세포기질 단백질, 외래 핵산 서열, 헬퍼 바이러스 오염물(즉 감염성 바이러스, 바이러스 DNA, 바이러스 단백질), 그리고 사이토카인, 성장인자, 항체, 선별 비드, 혈청, 용매처럼 제조 중 사용한 시약이 포함되며, 이에 한정되지 않는다.

We recommend testing for process-related impurities. These include, but are not limited to, residual cell substrate proteins, extraneous nucleic acid sequences, helper virus contaminants (i.e., infectious virus, viral DNA, viral proteins), and reagents used during manufacture, such as cytokines, growth factors, antibodies, selection beads, serum, and solvents.

많은 바이러스 조제물에서 흔한 공정 관련 불순물은 벡터와 함께 정제될 수 있는 세포기질 DNA 같은 잔류 핵산이다. AAV 를 포함한 일부 벡터는 (형질주입 중 사용한) 플라스미드 DNA 서열과 세포 DNA 를 다량으로 패키징(즉 바이러스 캡시드 안에 담음)할 수도 있다. 이러한 불순물이 있으면 제품 품질과 안전성에 나쁜 영향을 줄 수 있다. 제품의 비벡터 DNA 오염을 줄이도록 제조공정을 최적화할 것을 권장한다. 또한 제품 내 외래 핵산 서열의 양을 모니터링하고 관리하여야 한다.

A common process-related impurity for many viral preparations is residual nucleic acid, such as cell substrate DNA, which can co-purify with the vector. Some vectors, including AAV, can also package (i.e., inside the viral capsid) a large amount of plasmid DNA sequences (used during transfection) as well as cellular DNA. The presence of these impurities may have adverse effects on product quality and safety. We recommend that you optimize your manufacturing process to reduce non-vector DNA contamination in your product. Additionally, you should monitor and control the amount of extraneous nucleic acid sequences in your product.

일부 세포기질은 종양원성 유전 서열이나 감염을 전파할 수 있는 레트로바이러스 서열도 지니고 있으므로, 바이러스 조제물에 딸린 잔류 DNA 의 생물학적 활성을 최소화하는 조치를 취할 것을 권장한다. 이는 DNA 크기를 기능성 유전자 크기 미만으로 줄이고 잔류 DNA 양을 줄여서 달성할 수 있다. 비종양원성 연속 세포의 경우 잔류 DNA 양은 10 ng/dose 미만으로, DNA 크기는 약 200 염기쌍 미만으로 제한할 것을 권장한다(참고문헌 12).

Since some cell substrates also harbor tumorigenic genetic sequences or retroviral sequences that may be capable of transmitting infection, we recommend that you take steps to minimize the biological activity of any residual DNA associated with your viral preparation. This can be accomplished by reducing the size of the DNA to below the size of a functional gene and by decreasing the amount of residual DNA. We recommend that you limit the amount of residual DNA for continuous non-tumorigenic cells to less than 10 ng/dose and the DNA size to below approximately 200 base pairs (Ref. 12).

종양 유래 세포(예: Hela)나 종양원성 표현형을 지닌 세포(예: HEK293, HEK293T), 또는 특별한 우려를 일으킬 수 있는 그 밖의 특성을 지닌 세포를 사용한다면, 제품 안전성을 보증하기 위해 특정 잔류 DNA 양을 제한해야 할 수 있다. 위에 기술한 대로 숙주세포 DNA 함량과 크기를 관리하는 것에 더하여, 환자 노출을 제한하는 허용기준으로 제품 내 관련 형질전환 서열의 수준도 관리하여야 한다. 예를 들어 293T 세포에서 만든 제품은 아데노바이러스 E1 및 SV40 Large T 항원 서열을 시험하여야 하고, 마찬가지로 Hela 세포에서 만든 제품은 E6/E7 유전자를 시험하여야 한다. 시험은 적절히 관리되어야 하며, 제품 내 이 서열들의 수준을 결정하기에 충분한 감도와 특이성을 갖추어야 한다.

If you are using cells that are tumor-derived (e.g., Hela) or have tumorigenic phenotypes (e.g., HEK293, HEK293T) or other characteristics that may give rise to special concerns, the limitation of specific residual DNA quantities may be needed to assure product safety. In addition to controlling host cell DNA content and size, as described above, you should also control the level of relevant transforming sequences in your product with acceptance criteria that limit patient exposure. For example, products made in 293T cells should be tested for adenovirus E1 and SV40 Large T antigen sequences, similarly products made in Hela cells should be tested for E6/E7 genes. Your tests should be appropriately controlled and of sufficient sensitivity and specificity to determine the level of these sequences in your product.

AAV 를 포함한 일부 벡터는 비벡터 DNA(예: 플라스미드 DNA, 헬퍼 바이러스 서열, 세포 DNA)를 다량으로 패키징할 수 있으며, 현행 가이던스(참고문헌 12)에 근거하여 안전성을 보증할 수준까지 제품에서 이 DNA 를 제거하거나 줄이는 것이 불가능할 수 있다. 따라서 AAV 처럼 비벡터 DNA 를 패키징하는 바이러스 벡터를 만드는 데 쓰는 세포주와 헬퍼 서열은 제품의 위험을 줄이도록 신중하게 선택할 것을 강력히 권장한다. 의뢰자는 사용한 제조 시스템이 초래할 수 있는 잠재적 위험을 다루고 완화하기 위해 필요한 품질 데이터, 위해성 평가, 및/또는 공정 및 제품 관리전략의 세부사항을 제공하여야 한다.

Some vectors, including AAV, can package a large amount of non-vector DNA (e.g., plasmid DNA, helper virus sequences, cellular DNA), and it may not be possible to remove or reduce this DNA from the product to a level to assure safety based on current guidance (Ref. 12). Therefore, we strongly recommend that the cell lines and helper sequences used to make viral vectors that package non-vector DNA, such as AAV, be carefully chosen to reduce the risks of the product. Sponsors should provide necessary quality data, risk assessments, and/or details of their process and product control strategy to address and mitigate potential risks posed by the manufacturing systems used.

바이러스 벡터의 대표적인 제품 관련 불순물에는 결함 간섭 입자, 비감염성 입자, 빈 캡시드 입자, 또는 복제하는 재조합 바이러스 오염물이 포함될 수 있다. 이러한 불순물은 측정하여야 하며, 비율(예: 꽉 찬 입자:빈 입자, 또는 바이러스 입자:감염 단위)로 보고할 수 있다.

For viral vectors, typical product-related impurities may include defective interfering particles, non-infectious particles, empty capsid particles, or replicating recombinant virus contaminants. These impurities should be measured and may be reported as a ratio, for example, full:empty particles or virus particles:infectious units.

생체외(ex vivo) 유전자 변형 세포의 제품 관련 불순물에는 선별 또는 농축 후 남아 있을 수 있는 비표적 세포와, 생체외 변형 단계 후 남아 있을 수 있는 변형되지 않은 표적 세포가 포함된다. 비표적 세포의 성질과 수를 평가하고 유전자 변형된 세포의 백분율을 측정할 것을 권장한다. 임상 개발 중 제품에 존재하는 세포 표현형에 대한 이해가 깊어지면, 제조 관리를 강화하기 위해 특정 세포 집단에 대한 불순물 시험을 추가하는 것도 고려할 수 있다.

For ex vivo genetically modified cells, product-related impurities include non-target cells, which may be present after selection or enrichment, and unmodified target cells, which may be present after the ex vivo modification step. We recommend that you evaluate the nature and number of non-target cells and measure the percentage of cells that have been genetically modified. As you develop a greater understanding of the cellular phenotypes present in your product during clinical development, you may also consider adding impurity tests for specific cell populations in order to establish greater manufacturing control.

최초 IND 제출에 원료의약품 기준을 기재하여야 한다. 기준은 품질을 평가하는 데 쓰는 시험 항목, 분석절차 참조, 적절한 허용기준의 목록으로 정의된다. 허용기준은 비임상 및/또는 임상시험에 사용한 로트의 데이터, 제조 일관성 입증에 사용한 로트의 데이터, 안정성 시험 데이터, 관련 개발 데이터에 근거하여 설정하고 타당성을 입증하여야 한다.

You should list DS specifications in your original IND submission. Specifications are defined as a list of tests, references to analytical procedures, and appropriate acceptance criteria used to assess quality. Acceptance criteria should be established and justified, based on data obtained from lots used in preclinical and/or clinical studies, data from lots used for demonstration of manufacturing consistency, data from stability studies, and relevant development data.

임상 개발 초기 단계의 제품은 확정된 기준이 매우 적고, 일부 시험은 아직 개발 중일 수 있다. 그러나 IND 에 제출한 시험 계획은 원료의약품이 확인, 함량(역가), 품질 및 순도에 대한 허용 한도를 충족함을 보증하는 데 필요한 원료의약품의 물리적, 화학적 또는 생물학적 특성을 기술하기에 적절하여야 한다(21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(a)).

For products in the early stages of clinical development, very few specifications are finalized, and some tests may still be under development. However, the testing plan submitted in your IND should be adequate to describe the physical, chemical, or biological characteristics of the DS necessary to ensure that the DS meets acceptable limits for identity, strength (potency), quality, and purity (21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(a)).

IND 에는 1상 시점에 안전성 시험에 대한 허용기준이 확립된 기준을 포함하여야 한다. 안전성 시험에는 외래 물질, 외래성 인자, 미생물 오염, 복제 가능 바이러스가 없음을 보증하는 시험이 포함된다. 흔히 쓰는 일부 안전성 시험방법에 관한 정보는 이 가이던스 V.A.4.b항 「분석절차(3.2.S.4.2)」에 더 자세히 제시되어 있다. 안전성 시험의 감도를 최대화하려면 오염이 검출될 가능성이 가장 큰 생산 단계에서 각 시험을 수행하는 것이 중요하다. 예를 들어 마이코플라스마 또는 외래성 바이러스 시험(생체내 또는 시험관내)은 추가 처리 전, 즉 청징, 여과, 정제, 불활화 전에 세포 배양 회수 물질(세포와 상층액)로 수행하여야 한다.⁸

Your IND should include specifications with established acceptance criteria for safety testing at Phase 1. Safety testing includes tests to ensure freedom from extraneous material, adventitious agents, microbial contamination, and replication competent virus. Information on some common safety test methods is provided in more detail in section V.A.4.b., “Analytical Procedures (3.2.S.4.2),” of this guidance. To maximize the sensitivity of safety testing, it is important that you perform each test at the stage of production at which contamination is most likely to be detected. For example, tests for mycoplasma or adventitious viruses (in vivo or in vitro) should be performed on cell culture harvest material (cells and supernatant) prior to further processing, e.g., prior to clarification, filtration, purification, and inactivation.⁸

IND 에는 1상 시점에 적절한 용량 수준(즉 함량 또는 역가)을 측정하기 위한 기준도 포함하여야 한다. 임상시험에서 일관된 투여를 보증하기 위해, 용량 결정에 쓰는 시험(예: 정량 중합효소연쇄반응(qPCR)에 의한 벡터 유전체 역가, 형질도입 단위, 플라크 형성 단위, 형질도입 세포에 대한 유세포 분석)은 임상시험 시작 전에 사용에 적합하도록 적격성 평가를 거쳐야 한다. 용량 결정 시험의 적격성 평가 방법에 관한 정보는 이 가이던스 V.A.4.c항 「분석절차 밸리데이션(3.2.S.4.3)」에 제시되어 있다.

Your IND should also include specifications for measuring an appropriate dose level (i.e., strength or potency) at Phase 1. To ensure consistent dosing in your clinical investigations, assays used to determine dose (e.g., vector genome titer by quantitative polymerase chain reaction (qPCR), transducing units, plaque-forming units, flow cytometry for transduced cells) should be qualified as suitable for use prior to initiating clinical studies. Information on how to qualify your dose determining assay is provided in section V.A.4.c., “Validation of Analytical Procedures (3.2.S.4.3),” of this guidance.

추가 시험은 유전자치료제의 유형과 임상 개발 단계에 따라 달라진다. 이러한 시험에는 확인, 순도(엔도톡신, 그리고 잔류 숙주세포 DNA, 소혈청알부민(BSA), DNase 같은 오염물 포함), 역가/함량 같은 제품 특성을 평가하는 시험이 포함될 수 있다. 역가 시험에 관한 추가 정보는 FDA 가이던스 「Potency Tests for Cellular and Gene Therapy Products」(참고문헌 18)를 참조한다.

Additional testing will depend on the type of gene therapy product and the phase of clinical development. These tests may include assays to assess product characteristics, such as identity, purity (including endotoxin and contaminants, such as residual host cell DNA, bovine serum albumin (BSA), DNase), and potency/strength. For additional information on potency tests, please refer to FDA’s Guidance for Industry: “Potency Tests for Cellular and Gene Therapy Products” (Ref. 18).

이 항에 열거한 것과 같은 유형의 시험이 원료의약품과 완제의약품 양쪽의 출하에 모두 필요하지 않을 수 있다는 점에 유의한다. 특정 상황에서는 제조공정과 관리의 설계 때문에 원료의약품과 완제의약품을 쉽게 구분하지 못할 수 있다. 이런 경우 의뢰자는 원료의약품과 완제의약품을 어떻게 정의하고 출하 요건을 충족할지 FDA 에 문의할 수 있다. 경우에 따라 반복 시험이 바람직한 관행일 수 있으나, 중복 시험이 언제나 실행 가능하거나 추가 정보를 제공하는 것은 아니다. 이 경우 원료의약품 또는 완제의약품 중 어느 한쪽의 출하를 위해 수행하는 시험을 선택한 근거를 제시할 것을 권장한다.

Please note that the same types of tests listed in this section of the guidance may not be necessary for the release of both the DS and DP. In certain situations, the DS and DP may not be readily distinguishable due to the design of manufacturing process and control. In such cases, the sponsor may inquire with FDA on how to define DS and DP and meet release requirements. In some cases, repeat testing may be good practice; however, redundant testing may not always be feasible or provide additional information. In this case, we recommend that you provide a rationale to support the selection of testing performed for release of either the DS or DP.

제품 특성분석과 불순물 시험에 관한 추가 의견은 이 가이던스 V.B.5.a항 「기준 및 시험방법(3.2.P.5.1)」에 제시한다.

We provide some additional comments regarding tests for product characterization and impurities under section V.B.5.a., “Specifications (3.2.P.5.1),” of this guidance.

제조공정과 제품 품질을 평가하기 위해 제조 중 사용하는 분석절차에 대한 설명을 제출하여야 한다. 최초 IND 제출에서 그 설명은 FDA 가 절차의 적절성을 이해하고 평가할 수 있도록 시스템 적합성 관리에 대한 설명을 포함하여 충분히 상세하여야 한다. 품질시스템의 일부로서 제품 개발 초기 단계에 분석절차 수행 방법에 대한 상세한 SOP 를 마련할 것을 권장한다. FDA는 제품 개발 중에 관리와 적합성을 개선하기 위해 분석방법이 수정될 수 있음을 인정한다. 그러나 제품 품질과 안전성을 보증하고 제조 변경 후 비교동등성 시험을 할 수 있도록, 시험 관리는 임상 개발의 모든 단계에서 매우 중요하다. 가능한 경우 제품 개발 중 방법과 방법 개선에 대한 이해를 넓히기 위해 시험 성능의 경향을 분석할 것을 권장한다.

You should provide a description of the analytical procedures used during manufacturing to assess your manufacturing process and product quality. In your original IND submission, your descriptions should have sufficient detail, including a description of system suitability control, so that we can understand and evaluate the adequacy of your procedures. We recommend that you develop detailed SOPs for how your analytical procedures are conducted at early stages of product development as a part of your quality system. We acknowledge that, during product development, analytical methods may be modified to improve control and suitability. However, assay control is critical during all phases of clinical development to ensure product quality and safety and to allow for comparability studies, following manufacturing changes. When possible, we recommend trending assay performance to gain additional understanding of the method and method improvements during product development.

분석절차를 뒷받침하기 위해 제출하는 문서는 절차를 어떻게 수행하는지 상세히 기술하고, 사용할 표준품, 설비 및 대조물질을 명시하여야 한다. IND 에 분석절차 설명이 충분히 상세하다면 개별 SOP 나 제조기록 같은 정보의 제출은 일반적으로 필요하지 않다. 분석절차, 시험 감도, 특이성 및 대조물질에 대한 설명이 적절하다면 수탁 시험기관의 시험 보고서도 인정된다.

Documentation submitted in support of your analytical procedures should describe in detail how a procedure is performed and should specify any reference standards, equipment, and controls to be used. Submission of information, such as individual SOPs or batch records, will generally not be necessary, provided descriptions of your analytical procedures are sufficiently detailed in your IND. Contractor test reports are acceptable, provided there is adequate description of the analytical procedure, test sensitivity, specificity, and controls.

원료의약품의 안전성 시험에는 제품 품질을 보증하기 위해 바이오버든(또는 적절한 경우 무균), 마이코플라스마, 외래성 바이러스 인자 시험 같은 미생물 시험이 포함되어야 한다. 많은 안전성 시험의 지침 및/또는 절차는 다른 곳에 상세히 기술되어 있다(예: 바이오버든,⁹ 무균,¹⁰ 마이코플라스마(참고문헌 19), 외래성 인자 시험, 특정 병원체 시험(참고문헌 12)). 미국약전(USP), FDA 가이던스 또는 CFR 에 제시된 것과 다른 분석절차도 특이성, 감도, 완건성을 포함하여 시험방법에 관한 적절한 정보를 제공하면 IND 에서 인정될 수 있다. 살아 있는 세포에 필요할 수 있는 대체 방법의 예로는 신속 무균시험, 신속 마이코플라스마 시험(PCR 기반 시험 포함), 신속 엔도톡신 시험이 있다.

Safety testing on the DS should include microbiological testing, such as bioburden (or sterility, as appropriate), mycoplasma, and adventitious viral agent testing, to ensure product quality. Guidelines and/or procedures for many safety tests have been described in detail, elsewhere (e.g., bioburden,⁹ sterility,¹⁰ mycoplasma (Ref. 19), adventitious agent testing, and tests for specific pathogens (Ref. 12)). Analytical procedures different than those outlined in the United States Pharmacopeia (USP), FDA guidance, or CFR may be acceptable under an IND if you provide adequate information about your test method, including specificity, sensitivity, and robustness. Examples of alternative methods, which may be needed for live cells, include rapid sterility tests, rapid mycoplasma tests (including PCR-based tests), and rapid endotoxin tests.

이러한 비약전 시험은 의도한 용도에 적합함을 보증하기 위해 적격성 평가/밸리데이션을 할 것을 권장한다. 이 시험들에 관한 추가 의견은 이 가이던스 V.B.5.a항 「기준 및 시험방법(3.2.P.5.1)」에, 복제 가능 바이러스 및 야생형 종양용해 바이러스 시험에 관한 의견은 아래에 제시한다.

For these non-compendial tests we recommend that you qualify/validate them to ensure they are fit for their intended use. We provide some additional comments regarding these tests under section V.B.5.a., “Specifications (3.2.P.5.1),” of this guidance, as well as comments regarding replication competent virus and wild-type oncolytic virus testing, below.

비복제 유전자치료 바이러스 벡터는 낮은 빈도로 재조합하거나 모체형 또는 야생형(WT) 표현형으로 복귀할 가능성이 있으므로 특정 시험을 권장한다. 생산 중 생길 수 있는 복제 가능, 모체형 또는 야생형 바이러스(예: 복제 가능 아데노바이러스(RCA), 복제 가능 레트로바이러스(RCR))에 대한 시험은 제조공정의 적절한 단계에서 채취한 물질로 수행하여야 한다. 예를 들어 은행화된 물질에서 복제 가능 바이러스의 존재를 시험하고, 적절한 경우 원료의약품 또는 완제의약품의 공정 중 시험 또는 출하 시험 기준으로 둘 것을 권장한다(이 항 아래의 추가 세부사항과 예를 참조).

For non-replicating gene therapy viral vectors, we recommend specific testing, due to the potential for these vectors to recombine or revert to a parental or wild-type (WT) phenotype at a low frequency. Tests for replication-competent, parental, or wild-type viruses that may be generated during production (e.g., replication-competent adenovirus (RCA) and replication-competent retrovirus (RCR)) should be performed on material collected at the appropriate stage of the manufacturing process. For example, we recommend testing banked material for the presence of replication-competent viruses and as a specification for in-process or release testing of the DS or DP, as appropriate (please see further details and examples, below, within this section).

유전자치료에 쓰이는 레트로바이러스 기반 제품(렌티바이러스 및 포미바이러스 기반 제품 포함)은 대부분 복제 결손형으로 설계된다. RCR 이 없음을 보증하기 위해 레트로바이러스 벡터 생산 중 여러 시점에서 RCR 시험을 수행하여야 한다. 레트로바이러스 시험에 관한 추가 정보는 FDA 가이던스 「Testing of Retroviral Vector-Based Human Gene Therapy Products for Replication Competent Retrovirus During Product Manufacture and Patient Follow-up」(참고문헌 20)를 참조한다.

Most retroviral-based products (including lentivirus and foamy virus-based products) used for gene therapy applications are designed to be replication defective. To ensure the absence of RCR, you should perform testing for RCR at multiple points during production of a retroviral vector. For further information on retroviral testing, refer to “Testing of Retroviral Vector-Based Human Gene Therapy Products for Replication Competent Retrovirus During Product Manufacture and Patient Follow-up;” Guidance for Industry (Ref. 20).

유전자치료에 쓰이는 아데노바이러스 기반 제품은 대부분 복제 결손형으로 설계된다. 주목할 예외로 종양용해 아데노바이러스가 있다(이 가이던스 V.A.4.b.ii.D항 「야생형 종양용해 바이러스 시험」 참조). RCA 는 제조 중 바이러스 벡터 서열과 세포기질에 있는 바이러스 서열 사이의 상동 재조합 결과로 낮은 빈도로 생길 수 있다. 따라서 아데노바이러스 기반 유전자치료제는 MVB 의 RCA 적격성 평가를 하고, 각 생산 로트의 원료의약품 또는 완제의약품에 대해 RCA 를 시험할 것을 권장한다. 최대 수준은 바이러스 입자 3×10¹⁰ 개당 RCA 1 개를 권장한다.

Most adenoviral-based products used for gene therapy applications are designed to be replication defective. Notable exceptions include oncolytic adenoviruses (see section V.A.4.b.ii.D., “Wild-Type Oncolytic Virus Testing,” of this guidance). RCA may be generated at a low frequency as a result of homologous recombination between viral vector sequences and viral sequences present in the cell substrate during manufacturing. Therefore, for adenoviral-based gene therapy products, we recommend that you qualify your MVB for RCA and test either the DS or DP of each production lot for RCA. We recommend a maximum level of 1 RCA in 3×10¹⁰ viral particles.

AAV 벡터 조제물은 야생형 AAV 또는 유사 야생형 AAV 라고도 하는 헬퍼 바이러스 의존성 rcAAV 로 오염될 수 있다. 이 rcAAV 는 벡터에 있는 AAV 요소와 제조 중 존재하는 AAV rep 및 cap 서열 사이의 상동 또는 비상동 재조합으로 생긴다. 야생형 AAV 는 알려진 관련 병리가 없고 헬퍼 바이러스 없이는 복제할 수 없지만, 감염된 세포에서 cap 또는 rep 유전자가 발현되면 의도하지 않은 면역반응이 일어나 유효성이 떨어지고 의도하지 않은 안전성 위험이 생길 수 있다.

Preparations of AAV vectors can be contaminated with helper virus-dependent rcAAV, also referred to as wild-type AAV or pseudo wild-type AAV. These rcAAV are generated through homologous or non-homologous recombination events between AAV elements present on the vector and AAV rep and cap sequences that are present during manufacture. While wild-type AAV has no known associated pathology and cannot replicate without helper virus, expression of cap or rep genes in infected cells can result in unintended immune responses, which can reduce effectiveness and may have unintended safety risks.

따라서 헬퍼 바이러스가 있을 때 복제할 가능성이 있는 rcAAV 를 시험하고 그 결과를 IND 에 보고할 것을 권장한다. rcAAV 수준을 평가하는 방법은 여러 가지가 발표되어 있으며, 헬퍼 바이러스 존재 하의 AAV 증폭 후 rep/역위 말단 반복(ITR) 접합부에 대한 PCR, 벡터 조제물의 DNase 처리 후 rep 및 cap 서열에 대한 PCR 등이 있다. 이 가이던스에서는 rcAAV 측정을 위한 특정 방법을 권장하지 않는다. IND 에 시험방법과 시험 감도를 기술하여야 한다.

Therefore, we recommend that you test for rcAAV, which could potentially replicate in the presence of helper virus, and report these results in the IND. A number of methods have been published for evaluating the level of rcAAV, including amplification of AAV in the presence of helper virus, followed by PCR for rep/inverted terminal repeats (ITR) junctions, and PCR for rep and cap sequences, following DNase digestion of the vector preparation. We do not recommend a specific method for determining rcAAV in this guidance. You should describe your test method and assay sensitivity in the IND.

유전자치료에 쓰이는 종양용해 바이러스는 대부분 전이유전자를 지닐 뿐 아니라 암세포에서 선택적으로 증식하도록 모체 바이러스주로부터 약독화되거나 적응되어 있다. 이렇게 약독화되거나 적응된 바이러스는 제조 중 재조합하거나 모체형(또는 WT) 유전형으로 복귀할 수 있다. 따라서 제품에 모체 바이러스 서열이 있는지 판단하는 시험을 수행할 것을 권장한다. 또한 제품과 상동 재조합을 일으킬 수 있는 바이러스 서열을 지니지 않은 생산 세포를 선택할 것을 권장한다. 예를 들어 293 세포의 E1 서열과 상동 재조합할 가능성이 있으므로, E1 변형 종양용해 아데노바이러스 제조에 293 세포기질을 권장하지 않는다.

Most oncolytic viruses used in gene therapy applications not only carry transgenes but also have been attenuated or adapted from a parental virus strain to grow selectively in cancer cells. It may be possible for these attenuated or adapted viruses to either recombine or revert to a parental (or WT) genotype during manufacture. Therefore, we recommend that you conduct tests to determine whether the parental virus sequences are present in your product. In addition, we recommend that you select production cells that do not contain viral sequences that may allow homologous recombination with the product. For example, we do not recommend 293 cell substrates for the manufacture of E1-modified oncolytic adenoviruses due to the potential for homologous recombination with E1 sequences in the 293 cells.

1상 시험을 위한 최초 IND 제출에는 보통 분석절차 밸리데이션이 요구되지 않지만, 시험방법이 적절히 관리됨을 입증하여야 한다. 일반적으로 시험 성능에 대해 과학적으로 타당한 원칙을 적용하여야 한다(즉 시험은 특이적이고 감도가 있으며 재현 가능해야 하고, 적절한 대조물질 또는 표준물질을 포함하여야 한다). 적절한 경우 약전 방법을 사용하고, 임상시험 시작 전에 안전성 관련 시험의 적격성 평가를 할 것을 권장한다.

Validation of analytical procedures is usually not required for original IND submissions for Phase 1 studies; however, you should demonstrate that test methods are appropriately controlled. In general, scientifically sound principles for assay performance should be applied (i.e., tests should be specific, sensitive, and reproducible and include appropriate controls or standards). We recommend that you use compendial methods when appropriate and qualify safety-related tests prior to initiation of clinical trials.

유전자치료제의 안전성을 보증하기 위해, 임상시험 시작 전에 용량 결정에 쓰는 시험(예: qPCR 에 의한 벡터 유전체 역가, 형질도입 단위, 플라크 형성 단위, 형질도입 세포)의 적격성 평가도 하여야 한다. 최초 IND 제출에는 적격성 평가 계획서(예: 검체, 표준물질, 양성/음성 대조물질, 참조 로트, 그리고 작업자, 시약, 설비, 날짜처럼 평가한 관리 요소)에 대한 상세한 설명과 방법의 정확성, 재현성, 감도 및 특이성을 뒷받침하는 데이터를 제출하여야 한다. 또한 비임상 평가에 사용한 용량과 임상시험에 사용할 용량을 비교할 수 있는 능력도 안전성 보증에 매우 중요하다. 용량을 비교하는 한 가지 방법은 적격성 평가를 거친 같은 방법으로 비임상 로트와 임상 로트를 정량하는 것이다.

To ensure safety of gene therapy products, you should also qualify the assays used to determine dose (e.g., vector genome titer by qPCR, transducing units, plaque forming units, transduced cells) prior to initiating clinical studies. In your original IND submission, you should provide a detailed description of the qualification protocol (e.g., samples; standards; positive/negative controls; reference lots; and controls evaluated, such as operators, reagents, equipment, dates) and data supporting the accuracy, reproducibility, sensitivity, and specificity of the method. Also, critical to ensuring safety is the ability to compare the dose used for preclinical evaluations to the dose to be used for clinical studies. One way to compare doses is to use the same qualified method to quantitate preclinical and clinical lots.

적격성 평가를 거친 같은 방법을 사용할 수 없다면, 같은 적격성 평가 방법으로 임상 물질과 나란히 시험할 수 있도록 비임상 물질을 충분한 양 보관할 것을 권장한다. 또한 품목허가를 뒷받침하기 위해, 임상시험 시작 전에 용량 결정에 쓰는 시험을 밸리데이션하여야 한다.

If it is not possible to use the same qualified method, we recommend that you retain sufficient quantities of preclinical material to enable side by side testing with the clinical material, using the same qualified method. In addition, you should validate tests used to determine dose prior to initiating clinical studies to support licensure.

RCR 과 RCA 측정에 쓰는 시험도 개발 초기 단계에서 감도에 관한 FDA의 현행 권고를 충족하여야 한다(이 가이던스 V.A.4.b.ii.a.항의 RCR 시험 설명과 V.A.4.b.ii.b.항의 RCA 시험 설명 참조). 이러한 시험을 수행할 때 관련 양성 및 음성 대조물질을 포함하고, 시험 물질이 검출을 저해하는 효과가 있는지 평가하기 위해 시험 물질에 스파이킹한 양성 대조물질을 포함할 것을 권장한다.

Assays used to measure RCR and RCA should also meet our current recommendations for sensitivity at an early stage of development (see descriptions of RCR Testing in section V.A.4.b.ii.a. of this guidance, and RCA Testing in section V.A.4.b.ii.b. of this guidance). We recommend that you include relevant positive and negative controls when conducting these tests and include positive controls spiked in the test article to assess whether there are any inhibitory effects of the test article on detection.

모든 분석절차에 대해 제품 개발 전반에 걸쳐 시험 성능을 평가하고, 후기 단계 임상시험 시작 전에 밸리데이션 계획을 갖추며, BLA 제출 전에 밸리데이션을 완료할 것을 권장한다. 분석방법 밸리데이션에 관한 자세한 정보는 FDA 가이던스 「Q2B Validation of Analytical Procedures: Methodology」(참고문헌 21)를 참조한다.

For all analytical procedures, we recommend that you evaluate assay performance throughout product development, have a validation plan in place prior to initiating later phase clinical studies, and complete validation before BLA submission. For more information on validation of analytical methods, please see FDA’s Guidance for Industry: “Q2B Validation of Analytical Procedures: Methodology” (Ref. 21).

제조한 원료의약품 배치(또는 로트)의 시험 결과를 담은 표를 포함하여야 한다. 초기 단계 IND 의 경우 여기에는 독성시험 로트, 개발 배치, 엔지니어링 런 또는 임상용 등급 물질의 단일 제조 런이 포함될 수 있다. 임상 물질을 만들기 전에 새로운 임상 제조공정에 대한 충분한 경험을 쌓을 것을 권장한다. 이는 새로운 제조시설로 기술이전한 뒤, 개발 중 제조 변경이 있을 때, 그리고 여러 제조시설을 사용할 때 특히 중요하다. 서로 다른 방식으로 제조한 배치는 제출자료에서 명확히 구분하여야 한다는 점에 유의한다. 이러한 물질의 공정 개발에 관한 정보는 CTD 의 「제조공정 개발(3.2.S.2.6)」 항에 개략적으로 기술하여야 한다. 새 배치가 생산될 때마다 IND 의 이 항을 매년 갱신할 것을 권장한다.

You should include a table with test results for batches (or lots) of the DS that you have manufactured. For early stage INDs, this may include toxicology lots, developmental batches, engineering runs, or a single manufacturing run for clinical grade material. We recommend that you gain adequate experience with a new clinical manufacturing processes prior to making clinical material. This is especially critical following technology transfer to a new manufacturing facility, when manufacturing changes occur during development, and when multiple manufacturing facilities will be utilized. Please note that batches manufactured in different ways should be clearly identified in the submission. Information regarding process development of these materials should be outlined in the “Manufacturing Process Development (3.2.S.2.6)” section of the CTD. We recommend that you annually update this section of your IND as new batches are produced.

출하 기준을 충족하지 못한 배치와, 품질 조직 절차에 따라 그 부적합을 조사하기 위해 취한 조치를 밝혀야 한다(품질 조직에 관한 정보는 이 가이던스 V.C.1항 「부록 – 시설 및 설비(3.2.A.1)」 참조). 향후 시험법 개발, 밸리데이션 또는 비교동등성 시험에 사용할 수 있도록 생산 로트의 검체를 보관할 것을 권장한다.

You should indicate any batches that fail to meet release specifications and any action taken to investigate the failure according to your Quality Unit procedures (for Quality Unit information please see section V.C.1., “Appendices – Facilities and Equipment (3.2.A.1),” of this guidance). We recommend that you retain samples of production lots for use in future assay development, validation, or comparability studies.

IND 에 원료의약품 기준의 설정 근거를 제공하여야 한다. FDA는 허용기준이 제조 경험과 임상 경험을 바탕으로 제품 개발 단계 전반에 걸쳐 조정될 수 있음을 인정한다. 초기 단계 임상시험에서는 생산 로트의 특성분석에 쓰는 시험이 후기 단계 임상시험에서 쓰는 시험보다 변동이 클 수 있다.

You should provide justification for the DS specifications in your IND. We recognize that acceptance criteria may be adjusted throughout the product development stages, based on both manufacturing and clinical experience. For early stage clinical studies, assays used to characterize production lots may be more variable than those used in later phase investigations.

제품 유효성에 관한 의미 있는 데이터를 얻는 것이 주목적인 후기 단계 임상시험에서는, 배치가 잘 정의되고 일관되게 제조됨을 보증하도록 허용기준을 강화할 것을 권장한다.

For later stage investigational studies in which the primary objective is to gather meaningful data about product efficacy, we recommend that acceptance criteria be tightened to ensure batches are well-defined and consistently manufactured.

최초 IND 제출에 원료의약품 시험에 사용하는 표준품 또는 표준물질에 관한 정보를 제공하여야 한다. 각 표준품의 출처와 로트 번호, 사용기한, 시험성적서(있는 경우), 그리고/또는 내부 또는 외부에서 생성한 확인 및 순도 근거를 제공할 것을 권장한다.

You should provide information on the reference standards or reference materials used for testing the DS in your original IND submission. We recommend that you provide the source and lot number; expiration date; COAs, when available; and/or internally or externally generated evidence of identity and purity for each reference standard.

일반적으로 세 가지 유형의 표준품이 사용된다: 1) 인증 표준품(예: USP 약전 표준품), 2) 신뢰할 수 있는 상업적 공급처에서 구입한 상업용 표준품, 그리고/또는 3) 분석 실험실 또는 기타 비상업적 시설에서 맞춤 합성한, 순도가 문서화된 기타 물질. 경우에 따라 시험의 표준물질은 잘 특성분석된 유전자치료제 로트 그 자체가 된다. 이 경우 표준물질로 쓸 수 있도록 충분한 양의 물질(예: 생산 로트의 일부)을 확보하여 유지할 것을 권장한다.

Three types of reference standards are generally used: 1) certified reference standards (e.g., USP compendial standards); 2) commercially supplied reference standards obtained from a reputable commercial source; and/or 3) other materials of documented purity, custom-synthesized by an analytical laboratory or other noncommercial establishment. In some cases, the reference material for an assay will be a well-characterized lot of the gene therapy product, itself. In this case, we recommend that you reserve and maintain a sufficient amount of material (e.g., part of a production lot) to serve as a reference material.

표준품의 안정성을 평가하는 계획서를 갖추고, 새 표준물질의 생산을 충분히 앞서 계획하여야 한다. 제품 개발 중 필요에 따라 새 표준물질로 연결(bridging)할 수 있도록 충분한 물질을 보관하는 것도 매우 중요하다.

You should have a protocol to evaluate the stability of the reference standard and plan well in advance for production of a new reference material. It is also critical to retain sufficient material to bridge to a new reference material as needed during product development.

최초 IND 제출에 원료의약품에 사용하는 용기와 마개의 유형을, 용기마개 시스템을 구성하는 재질의 확인을 포함하여 기술하여야 한다. 용기와 마개가 원료의약품과 적합한지 확인할 것을 권장한다. 최초 IND 제출의 경우 유전자치료제와의 적합성은 안정성시험 중에 평가하거나, 유사 제품을 사용한 과거 데이터와 경험에 근거할 수 있다. 이 가이던스 III항 「행정 정보」에 기술된 대로, 용기가 승인 또는 허가(cleared)된 의료기기인지, 그리고/또는 해당 정보가 마스터 파일을 상호 참조하는지 밝혀야 한다.

You should describe the type(s) of container and closure used for the DS in your original IND submission, including the identity of materials used in the construction of the container closure system. We recommend that you determine whether the containers and closures are compatible with the DS. For an original IND submission, compatibility with a gene therapy product may be evaluated during stability studies or may be based on historical data and experience, using similar products. You should indicate whether the container is an approved or cleared device and/or the information is cross-referenced to a master file, as described in section III., “Administrative Information,” of this guidance.

최초 IND 제출에 원료의약품이 허용 한도 안에 있음을 입증하기 위한 안정성시험의 유형(수행했거나 계획 중인 것)을 기술할 것을 권장한다. 계획서에는 보관 용기, 제형, 보관 조건, 시험 주기, 기준(즉 시험방법과 허용기준)을 기술하여야 한다. 안정성시험은 제품 개발에 따라 달라질 수 있으며, 원료의약품을 곧바로 완제의약품으로 가공하는 경우에는 장기 원료의약품 안정성 데이터가 필요하지 않을 수 있다는 점에 유의한다.

We recommend that you describe in your original IND submission the types of stability studies (either conducted or planned) to demonstrate that the DS is within acceptable limits. The protocol should describe the storage container, formulation, storage conditions, testing frequency, and specifications (i.e., test methodologies and acceptance criteria). Please note that stability studies may evolve with product development, and if the DS is immediately processed into a DP, long term DS stability data may not be needed.

안정성 분석에는 제품의 무균(또는 용기 완전성), 확인, 순도, 품질, 활성 또는 역가 측정이 포함될 수 있다. 안정성 분석에 사용한 시험방법과 허용기준의 근거를 제공할 것을 권장한다. 안정성 분석의 시험방법 가운데 적어도 하나 이상이 안정성 지시(stability-indicating) 시험임을 입증하면 도움이 되는 경우가 많다. 가혹 분해 시험, 가속 안정성시험 또는 제품 열화를 보여 주는 다른 유형의 실험 시스템으로 시험이 안정성 지시 시험임을 입증할 수 있다.

Your stability analysis may include measures of product sterility (or container integrity), identity, purity, quality, and activity or potency. We recommend that you provide justification for the test methods and acceptance criteria used in the stability analysis. It is often helpful to demonstrate that at least one or more of the test methods in your stability analysis are stability-indicating. You may demonstrate a test is stability-indicating using forced degradation studies, accelerated stability studies, or another type of experimental system that demonstrates product deterioration.

안정성시험 설계에 도움이 되는 정보는 다음 가이던스 문서에서 볼 수 있다: FDA 가이드라인 「Quality of Biotechnological Products: Stability Testing of Biotechnological/Biological Products」(참고문헌 22), FDA 가이던스 「Q1A(R2) Stability Testing of New Drug Substances and Products」(참고문헌 23), FDA 가이던스 「Q1E Evaluation of Stability Data」(참고문헌 24).

Information to help you design your stability studies may be found in the following guidance documents: FDA’s Guideline for Industry: “Quality of Biotechnological Products: Stability Testing of Biotechnological/Biological Products” (Ref. 22); FDA’s Guidance for Industry: “Q1A(R2) Stability Testing of New Drug Substances and Products” (Ref. 23); and FDA’s Guidance for Industry: “Q1E Evaluation of Stability Data” (Ref. 24).

IND 에 허가 후 안정성시험 계획서와 안정성 이행 약속을 제출할 것을 권장하지 않는다. 다만 제품 개발이 진행되면서 사용기한을 정하는 데 어떤 안정성시험이 필요할지 고려할 수 있다. 이러한 사항은 후기 단계 IND 회의에서 논의할 것을 권장한다.

We do not recommend that you provide a post-approval stability protocol and stability commitment in the IND. However, as you progress with product development, you may want to consider which stability studies would be required to determine an expiry date. We recommend the discussion of these items at your late phase IND meetings.

IND 에 안정성시험 결과를 제출하고 이 정보를 정기적으로(예: 연차 보고) 갱신할 것을 권장한다. 안정성 데이터를 생성하는 데 사용한 분석절차의 적격성 평가에 관한 정보를 최초 IND 제출에 포함하여야 한다. 추가 정보는 이 가이던스 V.A.4.C.항, 예: 「분석절차 밸리데이션(3.2.S.4.3)」을 참조한다.

We recommend that you provide the results of your stability studies in your IND and update this information on a regular basis (e.g., annual reports). Information on the qualification of analytical procedures used to generate stability data should be included in your original IND submission. For additional information see section V.A.4.C., e.g. “Validation of Analytical Procedures (3.2.S.4.3),” of this guidance.

완제의약품과 그 조성에 대한 설명을 제공하여야 한다(21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(b)). 여기에는 제형에 대한 설명과 모든 구성성분(유효성분 및 비활성 성분)의 목록, 단위당 양, 기능, 그리고 각 구성성분의 품질 기준(예: 약전 각조 또는 제조업자의 기준)에 대한 참조가 포함된다.

You should provide a description of the DP and its composition (21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(b)). This includes a description of the dosage form and a list of all of its components (active and inactive), the amount on a per unit basis, the function, and a reference to quality standards for each component (e.g., compendial monograph or manufacturers’ specifications).

의약품이나 의료기기를 유전자치료제와 함께 복합제품으로 사용할 경우, FDA 「eCTD Technical Conformance Guide: Technical Specifications Document」(참고문헌 4)에 기술된 대로 의약품 또는 의료기기의 품질 정보를 CTD 3.2.P 항에 포함하고 CTD 3.2.R 항으로 적절히 하이퍼링크할 것을 권장한다. 임상시험에서 위약 투여를 사용한다면 위약에 대한 별도의 완제의약품 항을 제공하여야 한다. 또한 해당하는 경우, 함께 제공되는 재구성용 희석액에 대한 설명과, 제형 및 함께 제공되는 재구성용 희석액에 사용하는 용기와 마개에 대한 설명을 별도의 완제의약품 항에 제공하여야 한다.

If a drug or device will be used with your gene therapy as a combination product, we recommend that quality information for the drug or device be included in section 3.2.P of the CTD with appropriate hyperlinks to section 3.2.R of the CTD, as described in FDA’s “eCTD Technical Conformance Guide: Technical Specifications Document” (Ref. 4). If a placebo treatment is used in the clinical trial, a separate DP section should be provided for the placebo. In addition, you should provide a description of any accompanying reconstitution diluents and a description of the container and closure used for the dosage form and accompanying reconstitution diluent in a separate DP section, if applicable.

제제 개발 항에는 제품 제형, 제조공정, 용기마개 시스템, 미생물학적 특성 및 사용 설명이 임상 개발 단계에 적절함을 확립하기 위해 수행한 개발 연구에 관한 정보를 담아야 한다. 여기에 기술하는 연구는 기준에 따라 수행하는 일상적인 관리 시험과 구별된다. 또한 이 항에서는 배치 재현성, 제품 성능 및 완제의약품 품질에 영향을 줄 수 있는 제형 및 공정 특성(핵심 변수)을 확인하고 기술하여야 한다. FDA는 개발 초기 단계에서는 이 정보가 제한적일 수 있음을 인정하며, 의뢰자가 제품 개발이 진행됨에 따라 추가 정보와 갱신 내용을 제출할 것을 권장한다. 특정 연구나 발표된 문헌의 뒷받침 데이터와 결과는 제제 개발 항 안에 넣거나 첨부할 수 있다. 추가 뒷받침 데이터는 신청서의 관련 비임상 또는 임상 항을 참조하도록 할 수 있다.

The Pharmaceutical Development section should contain information on the development studies conducted to establish that product formulation, manufacturing process, container closure system, microbiological attributes, and instructions for use are appropriate for the stage of clinical development. The studies described here are distinguished from routine control tests conducted, according to specifications. Additionally, this section should identify and describe the formulation and process attributes (critical parameters) that can influence batch reproducibility, product performance, and DP quality. The Agency acknowledges that this information may be limited in the early phases of development and recommends that sponsors provide additional information and updates as product development proceeds. Supportive data and results from specific studies or published literature can be included within or attached to the Pharmaceutical Development section. Additional supportive data can be referenced to the relevant nonclinical or clinical sections of the application.

CTD 의 「완제의약품 설명 및 조성(3.2.P.1)」 항에 열거한 구성성분과 원료의약품의 적합성, 그리고 완제의약품의 성능에 영향을 줄 수 있는 원료의약품의 주요 특성(예: 농도, 생존율, 응집 상태, 바이러스 감염성)을 기술하여야 한다.

You should describe the compatibility of the DS with the components listed in the “Description and Composition of the Drug Product (3.2.P.1)” section of the CTD and the key characteristics of the DS (e.g., concentration, viability, aggregation state, viral infectivity) that can influence the performance of the DP.

최초 IND 제출에 CTD 의 「완제의약품 설명 및 조성(3.2.P.1)」 항에 열거한 완제의약품의 첨가제와 비활성 구성성분의 선택, 그 농도, 그리고 완제의약품 성능에 영향을 줄 수 있는 이들 첨가제의 특성을 기술하여야 한다.

You should describe in your original IND submission the choice of excipients and inactive components of the DP listed in the “Description and Composition of the Drug Product (3.2.P.1)” section of the CTD, their concentration, and the characteristics of these excipients that can influence DP performance.

IND 에서 제안한 투여 경로와 사용 방법을 고려하여 완제의약품 제형의 개발을 간략히 기술하여야 한다.

You should briefly describe the development of the DP formulation, taking into consideration the proposed route of administration and usage in your IND.

임상 또는 비임상 시험에 사용한 다른 제형이 있으면 이를 기술하고, 해당하는 경우 그 시험에 대한 참조를 제공할 것을 권장한다. 안정성, 의료기기 적합성 또는 안전성 우려 때문에 제형 변경이 필요했다면 그 정보를 여기에 보고할 수 있다.

We recommend that you describe any other formulations that have been used in clinical or preclinical studies and provide a reference to such studies, if applicable. If formulation changes were needed for stability, device compatibility, or safety concerns, this information can be reported here.

IND 에는 제조 중 또는 제품 유효기간 동안의 분해를 보상하거나 유효기간을 늘리기 위해 제형화 과정에서 표시량을 넘는 유전자치료제를 추가하는지 기술하여야 한다. 과량 투입은 투여 용량이 일관되지 않게 될 수 있으므로 일반적으로 권장하지 않으며, FDA 가이던스 「Q8(R2) Pharmaceutical Development」(참고문헌 6)에 기술된 대로 과량 투입의 근거를 제공할 것을 권장한다.

In your IND, you should describe whether gene therapy product in excess of your label claim is added during formulation to compensate for degradation during manufacture or a product’s shelf life or to extend shelf life. We generally do not recommend the use of overages as this can result in inconsistent dosing, and we recommend that you provide justification for an overage, as described in FDA’s Guidance for Industry: “Q8(R2) Pharmaceutical Development” (Ref. 6).

IND 에는 완제의약품의 성능과 관련된 변수를 기술하여야 한다(적절한 경우 관련 원료의약품 항을 참조할 수 있다). 이러한 변수에는 제품의 물리화학적 또는 생물학적 특성(예: 투여 단위, 유전형 또는 표현형 변이, 입자 수와 크기, 응집 상태, 감염성, 비활성(감염성 입자 대 비감염성 입자, 또는 충전 입자 대 빈 입자의 비율), 생물학적 활성 또는 역가, 그리고/또는 면역학적 활성)이 포함된다. 이러한 CQA 와 그것이 제품 성능에 미치는 영향은 대개 제품 개발 과정에서 이해되며(이 가이던스 IV.A항 「일반 정보」 참조), IND 제출 시점에는 충분히 이해되지 않을 수 있다.

In your IND you should describe the parameters relevant to the performance of the DP, (or reference relevant DS sections, if appropriate). These parameters include physicochemical or biological properties of the product (e.g., dosing units, genotypic or phenotypic variation, particle number and size, aggregation state, infectivity, specific activity (ratio of infectious to non-infectious particles or full to empty particles), biological activity or potency, and/or immunological activity). Understanding these CQAs and how they affect product performance usually occurs over the course of product development (see section IV.A., “General Information,” of this guidance) and may not be fully understood at the time the IND is submitted.

제제 개발의 원칙과 임상 연구 단계에서 CQA 설정 시 고려사항에 관한 자세한 정보는 FDA 가이던스 「Q8(R2) Pharmaceutical Development」(참고문헌 6)에서 볼 수 있다.

More information on the principles of pharmaceutical development and consideration in establishing CQAs during the clinical research phase can be found in FDA’s Guidance for Industry: “Q8(R2) Pharmaceutical Development” (Ref. 6).

개발 중 CQA 를 더 잘 이해하게 되면 제품의 물리화학적 및 생물학적 특성에 관한 이 항을 갱신하여야 한다.

You should update this section on the physiochemical and biological properties of your product as you gain a better understanding of the CQAs, during development.

개발 연구를 수행했다면 완제의약품 제조공정(CTD 의 「제조공정 및 공정 관리에 대한 설명(3.2.P.3.3)」 항에 기술)의 선정과 최적화를 기술하여야 한다. FDA는 개발 초기 단계에서는 이 정보가 제한적일 수 있음을 인정하며, 의뢰자가 제품 개발이 진행됨에 따라 추가 정보와 갱신 내용을 제출할 것을 권장한다.

You should describe the selection and optimization of the DP manufacturing process (described in the “Description of Manufacturing Process and Process Controls (3.2.P.3.3)” section of the CTD) if development studies have been performed. The Agency acknowledges that this information may be limited in the early phases of development and recommends that sponsors provide additional information and updates as product development proceeds.

CTD 의 「용기마개 시스템(3.2.P.7)」 항에 기술한 용기마개 시스템이 완제의약품의 보관, 수송(운송) 및 사용에 적합한지 기술하여야 한다.

You should describe the suitability of the container closure system, which you have described in the “Container Closure System (3.2.P.7)” section of the CTD, for the storage, transportation (shipping), and use of the DP.

재질 선택, 습기·기체·빛으로부터의 보호, 제형과의 적합성(용기 흡착과 용출 포함), 재질의 안전성, 그리고 성능을 고려할 것을 권장한다. 용기마개 시스템에 관한 자세한 정보는 FDA 가이던스 「Container Closure Systems for Packaging Human Drugs and Biologics」(참고문헌 25)를 참조한다.

We recommend that you consider choice of materials, protection from moisture, gases, and light, compatibility with the formulation (including adsorption to the container and leaching), safety of materials, and performance. For more information on container closure systems, refer to FDA’s Guidance for Industry: “Container Closure Systems for Packaging Human Drugs and Biologics” (Ref. 25).

용기마개 시스템을 선택할 때 제품 로트의 최종 제품 출하 시험을 어떻게 할지도 고려할 것을 권장한다. 소규모 로트로 제조하는 유전자치료제(예: 자가 세포 제품 또는 매우 높은 용량 수준으로 바이알에 충전하는 제품)의 경우, 로트 출하 시험에 최종 용기 하나 또는 여러 바이알을 할애하기가 어렵거나 불가능할 수 있다. 이 경우 출하 시험을 위해 검체를 채취할 수 있는 최종 용기를 고려하거나, 최종 용기 시험의 대안을 고려할 것을 권장한다.

In the selection of your container closure system, we also recommend that you consider how lots of your product will be tested for final product release. For gene therapy products that are manufactured in small lot sizes (e.g., autologous cell products or products vialed at very high dose levels), it may be challenging or not possible to dedicate a final container or multiple vials for lot release testing. In this case, we recommend that you consider a final container that can be sampled for release testing or that you consider alternatives to final container testing.

무균 제품으로 의도된 제품의 경우, 무균 공정을 보증하기 위해 취한 조치를 상세히 제공하고, 최종 제품 미생물 시험을 기술하며, 미생물 오염을 방지하는 용기마개 시스템의 완전성을 어떻게 평가할지 다룰 것을 권장한다.

We recommend, for products intended to be sterile, that you provide details on measures taken to ensure aseptic processing, describe the final product microbial testing, and address how the integrity of the container closure system to prevent microbial contamination will be assessed.

적절한 경우 재구성에 쓰는 희석액 또는 투여 기구와 완제의약품의 적합성을 논의하여야 한다.

You should discuss the compatibility of the DP with the diluent used for reconstitution or the delivery device, as appropriate.

적합성 시험에는 제품의 양과 제품 활성을 모두 측정하는 항목(예: 바이러스 벡터의 경우 흡착과 불활화를 모두 평가하기 위한 물리적 입자 및 감염성(또는 역가) 측정)을 포함할 것을 권장한다. 이러한 사용 중 및 기구 내 안정성 데이터는 환자 투여를 위해 임상시험계획서에 제시한 권장 보관 시간과 조건을 뒷받침하여야 한다. 사용 중 및 기구 내 안정성과 그것이 제품 성능에 미칠 수 있는 영향을 이해하지 못하면, 임상시험 투여에 따르는 위험을 정당화하지 못할 수 있다. 따라서 완제의약품의 적합성과 제품 조제 및 투여의 마지막 단계를 신중히 관리하고 평가할 것을 권장한다.

We recommend that compatibility studies include measures of both product quantity and product activity (e.g., for viral vectors, a measure of physical particles and infectivity (or potency) to assess both adsorption and inactivation). These in-use and in-device stability data should support recommended hold times and conditions outlined in the clinical protocol for patient administration. The absence of an understanding of in-use and in-device stability, and the potential impacts on product performance, may not justify risks associated with clinical study treatment(s). Therefore, we recommend that you carefully control and assess DP compatibility and the final steps of product preparation and administration.

완제의약품의 제조와 시험에 관여하는 수탁 제조업자를 포함한 각 제조업자의 이름, 주소 및 책임을 제공하여야 한다.

You should provide the name, address, and responsibility of each manufacturer, including contractor manufacturer(s), involved in the manufacture and testing of the DP.

유전자치료제-의료기기 복합제품의 경우, FDA 「eCTD Technical Conformance Guide: Technical Specifications Document」(참고문헌 4)에 기술된 대로 의료기기 구성품의 제조시설을 열거하고 각 장소에서 이루어지는 조립 및 시험 공정을 기술할 것을 권장한다. 또한 시설이 복합제품 간소화 제조 접근법(FDA 가이던스 「Current Good Manufacturing Practice Requirements for Combination Products」(참고문헌 26)에 기술)을 따르는지 밝히고, 적용하는 구체적인 규정(즉 21 CFR 211 또는 820)을 밝혀야 한다.

For gene therapy-device combination products, we recommend that you list the manufacturing facilities for the device components and describe the assembly and testing processes taking place at each site, as described in FDA’s “eCTD Technical Conformance Guide: Technical Specifications Document” (Ref. 4). You should also identify whether facilities follow the combination product streamlined manufacturing approach (as described in FDA’s Guidance for Industry and FDA Staff: “Current Good Manufacturing Practice Requirements for Combination Products” (Ref. 26)) and identify the specific set of regulations (i.e., 21 CFR Part 211 or Part 820).

제형의 모든 구성성분 목록, 배치당 양, 그리고 그 품질 기준에 대한 참조를 포함한 배치 조성을 제공하여야 한다.

You should provide a batch formula that includes a list of all components of the dosage form, their amounts on a per-batch basis, and a reference to their quality standards.

완제의약품 제조공정을 상세히 기술하고 공정 관리와 공정 중 시험을 밝혀야 한다. 설명에는 공정 흐름도와 서술형 설명뿐 아니라 포장, 제품 접촉 자재 및 사용 설비도 포함하여야 한다. 이 공정에는 최종 제형화, 여과, 충전 및 동결 같은 제조 단계와 공정 관리가 포함될 수 있다. 특정 조건에서는 무균 여과의 반복(해당하는 경우)이 중요할 수 있다. 각 재가공 절차의 조건과 근거를 명확히 기술하고(21 CFR 211.115), 재가공 로트와 정상 생산 로트 사이의 제품 일관성을 입증할 것을 권장한다.

You should provide a detailed description of the DP manufacturing process and identify process controls and intermediate tests. Your description should include both flow diagram(s) and narrative description(s) as well as packaging, product contact materials, and equipment used. This process can include manufacturing steps, such as final formulation, filtration, filling and freezing, and process controls. Under certain conditions, repeating sterile filtration (if applicable) may be critical. We recommend that you clearly describe the conditions and justifications for each reprocessing procedure (21 CFR 211.115) and demonstrate product consistency between reprocessed lots and normal production lots.

제조 직후 투여하는 생체외 유전자 변형 세포의 경우, 완제의약품 출하를 위해 공정 중 무균시험(최종 회수 48~72시간 전에 채취한 검체)에서 음성 결과를 얻을 것을 권장한다. 추가 권고는 이 가이던스 V.B.2.e항 「미생물학적 특성(3.2.P.2.5)」에 있다.

For ex vivo genetically modified cells that are administered immediately after manufacturing, we recommend a negative test result from an in-process sterility test (on a sample taken 48 to 72 hours prior to final harvest) for release of the DP. Additional recommendations are made in section V.B.2.e., “Microbiological Attributes (3.2.P.2.5),” of this guidance.

제조공정의 중요 단계와 중간체 관리를 기술하여야 한다. 중요 단계에는 관리를 보증하기 위해 CTD 의 「제조공정 및 공정 관리에 대한 설명(3.2.P.3.3)」 항에 개략적으로 기술한 단계와, 허용기준이 있는 시험을 수행하는 단계를 포함하여야 한다. 이러한 시험에 설정한 허용기준 또는 한도의 근거를 제공할 것을 권장한다. 또한 제조공정 중간체의 품질과 관리에 관한 정보를 제공하여야 한다. 제조 중간체는 제조업자가 정의하며, 수집 단계 또는 보관 단계의 물질을 포함할 수 있다. FDA는 개발 초기 단계에서는 이 정보가 제한적일 수 있음을 인정하며, 의뢰자가 적절한 단계에서 이 정보를 제출할 것을 권장한다.

You should describe the control of critical steps and intermediates in the manufacturing process. Critical steps should include those outlined in the “Description of Manufacturing Process and Process Controls (3.2.P.3.3)” section of the CTD to ensure control as well as steps in which tests with acceptance criteria are performed. We recommend that you provide justification for acceptance criteria or limits set for these tests. In addition, you should provide information on the quality and control of intermediates of the manufacturing process. Manufacturing intermediates are defined by the manufacturer and may include material from collection steps or hold steps. The Agency acknowledges that this information may be limited in the early phases of development and recommends that sponsors provide this information at the appropriate stage.

초기 단계 제조에는 공정 밸리데이션이 요구되지 않으므로, 대부분의 최초 IND 제출에는 이 정보가 포함되지 않는다. 다만 초기 단계 IND 에도 오염, 교차오염 및 제품 혼동을 방지하는 데 사용하는 방법에 관한 정보를 포함할 것을 권장한다. IND 하에서 품질 조직의 기능에 관한 자세한 정보는 이 가이던스 V.A.2.e항 「공정 밸리데이션 및/또는 평가(3.2.S.2.5)」를 참조한다.

Process validation is not required for early stage manufacturing, and thus, most original IND submissions will not include this information. However, we do recommend that early stage INDs have information on methods used to prevent contamination, cross-contamination, and product mix-ups. For more information on functions of the Quality Unit under an IND, please see section V.A.2.e., “Process Validation and/or Evaluation (3.2.S.2.5),” of this guidance.

CTD 의 「첨가제(3.2.P.2.1.2)」 항에 열거한 모든 첨가제의 기준을 제공하여야 한다. 이 가이던스에서 첨가제란 유효성분 이외의 구성성분으로서 최종 제품의 일부가 되도록 의도된 것(예: 사람 혈청알부민, 디메틸설폭사이드(DMSO))을 말한다. 첨가제가 약전 품목이면 CTD 의 「기준 및 시험방법(3.2.P.4.1)」 항의 정보가 필요하지 않을 수 있다.

You should provide specifications for all excipients listed in “Excipients (3.2.P.2.1.2)” section of the CTD. For purpose of this guidance, an excipient is any component, other than to the active ingredient, that is intended to be part of the final product (e.g., human serum albumin, Dimethyl Sulfoxide (DMSO)). If the excipient is compendial, information in the “Specifications (3.2.P.4.1)” section of the CTD may not be required.

첨가제 시험을 위한 분석절차를 기술하여야 한다. 약전 첨가제에 대해 추가 시험 또는 적격성 평가를 수행한다면 그 시험을 여기에 기술하여야 한다.

You should describe your analytical procedures for testing excipients. If you are performing any additional testing or qualification of compendial excipients, you should describe that testing here.

최초 IND 제출에는 보통 분석절차 밸리데이션이 요구되지 않는다. 첨가제 시험에 사용하는 분석절차에 대해 확보한 밸리데이션 또는 검증 정보가 있으면 제공할 것을 권장한다.

Validation of analytical procedures is usually not required for original IND submissions. We recommend that you provide any available validation or verification information for the analytical procedures used to test excipients.

적절한 경우 제안한 첨가제 기준의 설정 근거를 제공하여야 한다.

You should provide justification for the proposed excipient specifications, as appropriate.

사람 또는 동물 유래 첨가제의 경우 출처, 기준, 수행한 시험에 대한 설명, 바이러스 안전성 데이터에 관한 정보를 제공하여야 한다. 구할 수 있는 경우 FDA 허가를 받은 첨가제(예: 사람 혈청알부민)를 사용하여야 한다. 사람 혈청을 사용한다면 공여자 적합성과 적절한 감염병 검사를 문서화한 정보를 제출할 것을 권장한다. 채혈은 허가받은 혈액원이 수행하고, 검사는 21 CFR 640 에 기술된 요건을 충족하도록 하여야 한다.

For excipients of human or animal origin, you should provide information regarding source, specifications, description of testing performed, and viral safety data. FDA-licensed excipients (e.g., human serum albumin) should be used, when available. If human serum is used, we recommend that you submit information documenting donor suitability as well as appropriate infectious disease testing. You should ensure that collection is performed by a licensed blood bank and that testing meets the requirements described in 21 CFR Part 640.

완제의약품에 처음 사용하거나 해당 투여 경로에 처음 사용하는 첨가제의 경우, 제조, 특성분석 및 관리의 모든 세부 사항을 제공하고, 가능하면 FDA에 제출된 규제 파일 안의 뒷받침 안전성 데이터(비임상 및/또는 임상)를 상호 참조하여야 한다.

For excipients used for the first time in a DP or used for the first time in a route of administration, you should provide full details of manufacture, characterization, and controls, with cross-references to supporting safety data (nonclinical and/or clinical) in a regulatory file submitted to FDA, if available.

최초 IND 제출에 완제의약품 기준을 열거하여야 한다. 시험 계획은 완제의약품이 확인, 함량(역가), 품질 및 순도의 허용 한도를 충족함을 보증하는 데 필요한 완제의약품의 물리적, 화학적 또는 생물학적 특성을 기술하기에 적절하여야 한다(21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(b)). 기준에 부적합한 제품 로트는 FDA 승인 없이 임상시험에 사용해서는 안 된다. 초기 단계 임상시험의 경우 제품의 안전성(외래 물질, 외래성 인자 및 미생물 오염이 없음을 보증하는 시험 포함)과 용량(예: 벡터 유전체, 벡터 입자 또는 유전자 변형 세포)을 평가하는 시험을 갖출 것을 권장한다. 안전성 시험과 제품 용량 측정에 관한 추가 정보는 이 가이던스 V.A.4.a항 「기준 및 시험방법(3.2.S.4.1)」에 기술되어 있다.

You should list DP specifications in your original IND submission. Your testing plan should be adequate to describe the physical, chemical, or biological characteristics of the DP necessary to ensure that the DP meets acceptable limits for identity, strength (potency), quality, and purity (21 CFR 312.23(a)(7)(iv)(b)). Product lots that fail to meet specifications should not be used in your clinical investigation without FDA approval. For early phase clinical studies, we recommend that assays be in place to assess safety (which includes tests to ensure freedom from extraneous material, adventitious agents, and microbial contamination) and dose (e.g., vector genomes, vector particles, or genetically modified cells) of the product. Additional information on safety testing and measuring product dose is described in section V.A.4.a., “Specification (3.2.S.4.1),” of this guidance.

제품 출하 시험은 필요하고 적절한 제조 단계에서 수행할 것을 권장한다. 예를 들어 이 가이던스 V.A.4.a항 「기준 및 시험방법(3.2.S.4.1)」에서 논의한 대로, 마이코플라스마 및 외래성 인자 출하 시험은 세포 배양 회수 물질로 수행할 것을 권장한다. 또한 미생물 오염이 없음을 보증하거나 완제의약품 최종 제조 단계(예: 완충액 교환, 희석, 또는 완제·충전 단계)에서 발생했을 수 있는 제품 혼동을 검출하기 위해, 무균, 엔도톡신 및 확인 시험을 최종 용기 제품으로 수행할 것을 권장한다. 완제의약품 기준은 IND 하의 제품 개발의 일부로서 더 다듬어야 한다. 의뢰자는 임상 개발이 진행됨에 따라 제조 경험에 근거하여 허용기준을 설정하거나, 경우에 따라 강화할 것을 권장한다.

We recommend that product release assays be performed at the manufacturing step at which they are necessary and appropriate. For example, mycoplasma and adventitious agents release testing is recommended on cell culture harvest material, as discussed in section V.A.4.a., “Specification (3.2.S.4.1),” of this guidance. In addition, sterility, endotoxin, and identity testing are recommended on the final container product to ensure absence of microbial contamination or to detect product mix-ups that might have occurred during the final DP manufacturing steps (e.g., buffer exchange, dilution, or finish and fill steps). DP specifications should be further refined as a part of product development under an IND. We recommend that sponsors establish or, in some cases, tighten acceptance criteria, based on manufacturing experience as clinical development proceeds.

적절한 경우 안전하고 유효한 것으로 확인된 임상 로트에 근거하여 허용기준을 설정하여야 한다. 또한 의뢰자는 제품 역가를 평가하는 시험을 개발하고, 품목허가를 위한 제품 유효성을 뒷받침하는 임상시험을 시작하기 전에 이 시험을 갖출 것을 권장한다. 품목허가를 위해서는 제품의 안전성과 유효성을 보증하는 완전한 기준 세트에 21 CFR 610 에 제시된 일반 생물의약품 기준이 포함되어야 한다.

Acceptance criteria should also be established, based on clinical lots shown to be safe and effective, when appropriate. We also recommend that sponsors develop testing to assess product potency and have this assay in place prior to initiating studies used to support product efficacy for licensure. For licensure, a complete set of specifications to ensure the safety and effectiveness of the product must include the general biological products standards, as outlined in 21 CFR Part 610.

완제의약품 시험에 사용하는 분석절차를 기술하여야 한다. 분석절차가 원료의약품의 것과 같다면, 완제의약품이 시험 성능에 매트릭스 효과를 주지 않는 한 이 정보를 반복할 필요가 없다. 이 정보를 찾을 수 있는 IND 의 해당 항(예: CTD 의 원료의약품 「분석절차(3.2.S.4.2)」 항)을 참조한다. 이러한 시험에 관해 다음과 같은 추가 의견이 있다.

You should describe the analytical procedures used for testing the DP. If the analytical procedures are the same as those for the DS, you do not need to repeat this information unless there is a matrix effect from the DP on assay performance. Please reference the appropriate section of your IND, where this information can be found (e.g., Drug Substance “Analytical Procedures (3.2.S.4.2)” section of the CTD. We have the following additional comments regarding these tests:

FDA는 약전 무균시험(USP <71>, 610.12)이 모든 제품(예: 유효기간이 짧은 제품)에 적합하지는 않을 수 있음을 인정한다. 이 가이던스 V.A.4.b항 「분석절차(3.2.S.4.2)」에서 언급한 대로, 신선한 상태로 투여하거나 최종 제형화와 환자 투여 사이의 보관 시간이 짧은 생체외 유전자 변형 세포에는 신속 무균시험이 허용될 수 있다.

We recognize that the compendial sterility tests (USP <71>; 610.12) may not be suitable for all products (e.g., those with limited shelf life). As mentioned in section V.A.4.b., “Analytical Procedures (3.2.S.4.2),” of this guidance, rapid sterility tests may be acceptable for ex vivo genetically modified cells administered fresh or with limited hold time between final formulation and patient administration.

제조 직후 투여하는 생체외 유전자 변형 세포의 경우, 제품 출하를 위해 최종 회수 48~72시간 전에 채취한 검체로 공정 중 무균시험을 할 것을 권장한다. 이러한 제품의 경우 공정 중 무균시험 외에도, 의뢰자가 최종 제형화 제품에 그람 염색 같은 신속 미생물 검출 시험을, 그리고 최종 제형화 제품에 21 CFR 610.12 에 맞는 무균시험을 수행할 것을 권장한다.

For ex vivo genetically modified cells that are administered immediately after manufacturing, in-process sterility testing on sample taken 48 to 72 hours prior to final harvest is recommended for product release. For such products, aside from an in-process sterility test, we also recommend that sponsors perform a rapid microbial detection test, such as a Gram stain, on the final formulated product and a sterility test, compliant with 21 CFR 610.12, on the final formulated product.

이 접근법에서 무균 출하 기준은 그람 염색의 음성 결과와 48~72시간 공정 중 무균시험의 무증식 결과에 근거한다. 최종 제품으로 수행한 무균 배양 결과는 제품 출하 시점에는 나오지 않지만, 이 시험은 유용한 데이터를 제공한다. 음성 결과는 무균 기법이 유지되었다는 보증을 준다. 양성 결과는 시험대상자의 의학적 관리를 위한 정보를 제공하고, 무균 부적합 원인 조사의 계기가 된다. 최종 제형화 제품의 무균시험은 제품을 환자에게 투여한 뒤에도 최종 무균시험 결과를 얻을 때까지 전체 기간(예: USP <71> 방법의 경우 14일) 동안 계속하여야 한다.

Under this approach, the release criteria for sterility would be based on a negative result of the Gram stain and a no-growth result from the 48 to 72 hour in-process sterility test. Although the results of the sterility culture performed on the final product will not be available for product release, this testing will provide useful data. A negative result will provide assurance that an aseptic technique was maintained. A positive result will provide information for the medical management of the subject and trigger an investigation of the cause of the sterility failure. The sterility test on the final formulated product should be continued for the full duration (e.g.14 days for USP <71> method) to obtain the final sterility test result, even after the product has been administered to the patient.

무균시험 결과를 얻기 전에 제품을 출하하는 모든 경우, 임상시험 계획에는 시험대상자에게 제품을 투여한 뒤 무균시험이 양성으로 판정될 때 취할 조치를 다루어야 한다. 무균 부적합은 시험책임자와 FDA 모두에 보고하여야 한다. 양성 배양 시험 결과를 처음 받은 날부터 30일(역일) 이내에 IND 에 제출하는 정보 변경(information amendment)에 무균 부적합 원인 조사 결과와 시정조치를 포함할 것을 권장한다(21 CFR 312.31).

In all cases where product release is prior to obtaining results from the sterility test, the investigational plan should address the actions to be taken in the event that the sterility test is determined to be positive after the product is administered to a subject. You should report the sterility failure to both the clinical investigator and FDA. We recommend that you include results of the investigation of the cause of the sterility failure and any corrective actions in an information amendment submitted to your IND within 30 calendar days after initial receipt of the positive culture test result (21 CFR 312.31).

미생물 시험 결과가 양성인 경우, 시험책임자는 제품 무균 부적합에 기인할 수 있는 감염 징후가 있는지 시험대상자를 평가하여야 한다. 비무균 유전자치료제 투여에서 비롯되었을 수 있는 중대하고 예상하지 못한 약물 이상사례를 환자가 겪으면, 그 정보를 처음 받은 날부터 15일(역일) 이내에 IND 안전성 보고서로 FDA에 보고하여야 한다(21 CFR 312.32(c)). 미생물 시험 양성 결과 또는 다른 어떤 이유로 임상시험용 의약품이 시험대상자에게 불합리하고 중대한 위험을 준다고 판단하면, 그 위험을 주는 임상시험을 중단하고 FDA, 모든 임상시험심사위원회(IRB) 및 모든 시험책임자에게 알려야 한다(21 CFR 312.56(d)).

In the case of a positive microbial test result, the clinical investigator should evaluate the subject for any signs of infection that may be attributable to the product sterility failure. If the patient experiences any serious and unexpected adverse drug event that could be from administration of the non-sterile gene therapy product, then you must report this information to FDA in an IND safety report no more than 15 calendar days after your initial receipt of the information (21 CFR 312.32(c)). If you determine that an investigational drug presents an unreasonable and significant risk to subjects of a positive microbial test result or for any other reason, you must discontinue those investigations that present the risk and notify FDA, all institutional review boards, and all investigators (21 CFR 312.56(d)).

또한 제품이 때로는 무균시험 결과를 방해할 수 있다는 점에 유의한다. 예를 들어 제품 구성성분이나 제조 불순물(예: 항생제)이 진균독성 또는 항균 성질을 가질 수 있다. 따라서 USP <71> Sterility Tests 에 기술된 세균 발육 저지 및 진균 발육 저지 시험으로 무균시험의 유효성을 평가할 것을 권장한다.

In addition, please be aware that a product may sometimes interfere with the results of sterility testing. For example, a product component or manufacturing impurities (e.g., antibiotics) may have mycotoxic or anti-bacterial properties. Therefore, we recommend that you assess the validity of the sterility assay using the bacteriostasis and fungistasis testing, as described in USP <71> Sterility Tests.

사용 전에 완제의약품을 동결한다면, 환자에게 투여하기 전에 결과를 얻을 수 있도록 동결보존 전에 제품 검체로 무균시험을 수행할 것을 권장한다. 다만 해동 후 제품을 조작(예: 세척, 배양)하는 경우, 특히 개방형 시스템에서 절차를 수행한다면, 제품 품질을 보증하기 위해 무균 및 확인 시험을 포함한 추가 출하 시험을 수행해야 할 수 있다.

If you freeze the DP before use, we recommend that you perform sterility testing on a sample of the product prior to cryopreservation so that results will be available before the product is administered to a patient. However, if the product undergoes manipulation after thawing (e.g., washing, culturing), particularly if procedures are performed in an open system, you may need to perform additional release testing including sterility and identity testing to ensure product quality.

공정 중 무균시험 결과를 최종 제품 기준의 허용기준에 반영할 것을 권장한다.

We recommend that you incorporate the results of in-process sterility testing into your acceptance criteria for final product specifications.

확인 시험은 제품을 고유하게 확인하고 같은 시설의 다른 제품과 구별할 수 있어야 할 것을 권장한다. 이 시험은 표시가 완료된 최종 제품으로 수행하여 그 내용물을 확인한다(21 CFR 610.14). 단일 시험만으로는 제품 사이를 명확히 구별하기에 충분하지 않은 경우가 있으므로, 서로 다른 유형의 시험방법(예: 벡터 유전체 제한효소 절단 분석과 단백질 캡시드 분석)을 사용하는 것이 바람직한 관행이다.

We recommend that identity assays uniquely identify a product and distinguish it from other products in the same facility. This test is performed on the final labeled product to verify its contents (21 CFR 610.14). Sometimes, a single test is not sufficient to distinguish clearly among products, and therefore, it is good practice to use different types of test methods (e.g., vector genome restriction digest and protein capsid analysis).

최종 제품이 생체외 유전자 변형 세포라면, 확인 시험에 벡터(즉 발현 시험, 제한효소 절단 분석) 또는 유전자 변화의 존재를 측정하는 시험과, 최종 제품의 세포 구성에 특이적인 시험(예: 세포 표면 마커)을 포함할 것을 권장한다.

If the final product is ex vivo genetically modified cells, we recommend that identity testing include an assay to measure the presence of vector (i.e., expression assay, restriction digest) or genetic change and an assay specific for the cellular composition of the final product (e.g., cell surface markers).

제품 순도는 수령자에게 해롭거나 제품에 유해한지와 관계없이 완제품에 외래 물질이 상대적으로 없는 상태로 정의된다(21 CFR 600.3(r)). 순도 시험에는 발열성 또는 엔도톡신 시험과, 이 가이던스 V.A.3.b항 「불순물(3.2.S.3.2)」에 개략적으로 기술한 원료의약품의 잔류 제조 불순물 시험이 포함되며, 이러한 불순물에는 단백질, DNA, 세포 잔해, 제조 중 사용한 시약/구성성분(사이토카인, 성장인자, 항체, 혈청 등), 그리고 생체외 유전자 변형 세포의 경우 의도하지 않은 세포 집단이 포함될 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 제품 순도를 입증하는 데 사용하는 시험은 개발 단계에 맞아야 하며, 제품에 존재하는 불순물을 더 깊이 이해하게 되거나 제조공정을 변경함에 따라 개발 중에 바뀔 수 있다.

Product purity is defined as the relative freedom from extraneous matter in the finished product, whether or not it is harmful to the recipient or deleterious to the product (21 CFR 600.3(r)). Purity testing includes assays for pyrogenicity or endotoxin and residual manufacturing impurities, as outlined under section V.A.3.b., “Impurities (3.2.S.3.2),” of this guidance, of the DS, which may include, but are not limited to: proteins; DNA; cell debris; reagents/components used during manufacture, such as cytokines, growth factors, antibodies, and serum; and in the case of ex vivo genetically modified cells, any unintended cellular populations. The assays used to demonstrate product purity should be phase appropriate and may evolve during development as you develop greater understanding of the impurities present in your product, or as you make manufacturing process changes.

토끼 발열성 시험법은 일부 허가 생물의약품의 발열성 물질 시험에 현재 요구되는 방법이지만(21 CFR 610.13(b)), FDA는 일반적으로 투구게 아메보사이트 라이세이트(Limulus Amebocyte Lysate, LAL) 같은 대체 시험법을 허용한다.). 척수강내 또는 안구내 투여 의약품을 제외한 모든 비경구 의약품에 대해 엔도톡신 허용기준 상한을 5 Endotoxin Unit(EU)/kg 체중/시간으로 할 것을 권장한다. 척수강내 투여 의약품의 경우 허용 상한을 0.2 EU/kg 체중/시간으로 설정할 것을 권장한다. 안구내 투여 의약품의 경우 주사 또는 이식 완제의약품은 2.0 EU/dose/eye 이하(NMT), 안과용 세척 제품은 0.5 EU/mL 이하(NMT)를 허용기준으로 할 것을 권장한다.

Although the rabbit pyrogen test method is the current required method for testing certain licensed biological products for pyrogenic substances (21 CFR 610.13(b)), we generally accept alternative test methods, such as the Limulus Amebocyte Lysate (LAL).). For any parenteral drug, except those administered intrathecally or intraocularly, we recommend that the upper limit of acceptance criterion for endotoxin be 5 Endotoxin Unit (EU)/kg body weight/hour. For intrathecally-administered drugs, we recommend an upper limit of acceptance be set at 0.2 EU/kg body weight/hour. For intraocularly-administered drugs, we recommend acceptance criterion of not more than (NMT) 2.0 EU/dose/eye for injected or implanted DPs or NMT 0.5 EU/mL for ophthalmic irrigation products.

역가 측정에 사용할 모든 시험을 IND 에 기술하고 그 근거를 제시하여야 한다. 초기 단계 임상시험을 시작하는 데 역가 시험이 요구되지는 않지만, 아래와 이 가이던스 V.A.4.c항 「분석절차 밸리데이션(3.2.S.4.3)」에 기술한 대로 용량을 결정하는 적격성 평가가 잘 된 시험을 갖출 것을 권장한다. 역가 시험에 관한 추가 정보는 FDA 가이던스 「Potency Tests for Cellular and Gene Therapy Products」(참고문헌 18)를 참조한다.

You should describe and justify in your IND all assays that you will use to measure potency. A potency assay is not required to initiate early phase clinical studies, but we recommend that you have a well-qualified assay to determine dose, as described below and in section V.A.4.c., “Validation of Analytical Procedures (3.2.S.4.3),” of this guidance. For additional information on potency assays, please see FDA’s Guidance for Industry: “Potency Tests for Cellular and Gene Therapy Products (Ref. 18).

적절한 경우 생존율에 대한 최소 출하 기준을 설정하여야 한다. 생체외 유전자 변형 세포의 경우 최소 허용 생존율을 70% 이상으로 할 것을 권장한다. 이 수준을 달성할 수 없다면, 예를 들어 죽은 세포와 세포 잔해가 제품의 안전한 투여 및/또는 치료 효과에 영향을 주지 않음을 입증하는 등, 더 낮은 생존율 기준을 뒷받침하는 데이터를 제출할 것을 권장한다.

You should establish minimum release criteria for viability, where appropriate. For ex vivo genetically modified cells, we recommend a minimum acceptable viability of at least 70 percent. If this level cannot be achieved, we recommend that you submit data in support of a lower viability specification, demonstrating, for example, that dead cells and cell debris do not affect the safe administration of the product and/or the therapeutic effect.

용량 결정 시험은 완제의약품 기준의 중요한 부분이며, 임상시험 시작 전에 사용에 적합하도록 적격성 평가를 거쳐야 한다. 용량 결정 시험에 관한 추가 정보는 이 가이던스 V.A.4.a항 「기준 및 시험방법(3.2.S.4.1)」을 참조한다. 최종 제품이 유전자 변형 세포 기반 유전자치료제라면, 제품 로트 안의 유전자 변형 세포 최소 수에 대한 허용기준을 갖추어야 한다. 이러한 제품의 투여 용량은 유전자 변형 세포의 총수에 근거할 것을 권장한다.

Your dose-determining assay is an important part of your DP specifications and should be qualified as suitable for use prior to initiating clinical studies. For additional information on your dose-determining assay, please see section V.A.4.a., “Specification (3.2.S.4.1),” of this guidance. If your final product is genetically modified cell-based gene therapy, you should have an acceptance criterion for the minimum number of genetically modified cells in a product lot. We recommend that the product dose for such products be based on the total number of genetically modified cells.

최초 IND 제출에는 보통 분석절차 밸리데이션이 요구되지 않지만, 개발 초기 단계에서도 일부 안전성 관련 또는 용량 관련 시험은 적격성 평가를 할 것을 권장한다(이 가이던스 V.A.4.c항 「분석절차 밸리데이션(3.2.S.4.3)」 참조). 원료의약품 시험에 열거한 것과 같은 시험이라면 반복할 필요 없이 IND 의 해당 항을 참조하면 된다.

Validation of analytical procedures is usually not required for original IND submissions, but we do recommend that you qualify certain safety-related or dose-related assays, even at an early stage of development (see section V.A.4.c., “Validation of Analytical Procedures (3.2.S.4.3),” of this guidance). If they are the same as those listed for DS testing, you do not need to repeat them but should reference that section of your IND.

최종 제품 시험성적서(COA)가 있으면 이를, 없으면 지금까지 생산한 배치에 대한 설명을 제공하고, 독성시험, 엔지니어링 런 또는 임상시험에 사용한 완제의약품의 배치 분석 결과를 제공하여야 한다. 적절한 경우 의뢰자는 뒷받침이 되는 개발 배치도 포함할 수 있다.

You should provide final product COA(s), if available, or a description of the batches generated to date, and the results of any batch analyses for the DP used in toxicology studies, engineering runs, or clinical studies. Sponsors can also include supportive developmental batches, if appropriate.

CTD 의 「불순물(3.2.S.3.2)」 항에서 이미 제공하지 않았다면 불순물 특성분석에 관한 정보를 제공하여야 한다.

You should provide information on characterization of impurities if not previously provided in the “Impurities (3.2.S.3.2)” section of the CTD.

완제의약품 기준의 설정 근거를 제공하여야 한다. 자세한 사항은 이 가이던스 V.A.4.e항 「기준 설정 근거(3.2.S.4.5)」를 참조한다.

You should provide justification for the DP specifications. See section V.A.4.e., “Justification of Specification (3.2.S.4.5),” of this guidance for additional details.

CTD 의 「표준품 또는 표준물질(3.2.S.5)」 항에서 이미 제공하지 않았다면, 완제의약품 시험에 사용하는 표준품 또는 표준물질에 관한 정보를 제공하여야 한다.

You should provide information on the reference standards or reference materials used in testing the DP if not previously provided in the “Reference Standards or Materials (3.2.S.5)” section of the CTD.

각 1차 포장 구성품의 구성 재질 확인과 그 기준을 포함하여 용기마개 시스템에 대한 설명을 제공하여야 한다. 용기를 어떻게 멸균하는지에 관한 정보도 제공하여야 한다.

You should provide a description of the container closure systems, including identity of construction materials for each primary packaging component and its specification. You should also provide information on how the container is sterilized.

여러 최종 제품 용기의 적합성에 관한 자세한 정보와 권고는 이 가이던스 V.B.5.d항 「용기마개 시스템(3.2.P.2.4)」을 참조한다.

Please see section V.B.5.d., “Container Closure System (3.2.P.2.4),” of this guidance for more information and recommendations, regarding the suitability of different final product containers.

최종 용기가 FDA 허가(cleared) 의료기기라면 제출자료에 해당 의료기기의 510(k) 번호를 참조할 것을 권장한다. 의료기기 구성 부분을 포함하는 복합제품의 경우, FDA 「eCTD Technical Conformance Guide: Technical Specifications Document」(참고문헌 4)에 기술된 대로 이 항에 복합제품의 목차(다른 파일로의 참조 링크 포함)를 포함할 것을 권장한다.

If the final container is an FDA-cleared device, we recommend that you reference the 510(k) number for the device in your submission. For combination products containing a device constituent part, we recommend that you include a table of contents for the combination product (with reference links to other files) in this section, as described in FDA’s “eCTD Technical Conformance Guide: Technical Specifications Document” (Ref. 4).

수행한 시험의 유형, 사용한 계획서, 그리고 시험 결과를 요약하여야 한다. 요약에는 예를 들어 보관 조건과 유효기간, 그리고 사용 중 및 기구 내 보관 조건에 관한 결론을 포함하여야 한다.

You should summarize the types of studies conducted, protocols used, and the results of the studies. Your summary should include, for example, conclusions regarding storage conditions and shelf life as well as in-use and in-device storage conditions.

단기 임상시험을 제안하거나 완제의약품 제조공정의 제품 보관 시간이 짧다면, 제출하는 안정성 데이터도 그만큼 제한적일 수 있다. 개발 초기에는 제안한 임상시험의 전체 기간을 뒷받침할 유전자치료제 안정성 데이터가 없을 수 있다. 따라서 안정성 정보를 수집하는 사전 계획을 제출하고, 이 정보를 적시에(예: 연간 IND 갱신 시) IND 에 갱신할 것을 권장한다.

If a short-term clinical investigation is proposed, or if a DP manufacturing process has limited product hold times, stability data submitted may be correspondingly limited. Early in development, stability data for the gene therapy may not be available to support the entire duration of the proposed clinical investigation. Therefore, we recommend that you submit a prospective plan to collect stability information and update this information to the IND in a timely manner (e.g., in an annual IND update).

IND 제출에 허가 후 안정성시험 계획서와 안정성 이행 약속을 제출할 것을 권장하지 않는다. 다만 제품 개발이 계속되면서, 상업 생산 제품의 사용기한을 뒷받침하는 데 필요한 시험 유형을 정하기 위해 품질 심사자(Quality Reviewer)와 협의할 것을 권장한다.

We do not recommend that you provide a post-approval stability protocol and stability commitment in your IND submission. However, as product development continues, we recommend that you consult with your Quality Reviewer to determine the type of studies that will be necessary to support product expiration dates for commercial manufacturing.

IND 에 안정성시험 결과를 적절한 형식(예: 표, 그래프, 서술)으로 제공하여야 한다. 데이터 생성에 사용한 분석절차에 관한 정보도 포함하여야 하며, 이는 제출자료의 다른 항(예: CTD 의 「분석절차(3.2.P.5.2)」 항)을 참조할 수 있다.

You should provide results of the stability studies in your IND in an appropriate format (e.g., tabular, graphic, narrative). Information on the analytical procedures used to generate the data should also be included, and this may be referenced to other sections of your submission (e.g., “Analytical Procedures (3.2.P.5.2)” section of the CTD).

초기 단계 임상시험의 경우 시설 정보에는 제조 구역의 제조 흐름을 보여 주는 도면, 이 구역에서 취급하는 모든 개발 중 또는 승인된 제품에 관한 정보, 제품 접촉 설비 요약, 그리고 오염 또는 교차오염을 방지하기 위한 시설의 절차와 설계 특징에 관한 정보를 포함할 것을 권장한다. 이 가이던스 III.D항 「이전에 제출한 정보」에서 언급한 대로, 이 정보는 다른 규제 파일(예: Type V 생물의약품 마스터 파일)을 상호 참조할 수 있다.

For early phase studies we recommend that facility information should include a diagram illustrating the manufacturing flow of the manufacturing areas, information on all developmental or approved products manipulated in this area, a summary of product contact equipment, and information on procedures and design features of the facility, to prevent contamination or cross-contamination. As noted in section III.D., “Previously Submitted Information,” of this guidance this information may be cross-referenced to other regulatory files (e.g. Type V biologics master file).

품질 조직에 대한 설명을 포함할 것을 권장하며, 품질 조직의 업무에는 시약과 중요 물질의 적격성 평가 절차를 확립하고 미생물 오염, 교차오염 및 제품 혼동을 방지하는 것이 포함되어야 한다. 또한 품질 조직은 제품 개발이 진행됨에 따라 로트 부적합과 기준일탈(OOS) 결과를 조사하고 시정조치를 시행하는 방법에 관한 절차를 갖추어야 한다. IND 에 품질관리 시험과 감독을 제조 부서와 분리하는 방식을 포함하여 품질 조직의 요약을 포함할 것을 권장한다.

We recommend that you include a description of your Quality Unit whose duties should include establishing procedures to qualify reagents and critical materials, prevent microbial contamination, cross-contamination, and product mix-ups. In addition, your Quality Unit should have procedures in place to investigate lot failures, out-of-specification results, and ways to implement corrective actions as product development progresses. We recommend that your IND include a summary of your Quality Unit, including the manner in which quality control testing and oversight are separated from the manufacturing unit.

품질 시스템에 관한 추가 정보는 다음 FDA 가이던스에서 볼 수 있다: 「CGMP for Phase 1 Investigational Drugs」(참고문헌 11), 「Quality Systems Approach to Pharmaceutical CGMP Regulations」(참고문헌 27), 「Process Validation: General Principles and Practices」(참고문헌 17). FD&C법 501(a)(2)(B)항에 따라 임상시험의 모든 단계에서 CGMP 적용이 요구된다는 점에 유의한다. 다만 1상 IND 하의 대부분의 임상시험용 신약 제조에는 CGMP 규정(21 CFR 211)이 요구되지 않는다(21 CFR 210.2(c), 참고문헌 11 참조).

Additional information on quality systems can be found in the following FDA’s Guidance for Industry: “CGMP for Phase 1 Investigational Drugs” (Ref. 11); “Quality Systems Approach to Pharmaceutical CGMP Regulations” (Ref. 27); and “Process Validation: General Principles and Practices” (Ref. 17). Please note that the application of CGMP is required under section 501(a)(2)(B) of the FD&C Act at all stages of clinical investigation. However, the CGMP regulations (21 CFR Part 211) are not required for the manufacture of most investigational new drugs under Phase 1 INDs (See 21 CFR 210.2(c); Ref. 11).

외래성 인자에 의한 잠재적 오염의 위험을 평가하는 정보를 제공하여야 한다. 비바이러스성 외래성 인자의 경우 전염성 해면상 뇌병증 인자, 세균, 마이코플라스마 및 진균의 회피와 관리에 관한 상세한 정보를 제공할 것을 권장한다. 이 정보에는 구성성분의 인증 및/또는 시험과 생산 공정의 관리가 포함될 수 있다. 바이러스성 외래성 인자의 경우 바이러스 안전성 시험에 관한 정보를 제공할 것을 권장한다. 제조 구성요소의 적격성 평가를 뒷받침하는 시험 보고서와 데이터(예: 은행 물질의 외래성 인자 시험 보고서)를 이 부록의 일부로 제출할 수 있다. 이러한 시험은 생산에 사용한 물질이 안전한 것으로 간주되며, 제조 중 잠재적 위험을 시험·평가·제거하는 데 사용한 접근법이 적합함을 입증하여야 한다.

You should provide information assessing the risk of potential contamination with adventitious agents. For non-viral adventitious agents, we recommend that you provide detailed information on the avoidance and control of transmissible spongiform encephalopathy agents, bacteria, mycoplasma, and fungi. This information can include certification and/or testing of components and control of the production process. For viral adventitious agents, we recommend that you provide information on viral safety studies. Study reports and data to support qualification of your manufacturing components (such as adventitious agents test reports for banked materials) may be submitted as a part of this appendix. These studies should demonstrate that the materials used in production are considered safe and that the approaches used to test, evaluate, and eliminate potential risks, during manufacture, are suitable.

또한 외래성 인자 관리를 뒷받침하기 위해 IND 에 기술한 모든 원자재와 시약의 시험성적서를 이 항에 넣을 수 있다. 외래성 인자 시험을 위해 수집한 데이터(즉 시험 보고서)도 이 항에 넣을 수 있다.

In addition, COAs for all raw materials and reagents described in your IND may be put in this section to support control of adventitious agents. Also, data collected (i.e., study reports) for adventitious agent testing can be placed in this section.

특정 규제 지역에 해당하는 정보는 eCTD 의 지역 항에 넣을 수 있다. 여기에는 벡터 및 플라스미드 염기서열 정보, 투여 기구 정보, 그리고 이 가이던스에서 요청한 기타 정보가 포함된다.

Information that is specific to a regulatory region can be put in the regional section of eCTD. This would include vector and plasmid sequencing information, delivery device information, and other information as requested in this guidance.